生物学の広大な海の中で、遺伝子地図は科学者の探索を待つ目に見えない島のようなものです。制限部位関連 DNA (RAD) マーカーの登場により、種の進化の研究に新たな視点とツールがもたらされました。この遺伝子マーカーは、関連マッピング、QTL マッピング、生態遺伝学における重要性を示すだけでなく、進化遺伝学の探究への道も開きます。
制限部位関連 DNA マーカーは、資源管理と生物多様性の保全に役立つ遺伝ツールです。これらの DNA 断片は、ゲノム内の特定の制限酵素の近くにあります。 RAD タグ付け研究を実施するには、まずゲノム内の特定の制限部位を囲む DNA 配列である RAD タグを分離する必要があります。
RAD ラベリング技術はさまざまなレベルで研究され、応用されており、特に種の進化においてはその重要性を過小評価することはできません。
RAD タグを分離するプロセスは、遺伝子変異を識別するための基礎となります。このプロセスは、特定の制限酵素で DNA を消化し、ビオチン化アダプターを DNA の末端に連結することから始まります。次に DNA をランダムに切断し、ストレプトアビジン ビーズを使用してビオチン化された断片を分離します。最近、この手順も改訂され、分析にハイスループットシーケンシングを活用するようになり、精度と効率が大幅に向上しました。
RAD タグを分離した後、科学者は DNA 配列多型、特に一塩基多型 (SNP) を特定し、遺伝子型を判定することができます。これらの多型部位は RAD マーカーと呼ばれ、研究者は種の遺伝的構造とその進化の歴史について深く理解することができます。
ハイスループット DNA シーケンシングの開発により、RAD マーカーの識別に前例のない可能性とデータ密度がもたらされました。
RAD マーカーは当初マイクロアレイ技術によって実現されましたが、ハイスループット シーケンシング技術の出現により、その応用範囲はますます広がっています。 2006 年以来、オレゴン大学の Eric Johnson 研究室と William Cresko 研究室は共同でこの技術を開発し、遺伝子組み換えブレークポイントの特定と QTL 検出における RAD マーカーの有効性を実証しました。
2012 年に、科学者たちは二重消化 RAD タグ付け (ddRADseq) と呼ばれる改良された方法を提案しました。このアプローチにより、2 つの制限酵素の組み合わせが可能になり、厳格な DNA サイズ スクリーニング プロセスが追加され、低コストの集団遺伝子型判定のための効率的なソリューションが提供されます。
2016 年に hyRAD 技術が登場したことで、RAD ラベリングの範囲が拡大していることが示されました。この方法では、ビオチン化された RAD フラグメントをアライメント プローブとして使用し、ゲノム内の相同フラグメントを捕捉します。これは、現在この技術を使用している博物館の標本の場合のように、汚染されたサンプルや劣化したサンプルの遺伝情報を研究する場合に特に重要です。
hyRAD テクノロジーは、制限部位への依存を補うだけでなく、サンプル全体の部位カバレッジを大幅に向上させます。
進化する技術を通じて、RAD マーカーと関連方法は種の進化の謎を明らかにしています。これにより、ゲノミクスの意味合いが豊かになるだけでなく、生物多様性の保全のペースも速まります。今後の研究では、これらの技術をより効果的に活用する方法が、科学者が解決すべき緊急の課題となるでしょう。