في مجال التكنولوجيا الحيوية اليوم ، كان توليف أكثر من 300 من الأحماض الأمينية من البروتين هدفًا للعلماء.هذا لا يتضمن تقنيات معقدة في الهندسة الوراثية فحسب ، بل يتطلب أيضًا طرقًا كيميائية جديدة لدعمها.في هذا الصدد ،
يوفر ظهور الربط الكيميائي الأصلي (NCL) حلاً فعالًا لتوليف البروتينات المعقدة.جوهر تقنية NCL هو أنه يمكن أن يربط الببتيدات غير المحمية المتعددة بطريقة تساهمية لبناء الببتيدات أو البروتينات طويلة السلسلة.
يكمن مفتاح العملية الكيميائية لـ NCL في خطوته الأولى في رد الفعل ، أي أن مجموعة الثيول المنفصلة لمخلفات السيستين N-terminal تتفاعل مع كبريتات C-terminal.عادة ما يتم تنفيذ هذه العملية في المرحلة المائية في ظل الظروف الفسيولوجية (الرقم الهيدروجيني ~ 7.0).عندما يتفاعل ثيول السيستين N-terminal مع كبريتات C-terminal للببتيد الثاني غير المحمي ، يتم تشكيل وسيط قابل للانعكاس.ثم يتم إعادة تجميع هذا الوسيط بسرعة من خلال آلية نقل N-acyl الداخلية ، مما يخلق رابطة أمين المطلوبة.
تكمن ميزة هذه التكنولوجيا في خصوصيتها والانتقائية ، والتي يمكن أن تتجنب بفعالية توليد المنتجات الثانوية.
المحفز الأكثر استخدامًا في عملية NCL هو حمض 4-Mercaptophenylacetic (MPAA) ، وهو أمر ضروري لتحسين غلة المنتج.علاوة على ذلك ، فإن NCL لديه نشاط كيميائي ممتاز ، مما يعني أن هناك تفاعلًا كبيرًا مع مجموعات وظيفية أخرى في التفاعل ، وهو مثالي لتوليف البروتينات المعقدة.
ينبع أساس تقنية NCL من مفهوم الربط الكيميائي الذي اقترحه ستيفن كينت ومارتينا شنولزر في عام 1992 ، وهي أول طريقة عملية لتوليف الببتيدات غير المحمية.ثم في عام 1994 ، قام فيليب داوسون وآخرون بتوسيع هذا المفهوم وتكنولوجيا NCL المقترحة.أدى هذا الاختراق إلى تكوين الروابط الأمينية الأصلية ، والتي يمكن أن تجمع بشكل أكثر فعالية البروتينات الجزيئية.
يكمن التميز في تقنية NCL في معدل الاستخدام الذري الاقتصادي واستخدام المذيبات الصديق للبيئة ، مما يدل على استجابة قوية لمفهوم الكيمياء الخضراء.
شجع تطور تقنية NCL أيضًا تطوير تقنيات مبتكرة أخرى ، مثل طريقة Sea (BIS (2-sulfanylethyl) Amido) ، مما يجعل توليف البروتينات المعقدة أكثر مرونة.تزيد هذه التقنيات المتغيرة من قدرتنا على تصنيع البروتينات باستخدام الطرق الكيميائية وفتح مساحة أوسع للاستكشاف.
لتلخيص ، لا تغير تقنية NCL الطريقة التي يتم بها تصنيع البروتينات ، بل كان لها أيضًا تأثير عميق على العديد من مجالات العلوم البيولوجية.مع تقدم العلوم والتكنولوجيا ، ستستمر هذه الطريقة بلا شك في تعزيز توسيع الحدود العلمية.في المستقبل ، كيف ستساعد هذه التكنولوجيا على تطوير جيل جديد من البروتينات؟