Kromatografi kertas merupakan metode analisis yang digunakan untuk memisahkan bahan kimia berwarna atau zat lainnya. Meskipun teknik ini saat ini digunakan terutama sebagai alat pengajaran, di laboratorium teknik ini telah digantikan oleh metode kromatografi lain seperti kromatografi lapis tipis. Metode analisis ini memiliki tiga komponen: fase gerak, fase diam, dan media pendukung. Fase gerak adalah larutan yang naik melalui aksi kapiler pada fase diam, yang biasanya terdiri dari pelarut organik nonpolar dan fase diam adalah pelarut anorganik polar, air. Di sini, kertas bertindak sebagai pendukung fase diam, dengan molekul air ditahan di rongga dalam jaringan serat kertas.
Perbedaan utama antara kromatografi lapis tipis dan kromatografi kertas adalah bahwa dalam kromatografi lapis tipis fase diam adalah lapisan penyerap (biasanya gel silika atau aluminium oksida) sedangkan dalam kromatografi kertas digunakan kertas yang kurang menyerap.
Dalam variasi kromatografi kertas, kromatografi dua arah, dua pelarut digunakan dan kertas diputar 90 derajat di antaranya, yang sangat berguna untuk memisahkan campuran kompleks dengan polaritas yang sama, seperti asam amino.
Nilai Rƒ (Faktor retensi) digunakan untuk menentukan rasio antara jarak yang ditempuh zat terlarut dan jarak yang ditempuh pelarut. Nilai ini digunakan dalam kromatografi untuk mengukur derajat retensi sampel dalam fase diam dibandingkan dengan fase gerak. Biasanya, nilai Rƒ dinyatakan dalam desimal. Jika larutan memiliki nilai Rƒ nol, berarti zat terlarut tetap berada dalam fase diam dan tidak bergerak. Jika nilai Rƒ adalah 1, berarti zat terlarut tidak memiliki afinitas terhadap fase diam dan bergerak bersama bagian depan pelarut.
Misalnya, jika suatu senyawa bergerak sejauh 9,9 cm dan permukaan pelarut bergerak sejauh 12,7 cm, nilai Rƒ dapat dinyatakan sebagai Rƒ = 9,9/12,7 = 0,779
atau 0,78. Nilai Rƒ akan bervariasi antara pelarut yang berbeda, tergantung pada suhu dalam percobaan dan pelarut yang digunakan.
Kromatografi kertas dapat digunakan untuk menguji kemurnian senyawa dan mengidentifikasi zat karena tekniknya relatif cepat dan hanya memerlukan sedikit bahan. Proses pemisahan ini didasarkan pada prinsip distribusi. Bahan akan terbagi antara fase diam, yaitu air yang tertahan dalam serat kertas, dan fase gerak, yaitu larutan pengembang yang mengalir di atas fase diam.
Ketika sampel kimia berwarna-warni diletakkan di atas kertas saring, warna-warna tersebut terpisah saat pelarut bergerak melewatinya, melarutkan molekul-molekul sesuai dengan polaritasnya.
Jika sampel mengandung beberapa warna, warna iniArtinya, sampel harus mengandung beberapa molekul yang berbeda. Karena struktur kimia setiap molekul berbeda, ada kemungkinan besar bahwa setiap molekul akan memiliki polaritas yang berbeda, dan oleh karena itu kelarutannya dalam pelarut akan berbeda. Kelarutan yang tidak merata ini menyebabkan molekul dengan warna yang berbeda terpisah di lokasi yang berbeda pada kertas, dan semakin tinggi kelarutannya, semakin tinggi molekul padat tersebut naik.
Dalam metode ini, pelarut mengalir ke bawah kertas. Fase gerak ditempatkan dalam cairan yang menetes terus-menerus, titik sampel tetap berada di atas kertas, dan pelarut mengalir ke bawah dari atas.
Dalam metode ini, pelarut bergerak dari bawah ke atas, dan sampel serta pelarut bergerak ke atas. Metode ini sangat efektif untuk memisahkan zat organik dan anorganik.
Teknik ini merupakan gabungan dari dua metode di atas. Pada titik kritis, bagian kertas yang naik ke atas dapat dilipat kembali untuk beralih ke mode pembilasan ke bawah.
Dalam kromatografi sirkular, kertas saring melingkar dengan sampel di tengahnya ditempatkan dalam cawan petri yang berisi pelarut. Setelah pelarut mulai naik, molekul-molekul membentuk lingkaran konsentris pada kertas.
Kromatografi dua dimensi menggunakan kertas persegi atau persegi panjang, sampel dioleskan ke salah satu sudut lalu diputar 90 derajat untuk pengembangan kedua.
Pada tahun 1943, Martin dan Synge menemukan kromatografi kertas, yang untuk pertama kalinya menyediakan alat untuk menyelidiki, memisahkan, dan mengidentifikasi komponen tanaman. Selanjutnya, bidang ini berkembang pesat setelah tahun 1945, yang mendorong sebagian besar pekerjaan penelitian di bawah teknologi ini.
Munculnya teknologi ini telah mengubah pemahaman komunitas ilmiah tentang metode pemisahan dan analisis kimia serta mendorong kemajuan banyak penelitian terkait.
Di era eksplorasi molekul dan kimia yang semakin mendalam saat ini, apakah kita sepenuhnya memahami potensi Rƒ untuk teknik analisis lainnya?