<ص>
في البحث البيولوجي الحديث، أصبحت تقنية تشريح الليزر المجهري (LCM) أداة لا يمكن تجاهلها. إنه يوفر للعلماء طريقة لتحديد خلايا محددة بدقة تحت المجهر، مما يجعل من الممكن إجراء مجموعة متنوعة من التحليلات الجزيئية للخلية الفردية. لا تعمل هذه التقنية على تعميق فهمنا لوظائف الخلايا فحسب، بل تفتح أيضًا تطبيقات محتملة في مجال أبحاث الأمراض.
مبادئ القطع بالليزر
<ص>
تتيح تقنية تشريح الليزر الدقيق للباحثين مراقبة واختيار خلايا الأنسجة المطلوبة بشكل مباشر تحت المجهر. تستخدم هذه التقنية قدرة القطع عالية الدقة لليزر لإزالة الخلايا غير المستهدفة المحيطة للحصول على مجموعات خلايا نقية تكشف عن إشارات بيولوجية حقيقية. إن مفتاح LCM هو قدرته على دعم مجموعة متنوعة من التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك تحديد النمط الجيني للحمض النووي، وملف تعريف نسخة الحمض النووي الريبي، وتوليد مكتبة cDNA، وتحليل البروتينات، وتحليل مسار الإشارة.
يستغرق وقت تنفيذ البرنامج بأكمله عادةً ما بين 1 إلى 1.5 ساعة.
عملية الاستخراج
<ص>
في LCM، يتم دمج الليزر في المجهر وتركيزه على الأنسجة الموجودة على شريحة. يتحرك الليزر وفق مسار محدد مسبقًا من قبل المستخدم، فيقطع الخلايا غير المرغوب فيها ويستخرج الخلايا المستهدفة. في هذه العملية، تم إدخال أحدث التقنيات لطرق القطع الدقيقة غير التلامسية لتجنب التلوث الذي قد يحدث بسبب التلامس المباشر.
<ص>
هناك العديد من الطرق لاستخراج الخلايا، مثل استخدام الأسطح اللاصقة للالتصاق بالعينة، أو استخدام فيلم بلاستيكي ساخن لحمل العينة، أو أحدث تقنيات الدفع بالليزر بدون تلامس. تركز كل هذه العمليات على استخراج الخلايا دون الإضرار بالجزيئات مثل الحمض النووي والحمض النووي الريبوزي، مما يزيد من تنوعها.
عملية التشغيل
<ص>
يتم تصور مقاطع الأنسجة تحت المجهر من خلال واجهة برمجية، ويتم التعرف على الخلايا أو مجموعات الخلايا يدويًا أو تلقائيًا. هناك حاليًا ست تقنيات رئيسية لفصل الخلايا تحت المجهر. تستخدم معظم الأنظمة أشعة الليزر النبضية فوق البنفسجية لقطع الأنسجة بشكل مباشر أو يتم استخدامها بالاشتراك مع أشعة الليزر تحت الحمراء لتسخين وإذابة البوليمرات اللاصقة من أجل التصاق الخلايا وفصلها.
حتى الخلايا الحية لا تتضرر بعد القطع بالليزر ويمكن استنساخها وإعادة زراعتها في ظل ظروف مناسبة.
مجالات التطبيق
<ص>
نظرًا لأن عملية LCM لا تغير أو تضر مورفولوجيا وخصائص المواد الكيميائية للعينات التي تم جمعها، فإن هذه التقنية فعالة بشكل خاص في تحليل الحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتينات. وقد نجح العديد من الباحثين في عزل هياكل خالية من الخلايا مثل لويحات الأميلويد باستخدام تقنيات LCM. يمكن إجراء LCM على مجموعة متنوعة من عينات الأنسجة، بما في ذلك لطاخات الدم، ومستحضرات الخلايا، ومزارع الخلايا، والعينات الصلبة.
<ص>
نحن في عصر التطور السريع في العلوم البيولوجية، وإمكانات ونطاق تطبيق تقنية تشريح الليزر المجهري تتوسع باستمرار، مما يوفر آفاقًا جديدة لأبحاثنا وفهمنا للأمراض المختلفة. إلى أين ستقود هذه التكنولوجيا الطب الحيوي في المستقبل؟