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La ciencia detrás de la tinción H&E: ¿Por qué los núcleos celulares se vuelven azules?
La tinción con hematoxilina y eosina (tinción H&E para abreviar) es uno de los métodos de tinción de tejidos más importantes en histología. Esta técnica de tinción se ha convertido con el tiempo en un referente en el diagnóstico médico, especialmente en el campo de la patología. Los patólogos a menudo confían en este método de tinción cuando analizan muestras de biopsia en busca de sospecha de cáncer.
La tinción H&E consta de dos tintes principales: hemo y eosina. El hemo tiñe principalmente el núcleo celular de color azul púrpura, mientras que la eosina tiñe el citoplasma y la matriz extracelular de rosa, lo que permite a los patólogos distinguir fácilmente el núcleo del citoplasma de la célula. Además, el patrón de color teñido también puede revelar la disposición estructural y la distribución celular de la muestra de tejido, proporcionando así información histológica clave.
Esta técnica de teñido se ha utilizado ampliamente por su conveniencia y eficacia desde que fue introducida por primera vez en 1877 por el químico Nicolaus Wissozky de la Universidad Imperial de Kazán en Rusia.
Propósito de H&E
El procedimiento de tinción H&E se ha convertido en el principal método de tinción en histología porque es rápido y rentable de realizar, y al mismo tiempo puede revelar una gran cantidad de características microanatómicas. Esta técnica de tinción no solo se puede utilizar para diagnosticar una variedad de condiciones histopatológicas, sino que también se puede adaptar a los efectos de una variedad de diferentes condiciones de laboratorio y fijadores de tejidos, lo que la hace extremadamente valiosa en aplicaciones prácticas.
Aunque la tinción H&E tiene una amplia aplicabilidad, en algunos casos complejos puede ser necesario un método de tinción más específico para obtener un contraste más claro.
Métodos de aplicación
Hay muchas formas de preparar soluciones reactivas para la tinción H&E y los procedimientos de tinción pueden variar de un laboratorio a otro. Aunque no existe un procedimiento estándar, una regla general es que el núcleo generalmente se tiñerá de azul, mientras que el citoplasma y la matriz extracelular aparecerán de color rosa. Este proceso estandarizado puede mantener un alto nivel de coherencia entre diferentes laboratorios.
Una vez obtenidas las muestras de tejido, normalmente se fijan, se deshidratan y se embeben en parafina fundida y luego se cortan en secciones delgadas utilizando un microtomo. En este proceso, la muestra se fija a un portaobjetos de microscopio, se retira su porción de parafina con disolvente, posteriormente se rehidrata y finalmente se prepara para la tinción.
Resultados de la tinción
El tinte hemo principalmente hace que el núcleo de la célula luzca azul o violeta intenso, mientras que la eosina tiñe el citoplasma y algunos otros tejidos en hasta cinco tonos diferentes de rosa. Esto permite a los patólogos identificar eficazmente la estructura interna de las células durante la observación. Vale la pena señalar que los glóbulos rojos se tiñerán de un rojo muy brillante, lo que los hace fáciles de identificar bajo un microscopio.
El principio de tinción del núcleo reside en la combinación de un complejo colorante-metal formado por hemo y una sal metálica (normalmente una sal de aluminio) y ADN.
Mecanismo de tinción
Aunque el hemo, la forma oxidada del hemo, es la principal fuente de color, el proceso de teñido todavía lleva el nombre del hemo. Esto se debe a que, cuando el hemo se combina con una sal metálica, adquiere propiedades similares a un tinte positivo, mientras que la eosina es un tinte negativo y ácido. La tinción de los núcleos celulares se basa principalmente en la unión entre complejos de color y ADN. Este proceso difiere del mecanismo de tinción nuclear que utiliza algunos tintes positivos.
Además, el color marrón amarillento que puede aparecer en la muestra es causado por pigmentos endógenos como la melanina, y la membrana basal requiere tinción PAS o alguna tinción con plata para mostrarlo claramente.
Ejemplos de tinción H&E
En el proceso de diagnóstico, la tinción H&E se utiliza ampliamente para la observación de diferentes tejidos, incluidos tumores, inflamación y otras condiciones patológicas. Esto no sólo muestra la importancia de este método de tinción, sino que también permite a los profesionales desempeñar su importante papel en escenarios médicos de la vida real.
La distribución del color de H&E y la representación de las estructuras en la muestra proporcionan información importante sobre citología e histología.
Con el desarrollo de la patología digital, la tinción H&E no sólo sigue siendo el estándar de oro para el diagnóstico in situ, sino que también muestra un nuevo potencial en el análisis de datos y el procesamiento de imágenes. Ante una tecnología tan utilizada, el mecanismo científico detrás de ella todavía plantea muchas preguntas, lo que nos hace preguntarnos: ¿Cómo seguirá evolucionando esta tecnología en la medicina y proporcionará diagnósticos más precisos en el futuro?
