مع التطور السريع لعلم الجينوم، يتم تقديم أدوات وتقنيات جديدة للبحث الجيني بشكل مستمر، ولا شك أن ظهور علامات الحمض النووي المرتبط بمواقع التقييد (RAD) قد أحدث تغييرات ثورية في هذا المجال. هذا النوع الجديد من العلامات الجينية لا يمكنه فقط تسهيل رسم خرائط الارتباط، ورسم خرائط QTL، وعلم الوراثة السكانية وغيرها من الدراسات، ولكنه يُظهر أيضًا إمكانات قوية في علم الوراثة البيئية وعلم الوراثة التطوري. ص>
يكمن سحر علامات RAD في قدرتها على مسح الأشكال المتعددة في الجينوم بسرعة وكفاءة، مما يوفر وسيلة غير مسبوقة للبحث الجيني. ص>
عند إجراء وضع العلامات على RAD، تتمثل العملية الأساسية في عزل علامات RAD، وهي عبارة عن تسلسلات DNA بالقرب من كل موقع تقييد محدد لإنزيم التقييد في الجينوم. وتتمثل ميزة هذا النهج في أنه يمكن للباحثين تحديد النمط الجيني والنمط الجيني بشكل أكثر دقة، وخاصة تعدد أشكال النوكليوتيدات المفردة (SNPs). على الرغم من أن ظهور تكنولوجيا التسلسل عالية الإنتاجية قد جلب تحديات جديدة، إلا أنه جعل أيضًا تطبيق علامات RAD خيارًا ممكنًا وفعالاً من حيث التكلفة. ص>
يتطلب عزل علامات RAD هضم الحمض النووي باستخدام إنزيمات تقييد محددة، يليها ربط المحولات الموسومة بالبيوتين للتعليق. تقوم هذه العملية بتقطيع الحمض النووي بشكل عشوائي إلى أجزاء أصغر من المسافة بين مواقع التقييد، ثم تستخدم حبات الستربتومايسين لعزل الأجزاء المحملة بالبيوتين. تم إعداد مثل هذه العمليات في الأصل لتحليل المصفوفات الدقيقة، ولكن مع تقدم التكنولوجيا، أصبح التسلسل عالي الإنتاجية شائعًا الآن لإجراء هذه العملية، مما يحسن بشكل كبير من قوة معالجة البيانات ودقتها. ص>
تمثل إجراءات فصل العلامات الجديدة جزءًا مهمًا من عملية التسلسل عالي الإنتاجية، مما يجعل تحليل الجينوم أكثر كفاءة. ص>
بعد عزل علامات RAD، فإن الخطوة التالية هي استخدام هذه العلامات لتحديد الأشكال المتعددة، مثل SNPs، في تسلسل الحمض النووي. تجدر الإشارة إلى أن طرق ميكروأري السابقة لها قيود معينة في تحديد علامات RAD بسبب حساسيتها المنخفضة وعدم قدرتها على اكتشاف جميع التغييرات متعددة الأشكال بشكل فعال. ومن ناحية أخرى، مع تعزيز تكنولوجيا التسلسل عالية الإنتاجية، يمكن تحقيق كثافة أعلى للعلامات الجينية، مما يسمح للباحثين باستكشاف تنوع الجينومات بعمق وتسريع فهمهم للعلاقات بين الأنواع. ص>
يعود أول تطبيق لعلامات RAD إلى عام 2006 وتم تطويره بواسطة إريك جونسون وويليام كريسكو في جامعة أوريغون. في البداية، استخدموا علامات RAD لتحديد نقاط توقف إعادة التركيب في ذبابة الفاكهة واكتشفوا QTLs في الحبار ثلاثي الأشواك. بمرور الوقت، تطورت تقنيات وضع العلامات RAD، وأصبحت أكثر قوة وتنوعًا، مثل تقنية RADseq (ddRADseq) مزدوجة الهضم في عام 2012، والتي تتيح إجراء مسح فعال من حيث التكلفة، خاصة في اختيار الجينوم الكامل والتكيف السكاني. ص>
في عام 2016، اقترح الباحثون طريقة جديدة تسمى الالتقاط الهجين RAD (hyRAD)، والتي تستخدم شظايا RAD الموسومة بالبيوتين كتحقيقات لالتقاط الأجزاء المتماثلة بشكل فعال من المكتبات الجينومية، بحيث أنه حتى في تحليل عينات الحمض النووي شديدة التدهور يمكن أيضًا الحصول عليها إجراء. لا يقلل هذا النهج من الاعتماد على مواقع التقييد فحسب، بل يسمح أيضًا للباحثين باستكشاف تنوع الجينوم على نطاق أوسع. ص>
لقد فتح ظهور hyRAD مساحة بحثية جديدة في مجالات البحث ذات الصلة مثل علم الحفريات والتاريخ الطبيعي، مما يوفر لنا المزيد من الإمكانيات لفهم الخلفية التطورية للأنواع. ص>
إن إدخال تقنية التسلسل عالي الإنتاجية يجعل تطبيق علامات RAD لم يعد مقتصرًا على مختبرات الأبحاث، ولكن يمكن استخدامه على نطاق أوسع في أبحاث النظام البيئي. وتتمثل ميزته في أنه يمكنه تحليل أنواع متعددة في وقت واحد وربط العلاقة بين البيانات الجينومية والظواهر البيولوجية بشكل فعال. ومع مواصلة تطوير هذه التقنيات، ما هو نوع الاختراقات والابتكارات التي ستجلبها البحوث الجينية في المستقبل؟ ص>