La science derrière la coloration H&E : pourquoi les noyaux cellulaires deviennent-ils bleus ? 

La coloration à l'hématoxyline et à l'éosine (coloration H&E en abrégé) est l'une des méthodes de coloration des tissus les plus importantes en histologie. Cette technique de coloration est devenue au fil du temps une référence en matière de diagnostic médical, notamment dans le domaine de la pathologie. Les pathologistes s'appuient souvent sur cette méthode de coloration lorsqu'ils examinent des échantillons de biopsie en cas de suspicion de cancer.

La coloration H&E se compose de deux colorants principaux : l’hème et l’éosine. L'hème colore principalement le noyau cellulaire en bleu violet, tandis que l'éosine colore le cytoplasme et la matrice extracellulaire en rose, permettant aux pathologistes de distinguer facilement le noyau du cytoplasme de la cellule. En outre, le motif de couleur coloré peut également révéler la disposition structurelle et la distribution cellulaire de l'échantillon de tissu, fournissant ainsi des informations histologiques clés.

Cette technique de teinture a été largement utilisée pour sa commodité et son efficacité depuis qu'elle a été introduite pour la première fois en 1877 par le chimiste Nicolaus Wissozky de l'Université impériale de Kazan en Russie.

Objectif de H&E

La procédure de coloration H&E est devenue la principale méthode de coloration en histologie car elle est rapide et économique à réaliser, tout en étant capable de révéler un grand nombre de caractéristiques microanatomiques. Non seulement cette technique de coloration peut être utilisée pour diagnostiquer diverses conditions histopathologiques, mais elle peut également être adaptée aux effets d’une variété de conditions de laboratoire et de fixateurs tissulaires différents, ce qui la rend extrêmement précieuse dans les applications pratiques.

Bien que la coloration H&E ait une large applicabilité, dans certains cas complexes, une méthode de coloration plus spécifique peut être nécessaire pour obtenir un contraste plus clair.

Modalités de candidature

Il existe de nombreuses façons de préparer des solutions réactives pour la coloration H&E, et les procédures de coloration peuvent varier d'un laboratoire à l'autre. Bien qu’il n’existe aucune procédure standard, en règle générale, le noyau est généralement coloré en bleu, tandis que le cytoplasme et la matrice extracellulaire apparaissent en rose. Ce processus standardisé peut maintenir un haut niveau de cohérence entre les différents laboratoires.

Une fois les échantillons de tissus obtenus, ils sont généralement fixés, déshydratés et incorporés dans de la paraffine fondue, puis coupés en fines sections à l'aide d'un microtome. Dans ce processus, l'échantillon est fixé sur une lame de microscope, sa partie en paraffine est éliminée avec un solvant, puis réhydratée et enfin préparée pour la coloration.

Résultats de coloration

Le colorant hème fait principalement apparaître le noyau de la cellule en bleu ou en violet foncé, tandis que l'éosine colore le cytoplasme et certains autres tissus dans jusqu'à cinq nuances de rose différentes. Cela permet aux pathologistes d’identifier efficacement la structure interne des cellules lors de l’observation. Il convient de noter que les globules rouges seront colorés en rouge très vif, ce qui les rend faciles à identifier au microscope.

Le principe de la coloration du noyau réside dans la combinaison d'un complexe colorant-métal formé d'hème et d'un sel métallique (généralement un sel d'aluminium) et d'ADN.

Mécanisme de coloration

Bien que l’hème, la forme oxydée de l’hème, soit la principale source de couleur, le processus de teinture porte toujours le nom de l’hème. En effet, lorsque l’hème est combiné avec un sel métallique, il acquiert des propriétés similaires à celles d’un colorant positif, tandis que l’éosine est un colorant négatif et acide. La coloration des noyaux cellulaires repose principalement sur la liaison entre les complexes colorés et l’ADN. Ce processus diffère du mécanisme de coloration nucléaire utilisant certains colorants positifs.

De plus, la couleur brun jaunâtre qui peut apparaître dans l'échantillon est causée par des pigments endogènes tels que la mélanine, et la membrane basale nécessite une coloration au PAS ou à l'argent pour la montrer clairement.

Exemples de colorations H&E

Dans le processus de diagnostic, la coloration H&E est largement utilisée pour l’observation de différents tissus, notamment les tumeurs, les inflammations et d’autres conditions pathologiques. Cela montre non seulement l’importance de cette méthode de coloration, mais permet également aux professionnels de jouer son rôle important dans des scénarios médicaux réels.

La distribution des couleurs de H&E et la représentation des structures dans l'échantillon fournissent des informations importantes sur la cytologie et l'histologie.

Avec le développement de la pathologie numérique, la coloration H&E reste non seulement la référence en matière de diagnostic sur site, mais montre également un nouveau potentiel dans l’analyse des données et le traitement des images. Face à une technologie aussi largement utilisée, le mécanisme scientifique qui la sous-tend soulève encore de nombreuses questions, nous poussant à nous demander : comment cette technologie continuera-t-elle à évoluer en médecine et à fournir des diagnostics plus précis à l’avenir ?

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