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La magie de la microdissection laser : comment sélectionner vos cellules au microscope ?
Dans la recherche biologique moderne, la technologie de microdissection par capture laser (LCM) est devenue un outil incontournable. Il offre aux scientifiques un moyen de sélectionner avec précision des cellules spécifiques au microscope, rendant ainsi possible une variété d'analyses moléculaires unicellulaires. Cette technologie non seulement approfondit notre compréhension des fonctions cellulaires, mais ouvre également des applications potentielles dans la recherche sur les maladies.
Principes de la microdécoupe au laser
La technologie de microdissection laser permet aux chercheurs d’observer et de sélectionner directement les cellules tissulaires d’intérêt au microscope. Cette technologie utilise la capacité de découpe de haute précision des lasers pour éliminer les cellules non ciblées environnantes afin d’obtenir des populations cellulaires pures qui révèlent de véritables signaux biologiques. La clé du LCM est qu’il peut prendre en charge une variété d’applications en aval, notamment le génotypage de l’ADN, le profilage des transcriptions d’ARN, la génération de bibliothèques d’ADNc, la protéomique et l’analyse des voies de signalisation.
Le temps d’exécution de l’ensemble du programme est généralement compris entre 1 et 1,5 heure.
Processus d'extraction
En LCM, un laser est intégré dans un microscope et focalisé sur le tissu d'une lame. Le laser se déplace sur une trajectoire prédéterminée par l’utilisateur, coupant les cellules indésirables et extrayant les cellules cibles. Dans ce processus, la dernière technologie a introduit des méthodes de micro-découpe sans contact pour éviter la contamination qui peut être causée par un contact direct.
Il existe de nombreuses façons d’extraire des cellules, comme l’utilisation de surfaces collantes pour adhérer à l’échantillon, un film plastique chauffé pour maintenir l’échantillon et la dernière technologie de poussée laser sans contact. Ces procédés visent tous à extraire des cellules sans endommager les molécules telles que l’ADN et l’ARN, augmentant encore leur polyvalence.
Processus de fonctionnement
Les sections de tissus sont visualisées au microscope via une interface logicielle et les cellules ou les amas de cellules sont identifiés manuellement ou automatiquement. Il existe actuellement six techniques principales permettant de séparer les cellules au microscope. La plupart des systèmes utilisent des lasers pulsés ultraviolets pour la découpe directe des tissus ou sont utilisés en conjonction avec des lasers infrarouges pour chauffer et faire fondre des polymères adhésifs pour l'adhésion et la séparation des cellules.
Même les cellules vivantes ne sont pas endommagées après la découpe au laser et peuvent être clonées et remises en culture dans des conditions appropriées.
Domaines d'application
Parce que le processus LCM n’altère ni n’endommage la morphologie et les propriétés chimiques des échantillons collectés, cette technique est particulièrement efficace dans l’analyse de l’ADN, de l’ARN et des protéines. De nombreux chercheurs ont réussi à isoler des structures acellulaires telles que des plaques amyloïdes en utilisant des techniques LCM. La LCM peut être réalisée sur une variété d’échantillons de tissus, notamment des frottis sanguins, des préparations cytologiques, des cultures cellulaires et des échantillons solides.
Nous vivons à une époque de développement rapide des sciences biologiques, et le potentiel et le champ d’application de la technologie de microdissection laser s’élargissent constamment, ce qui offre de nouvelles perspectives pour nos recherches et notre compréhension de diverses maladies. Où cette technologie mènera-t-elle la biomédecine dans le futur ?
