En la biología moderna, cómo llevar a cabo eficazmente la investigación del genoma se ha convertido en una de las tecnologías indispensables. Con el surgimiento de la tecnología de secuenciación de alto rendimiento, los investigadores ya no se limitan a los enfoques tradicionales de microarrays para identificar la diversidad genética, sino que están recurriendo a métodos de digestión enzimática dual más eficientes, como la digestión enzimática dual RAD-seq (ddRADseq). La aparición de esta tecnología ha hecho que la exploración de la biodiversidad ya no esté fuera de nuestro alcance y también ha abierto una nueva puerta para el futuro de la genómica.
Los marcadores de ADN asociados a sitios de restricción (RAD) son marcadores genéticos que son útiles en muchos estudios, como el mapeo de asociaciones, la tipificación de QTL y la genética de poblaciones.
Los marcadores RAD ayudan a los científicos a identificar genotipos al aislar la secuencia de ADN alrededor del sitio de restricción de una enzima de restricción específica, generalmente en forma de polimorfismos de un solo nucleótido (SNP). Utilizando estos marcadores, los investigadores pueden rastrear la diversidad genética, estudiar la variación genética entre generaciones y comprender la adaptabilidad de las especies durante la evolución.
Como tecnología de etiquetado de digestión enzimática doble, ddRADseq ha realizado mejoras en el diseño existente en comparación con el RADseq ordinario. Al introducir una segunda enzima de restricción y reemplazar el corte de longitud aleatorio, ddRADseq proporciona un ensayo de genotipificación más preciso y reduce costos. Esta tecnología mejorada es particularmente adecuada para exploraciones de selección del genoma completo y estudios de diferencias poblacionales.
ddRADseq permite una genotipificación poblacional eficiente y de bajo costo, lo que lo convierte en una herramienta poderosa para comprender la adaptación de las especies.
Además de ddRADseq, la introducción de la tecnología hyRAD también llamó la atención de la comunidad científica. Esta tecnología enriquece bibliotecas genómicas aleatorias utilizando fragmentos de digestión enzimática dual de RAD como sondas de captura. Este proceso no sólo mejora la cobertura de sitios entre muestras, sino que también permite el descubrimiento de información genómica antigua en muchas muestras, dando a los investigadores más opciones al procesar muestras de ADN estratigráfico.
Con el rápido desarrollo de las tecnologías ddRADseq y hyRAD, los biólogos pueden obtener conocimientos más profundos en el estudio de la genética de poblaciones, la biología evolutiva y la ecogenómica. En el estudio de especies concretas como Oedaleus decorus, estas técnicas ya han empezado a mostrar su potencia, demostrando su gran potencial en el análisis de ejemplares antiguos del pasado así como de muestras actuales.
¿Estas técnicas pasarán a formar parte del conjunto de herramientas de cada biólogo en el futuro, cambiando fundamentalmente nuestra comprensión de la biodiversidad?
El método de digestión con doble enzima no sólo proporciona un nuevo medio para la investigación genética actual, sino que también alienta a más investigadores a explorar los niveles más profundos de la biodiversidad. A medida que estas tecnologías maduran, no podemos evitar preguntarnos qué otras tecnologías innovadoras nos ayudarán a resolver otros misterios de la naturaleza en el futuro.