Negli esperimenti chimici, sia per il monitoraggio delle reazioni che per l'ispezione quotidiana della qualità, è richiesto un metodo di analisi rapido e affidabile. La cromatografia su strato sottile (TLC), come metodo per separare miscele non volatili, è sempre più popolare tra i chimici grazie alla sua semplicità e all'elevata sensibilità. Questa tecnologia non solo può monitorare l'avanzamento della reazione, ma anche identificare gli ingredienti nella miscela e persino rilevarne la purezza. È senza dubbio uno strumento indispensabile in laboratorio.
Il principio di base della cromatografia su strato sottile risiede nella differenza nella capacità di adsorbimento di diversi composti nella fase stazionaria e nella fase mobile.
La cromatografia su strato sottile utilizza piastre cromatografiche costituite da uno strato sottile di materiale in fase stazionaria (come gel di silice) rivestito su un substrato non reattivo. Per eseguire un esperimento, il campione viene prima posto sul fondo della piastra cromatografica e poi eluito utilizzando un solvente appropriato (fase mobile). Attraverso l'azione capillare, il solvente risale, facendo sì che diversi composti si muovano a velocità diverse sulla piastra cromatografica, ottenendo infine la separazione. Questo metodo fornisce rapidi risultati sperimentali ed è ideale per studiare la progressione delle reazioni chimiche.
Il processo di esecuzione della TLC è suddiviso in quattro fasi principali, tra cui preparazione della piastra, preparazione della camera di sviluppo, sviluppo e visualizzazione. Lo sperimentatore utilizza innanzitutto un tubo capillare per individuare una parte della soluzione campione sul fondo della piastra cromatografica e assicurarsi che il solvente sia completamente evaporato. Quindi, allestire una camera di sviluppo e posizionare la quantità appropriata di solvente, quindi posizionare la piastra per cromatografia e lasciare che il solvente salga sulla piastra e si mescoli con il campione fino a quando non è vicino alla parte superiore, quindi rimuoverlo rapidamente e contrassegnare altezza del fronte del solvente.
Spesso, osservando il cambiamento di colore della lastra cromatografica o utilizzando la luce UV è possibile identificare più chiaramente il composto di interesse.
Infine, per analizzare il composto vengono utilizzate diverse tecniche di visualizzazione in base alla sua posizione e forma sulla lastra cromatografica, come la colorazione con luce UV, vapore di iodio o coloranti multicolori. Quest'ultimo passaggio può identificare efficacemente la posizione dei diversi composti sulla piastra cromatografica e facilitare la successiva analisi.
Il principio di separazione dei composti si basa principalmente sulle loro differenze di affinità e solubilità rispetto alla fase stazionaria e al solvente. La velocità con cui i diversi composti si muovono nella stessa fase mobile varierà a seconda del loro coefficiente di ripartizione. Pertanto, la scelta della fase mobile appropriata è fondamentale per garantire il successo sperimentale. Inoltre, a seconda delle diverse applicazioni, la fase stazionaria e la fase mobile possono essere selezionate in modo flessibile per ottimizzare ulteriormente l'effetto di separazione.
Quando si esegue la cromatografia su strato sottile in fase normale, le fasi stazionarie polari (come il gel di silice) possono separare efficacemente composti di polarità diverse.
La selezione del solvente è fondamentale per il successo della cromatografia su strato sottile, poiché diversi solventi influenzano la misura in cui i composti si muovono attraverso la piastra cromatografica. In generale, è possibile fare riferimento alla serie di eluizioni del solvente per selezionare la fase mobile appropriata. Ad esempio, miscele di solventi adatte per composti meno polari includono acetato di etile/esano, mentre per composti polari si può usare metanolo/cloruro di metilene.
La cromatografia su strato sottile è ampiamente utilizzata per monitorare le reazioni chimiche, caratterizzare i composti e controllare la purezza del campione. Nel monitoraggio della reazione, il progresso della reazione viene osservato individuando campioni dei reagenti e della miscela di reazione sulla stessa piastra cromatografica. Se nel campione appare solo una macchia, il campione può essere considerato puro.
La cromatografia su strato sottile non solo può controllare rapidamente l'andamento di una reazione, ma può anche essere utilizzata per testare in modo assoluto la purezza di un composto.
Essendo un metodo analitico efficace, la cromatografia su strato sottile è di notevole valore per il monitoraggio, la separazione e il rilevamento della purezza delle reazioni chimiche in laboratorio. In futuro, con l’avanzare della tecnologia, potrebbero emergere applicazioni più innovative della cromatografia su strato sottile, aumentandone ulteriormente l’importanza nella ricerca chimica. Ti sei mai chiesto in che modo la cromatografia su strato sottile influisce sul tuo progetto sperimentale?