La microscopie à fluorescence à feuille de lumière (LSFM) est une technologie de microscopie révolutionnaire qui fournit un puissant outil d'analyse d'imagerie pour la recherche en sciences biologiques. Cette technologie permet non seulement des observations avec une résolution optique moyenne à élevée, mais également d'obtenir de bonnes capacités de sectionnement optique et des vitesses de prise de vue rapides. Contrairement aux microscopes à balayage ponctuel traditionnels, le principe de base de la microscopie à feuille de lumière est d'éclairer uniquement une fine zone de l'échantillon. Cette fonction réduit les dommages causés par la lumière lors de la photographie d'échantillons vivants et convient à l'observation à long terme d'échantillons biologiques.
La microscopie à fluorescence à feuille de lumière peut acquérir des images à une vitesse de 100 à 1 000 images par seconde, ce qui est inégalé par les autres méthodes traditionnelles.
La configuration d'un microscope à feuille de lumière est relativement simple et repose principalement sur une source de lumière laser. Le laser est focalisé par une lentille cylindrique pour former une fine feuille de lumière. Cette feuille lumineuse est placée à un angle de 90 degrés par rapport à la direction de visualisation et éclaire efficacement l'échantillon.
Cette technique réduit considérablement les signaux de fond des échantillons, augmentant ainsi le contraste de l’image et permettant aux chercheurs d’observer plus clairement la structure des cellules et des tissus.
Avec le développement de la technologie de microscopie à feuille de lumière, de nombreuses méthodes d’extension ont été proposées. Par exemple, la technologie de feuille de lumière bidirectionnelle peut réduire certains artefacts d’imagerie courants et obtenir de meilleurs effets de reconstruction tridimensionnelle. De plus, la combinaison de la microscopie à feuille de lumière avec la technologie d’excitation à deux photons peut encore améliorer sa pénétration dans des échantillons épais et étendre son application dans les expériences d’imagerie cérébrale.
Dans le domaine de la biologie du développement, la microscopie à feuille de lumière offre la possibilité d'observer le développement embryonnaire sur plusieurs jours et de reconstruire des arbres de lignée de développement complets.
La capacité de traitement d'image de la microscopie à feuille de lumière lui permet d'obtenir des images 3D en peu de temps, et même de réaliser une observation 4D (temporelle) grâce à la déduction temporelle. Les observations à long terme peuvent durer plusieurs jours, et cette capacité est essentielle pour étudier les changements dans les processus biologiques.
Par exemple, les scientifiques peuvent observer les battements cardiaques des embryons de poisson zèbre en temps réel et obtenir des informations sur les changements dynamiques des activités vitales.
La technologie de microscopie à feuille de lumière continue de progresser, avec l’émergence de nouveaux modes d’imagerie et de nouvelles techniques d’optimisation. Parmi elles, l’ajout de la technologie d’optique adaptative offre la possibilité d’améliorer la qualité d’imagerie des échantillons épais. De plus, combinée à la technologie de microscopie à ultra-haute résolution, l’application de la microscopie à feuille de lumière continuera sans aucun doute à se développer et à ouvrir la voie à une nouvelle tendance dans la recherche biologique.
Le développement de la microscopie à feuille de lumière a ouvert un nouveau chapitre dans l’étude des échantillons vivants, permettant de voir en un coup d’œil chaque détail de la biologie.
Poussés par la curiosité des gens pour les sciences de la vie, y a-t-il d'autres secrets non découverts qui nous attendent grâce à la microscopie à feuille de lumière ?