La espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis) es una técnica analítica que mide la cantidad de luz ultravioleta y visible absorbida por una muestra. El método es fácil de realizar y relativamente económico, lo que lo convierte en una herramienta analítica importante en química, bioquímica y otros campos científicos. Su principio básico es utilizar la cantidad de luz absorbida por la muestra (es decir, las propiedades pigmentarias de la muestra) para identificar y cuantificar varios compuestos.
Muchas moléculas e iones absorben energía en el rango UV o visible, es decir, son moléculas de pigmento. Los fotones absorbidos excitan a los electrones del pigmento hacia orbitales moleculares de mayor energía, formando estados excitados.
La tecnología UV-Vis no sólo es adecuada para líquidos, sino que también puede utilizarse para el análisis de muestras sólidas y gaseosas. Sin embargo, la aplicación más común es el análisis de muestras en solución. Cuando una muestra se expone a la luz, la cantidad de absorción de luz que se produce es proporcional a la concentración de la muestra, lo que la convierte en una medición cuantitativa eficaz. Los disolventes orgánicos como el alcohol se suelen seleccionar para analizar compuestos que son fácilmente solubles en disolventes orgánicos, mientras que el agua se suele utilizar para probar compuestos solubles en agua.
La espectroscopia UV-visible ha demostrado tener múltiples aplicaciones en diversas investigaciones científicas. Por ejemplo, se puede utilizar para controlar los cambios estructurales del ADN. Esta técnica es particularmente popular en los campos de la química y la biología porque no sólo puede cuantificar iones de metales de transición y compuestos orgánicos altamente conjugados, sino también analizar biomacromoléculas complejas.
El método UV-Vis se puede utilizar para monitorear cambios en la estructura del ADN.
Al realizar estos análisis, las variables experimentales como la polaridad del disolvente, el pH, la temperatura y la presencia de sustancias interferentes pueden afectar el espectro de absorbancia. Esto significa que estas variables deben controlarse o tenerse en cuenta para poder identificar correctamente los componentes de una muestra. Esta técnica permite la aplicación cuantitativa de la ley de Beer-Lambert, que establece que la absorbancia de una solución es proporcional a la concentración de las especies absorbidas y a la longitud del recorrido de la luz a través de la muestra.
Si bien la tecnología UV-Vis funciona bien en una variedad de pruebas, múltiples factores como la longitud del recorrido óptico, la homogeneidad de la solución y las diferencias de composición pueden afectar la precisión de las mediciones. Especialmente en el espectro UV, cualquier luz parásita no deseada puede provocar errores de medición significativos, especialmente con absorbancias altas.
La luz parásita es cualquier luz que ingresa al detector que no está dentro del rango de longitud de onda seleccionado y puede tener un efecto significativo en los cálculos de absorbancia.
Además, cuando el pico de absorción se acerca a la saturación, se produce un aplanamiento de la absorción, lo que significa que es posible que las muestras de alta concentración no se puedan medir con precisión. Estas fuentes de incertidumbre de medición nos recuerdan que debemos abordar con cuidado el impacto de varias variables externas sobre los resultados e incluir las medidas de control necesarias en el diseño experimental para garantizar la confiabilidad de los resultados.
El diseño estructural del espectrómetro UV-visible incluye la fuente de luz, el portamuestras, el elemento de dispersión (como la rejilla) y el detector. La selección y configuración de estos componentes son cruciales para la resolución y precisión del espectro. A medida que la tecnología avanza, los equipos UV-Vis actuales tienen una variedad de usos, incluida la medición de las propiedades ópticas de películas delgadas, que son particularmente importantes en la industria de semiconductores, lo que promueve aún más el desarrollo de esta tecnología.
La espectroscopia UV-Vis también ha llegado a la industria de los semiconductores, donde se utiliza para medir el espesor y las propiedades ópticas de películas delgadas.
Sin embargo, los requisitos de precisión y validez siguen siendo elevados. Las farmacopeas de todo el mundo exigen que los espectrómetros cumplan con estrictos requisitos reglamentarios, incluida la interferencia de la luz y la precisión de la longitud de onda, lo que impulsa el avance tecnológico y la optimización continua del rendimiento del equipo.
Con el avance de la ciencia y la tecnología, y la creciente preocupación por los problemas ambientales y de salud, el alcance de aplicación de la tecnología UV-Vis seguirá expandiéndose, desde el monitoreo ambiental hasta la investigación y el desarrollo farmacéutico, y su importancia se hará cada vez más evidente. . En este mundo mágico del espectro, ¿te has preguntado alguna vez qué tipo de misterios científicos se nos revelarán en el futuro?