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La cromatografía de capa delgada (TLC) es una técnica de cromatografía para aislar componentes de mezclas no volátiles.Este proceso se realiza aplicando una capa delgada de material adsorbente a un sólido no reactivo, conocido como fase estática.La muestra se aplica a una placa cromatográfica y luego se eluye con una mezcla de solvente o disolvente móvil, un proceso conocido como fase móvil (o eluyente).El solvente se mueve hacia arriba por acción capilar y separa los componentes de acuerdo con sus diferencias en la atracción a las fases estáticas y móviles.
La tecnologíaLa cromatografía de capa delgada es rápida, simple y proporciona resultados de alta sensibilidad a un costo relativamente bajo.
TLC es particularmente adecuada para monitorear el progreso de la reacción, identificar compuestos en mezclas, determinar la pureza o realizar la purificación de pequeñas cantidades de compuestos.Cuando se realiza TLC, las muestras generalmente se colocan en el borde inferior de la tira y se contactan con el solvente en la cámara de desarrollo.En diferentes condiciones de elución, los compuestos se mueven a diferentes velocidades, formando así puntos separados en la placa de capa delgada.
Proceso de cromatografía de capa delgada
Los pasos de operación de TLC son similares a la cromatografía en papel, pero tienen velocidades de carrera más rápidas y mejores efectos de separación.El proceso básico de ejecutar una placa de cromatografía de capa delgada incluye cuatro etapas principales:
- Preparación de la placa: Usando un tubo capilar, aplique una pequeña cantidad de solución de muestra concentrada en el borde inferior de la placa TLC.Antes de continuar con el siguiente paso, deje que el solvente se evapore por completo.
- Preparación de la sala de desarrollo: Ponga el solvente de desarrollo en la sala de separación para garantizar que la profundidad sea inferior a 1 cm, y use papel de filtro para contactar la superficie del solvente.
- Proceso de desarrollo: Ponga la placa TLC en este contenedor para garantizar que los puntos de muestra no se sumerjan dentro de la fase móvil, y luego cubra para evitar la evaporación del solvente.
- Visualización: Después de que el solvente se evapore de la placa, observe los bloques utilizando diferentes métodos (como la luz UV o la tinción).
Principio de separación
La separación de compuestos es causada por sus diferencias en la atracción a la fase estática y sus diferencias en la solubilidad hacia los solventes.Cada compuesto y fase móvil compiten en el sitio de unión de la fase estática, por lo que diferentes compuestos se moverán en la placa TLC a diferentes velocidades.Estas diferencias se pueden ajustar utilizando diferentes solventes o mezclas de solventes para una mejor separación.
"Los efectos de separación obtenidos por diferentes fases móviles serán muy diferentes".
En TLC estándar, la fase estática es una sustancia polar, como: silicona.Más compuestos polares interactúan más fuertemente con la fase estática, lo que hace que su movimiento se desacelere.En contraste, la fase inversa TLC utiliza una fase estática no polar, como el gel de sílice funcionalizado C18, y el compuesto no polar se moverá lentamente en este momento, mientras que el compuesto polar puede moverse hacia arriba más rápido.
selección de solvente
Seleccionar la fase móvil apropiada es una tarea crítica, y los investigadores pueden usar una variedad de consideraciones, como la solubilidad de los solventes y sus pros y contras en TLC.Las mezclas de solventes de uso común incluyen acetato de etilo y hexano (EtOAc/Hex) y metanol y diclorometano (MeOH/DCM).
Tecnología analítica
Dado que muchos productos químicos son incoloros, los científicos han desarrollado una variedad de métodos de visualización para observar manchas, como colocar una placa cromatográfica en la oscuridad para hacer que ciertos compuestos fluorescentes brillen o teñir brevemente compuestos con vapor de yodo para visualizarlos.
"La cromatografía de capa delgada es una técnica importante, tanto en el monitoreo de la reacción como en la inspección de pureza".
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Aplicación de cromatografía de capa delgada
La cromatografía de la capa delgada se usa ampliamente en el monitoreo y el análisis de reacción.Proporciona una manera rápida y fácil de estimar el progreso de la reacción.Mediante pruebas comparativas con diferentes compuestos, puede determinar directamente si su similitud o si son la misma sustancia.
Además, la cromatografía de capa delgada también es práctica en la inspección de la pureza de la muestra y la purificación a pequeña escala.Al detectar la pureza de la muestra, es ideal para mostrar solo un lugar, y si aparecen varios puntos, puede ser una mezcla en lugar de una sustancia pura.
Con sus propiedades rápidas y eficientes, la cromatografía de capa delgada no solo es una herramienta analítica básica, sino que también ayuda a desempeñar un papel clave en el control quiral o la separación de los ingredientes farmacéuticos.Entonces, ¿explorarás la historia detrás de estos compuestos incolores?
