كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) هي تقنية كروماتوجرافيا لعزل مكونات الخلائط غير المتطايرة.يتم تنفيذ هذه العملية عن طريق تطبيق طبقة رقيقة من المواد الممتزات على صلبة غير تفاعلية ، تُعرف باسم المرحلة الثابتة.يتم تطبيق العينة على لوحة كروماتوجرافية ثم يتم إزالتها بمزيج مذيب أو مذيب متحرك ، وهي عملية تُعرف باسم المرحلة المتنقلة (أو eluent).يتحرك المذيبات لأعلى عن طريق العمل الشعري ويفصل المكونات وفقًا للاختلافات في جاذبية المراحل الثابتة والمتنقلة.

كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة سريعة وبسيطة وتوفر نتائج حساسية عالية بتكلفة منخفضة نسبيا.

تقنية TLC مناسبة بشكل خاص لمراقبة تقدم رد الفعل ، وتحديد المركبات في الخلائط ، وتحديد النقاء أو تنقية كميات صغيرة من المركبات.عند تنفيذ TLC ، يتم وضع العينات عادة على الحافة السفلية من الشريط والاتصال بالمذيب في غرفة التطوير.في ظل ظروف شطف مختلفة ، تتحرك المركبات بسرعات مختلفة ، وبالتالي تشكل بقع منفصلة على لوحة الطبقة الرقيقة.

عملية كروماتوجرافيا طبقة رقيقة

تشبه خطوات تشغيل TLC كروماتوجرافيا الورق ، ولكن لها سرعات تشغيل أسرع وتأثيرات فصل أفضل.تتضمن العملية الأساسية لتشغيل لوحة كروماتوجرافيا طبقة رقيقة أربع مراحل رئيسية:

  1. إعداد لوحة: باستخدام أنبوب شعري ، قم بتطبيق كمية صغيرة من محلول العينة المركزة على الحافة السفلية من لوحة TLC.قبل الانتقال إلى الخطوة التالية ، دع المذيب يتبخر تمامًا.
  2. إعداد غرفة التطوير: ضع مذيب التطوير في غرفة الفصل لضمان أن يكون العمق أقل من 1 سم ، واستخدام ورق المرشح للاتصال بسطح المذيبات.
  3. عملية التطوير: ضع لوحة TLC في هذه الحاوية للتأكد من أن بقع العينة لا تغمر داخل المرحلة المتنقلة ، ثم تغطيها لمنع تبخر المذيبات.
  4. التصور: بعد تبخر المذيب من اللوحة ، لاحظ الكتل باستخدام طرق مختلفة (مثل ضوء الأشعة فوق البنفسجية أو تلطيخ).

مبدأ الفصل

يحدث فصل المركبات بسبب اختلافاتها في الجذب إلى المرحلة الثابتة واختلافاتها في قابلية الذوبان إلى المذيبات.تتنافس كل مركب ومرحلة متنقلة على موقع الربط للمرحلة الثابتة ، لذلك ستتحرك المركبات المختلفة على لوحة TLC بسرعات مختلفة.يمكن تعديل هذه الاختلافات باستخدام مذيبات مختلفة أو مخاليط المذيبات لفصل أفضل.

"آثار الفصل التي تم الحصول عليها بواسطة مراحل متنقلة مختلفة ستكون مختلفة تمامًا."

في TLC القياسية ، المرحلة الثابتة هي مادة قطبية ، مثل: السيليكون.تتفاعل المزيد من المركبات القطبية بقوة أكبر مع المرحلة الثابتة ، مما تسبب في إبطاء حركتها.في المقابل ، تستخدم المرحلة العكسية TLC مرحلة ثابتة غير قطبية ، مثل هلام السيليكا الوظيفي C18 ، وسيتحرك المركب غير القطبي ببطء في هذا الوقت ، في حين أن المركب القطبي يمكن أن يتحرك لأعلى بشكل أسرع.

اختيار المذيبات

اختيار المرحلة المتنقلة المناسبة هو مهمة حرجة ، ويمكن للباحثين استخدام مجموعة من الاعتبارات مثل ذوبان المذيبات وإيجابياتهم وسلبياتهم في TLC.تشمل مخاليط المذيبات الشائعة الاستخدام أسيتات الإيثيل والهكسان (ETOAC/HEX) والميثانول والثنائي كلورو ميثان (MEOH/DCM).

التكنولوجيا التحليلية

نظرًا لأن العديد من المواد الكيميائية عديمة اللون ، فقد طور العلماء مجموعة متنوعة من طرق التصور لمراقبة البقع ، مثل وضع صفيحة كروماتوجرافية في الظلام لجعل بعض مركبات الفلورسنت توهجًا ، أو صبغ مركبات لفترة وجيزة مع بخار اليود لتصورها.

"كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة هي تقنية مهمة ، سواء في مراقبة التفاعل وفحص النقاء."

تطبيق كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة

يستخدم كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة على نطاق واسع في مراقبة التفاعل وتحليلها.يوفر طريقة سريعة وسهلة لتقدير تقدم رد الفعل.من خلال الاختبار المقارن مع مركبات مختلفة ، يمكنك تحديد ما إذا كانت تشابهها أو ما إذا كانت نفس المادة.

بالإضافة إلى ذلك ، فإن كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة هي أيضًا عملية في فحص نقاء العينة وتنقية صغيرة الحجم.عند اكتشاف نقاء العينة ، من المثالي إظهار بقعة واحدة فقط ، وإذا ظهرت عدة نقاط ، فقد تكون مزيجًا بدلاً من مادة نقية.

مع خصائصه السريعة والفعالة ، فإن كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة ليست فقط أداة تحليلية أساسية ، ولكنها تساعد أيضًا على لعب دور رئيسي في التحكم في المكونات الصيدلانية أو فصلها.لذا ، هل ستستكشف القصة وراء هذه المركبات عديمة اللون؟

Trending Knowledge

ك شفرة بوليميراز الحمض النووي: كيف يقوم بتجميع الجينات في لحظة واحدة
مع التطور السريع لعلم الجينوم، يلعب بوليميراز الحمض النووي دورًا حيويًا في التكنولوجيا الحيوية والأبحاث الطبية. لا تقتصر وظيفة هذا الإنزيم على تكرار الحمض النووي، بل تشمل أيضًا تضخيم الجينات وتعديلها
معجزة تكرار الحمض النووي في درجات الحرارة العالية: لماذا تعتبر بوليميرات الحمض النووي الثابتة حراريا مهمة جدا؟
<ص> في لحن الحياة، يعد تكرار الحمض النووي جزءًا لا غنى عنه. في هذا العمل الدقيق، يبدو أن دور بوليميراز الحمض النووي الثابت حراريًا هو القائد، الذي يقود كل نغمة من الموسيقى الجزيئية. تنشأ ه
قطعة أثرية لتكرار الحياة: لماذا يعتبر بوليميريز الحمض النووي القابل للحرارة هو نجم تفاعل البوليميراز المتسلسل؟
في مجالات الهندسة الوراثية والبيولوجيا الجزيئية، يعد ظهور بوليميراز الحمض النووي القابل للحرارة بلا شك إنجازًا ثوريًا. هذه الإنزيمات من شركة Rexi Biotechnology مكنت من التطور السريع لتقنية تفاعل البلم

Responses