生体内顕微鏡技術の出現は、間違いなく生物医学研究における大きな進歩です。この技術により、生きた動物の細胞の行動を観察できるだけでなく、多くの病気の発症における重要なプロセスを明らかにすることも可能になります。生体内顕微鏡検査により、研究者は細胞間の相互作用を高解像度で直接観察することができ、多くの疾患についてより深く理解する機会が得られます。
生体顕微鏡検査の主な利点は、複雑な多細胞生物の実際の環境における細胞を画像化できることです。
ほとんどの場合、マウスの生物学的特徴が人間と非常に似ているため、研究室ではマウスを研究対象として選択します。ただし、特殊なケースでは、ラットなどの他の実験生物の方が適切な場合もあります。生体顕微鏡検査では通常、動物にイメージングウィンドウを外科的に埋め込む必要があり、研究者は数日または数週間にわたって繰り返し観察することができます。
生体顕微鏡検査の基本的な概念は、動物の組織に埋め込まれたイメージングウィンドウを通して生きた細胞を画像化することです。この技術の最大の利点は、細胞培養環境ではなく生体内で生きた細胞を観察できることです。この機能により、研究者は自然環境における細胞の挙動を調査することができ、特に疾患プロセスや薬物の効果を評価することができます。
高品質の最新の顕微鏡と画像化ソフトウェアにより、生きた動物の細胞内画像化が可能になり、研究者は分子レベルで細胞生物学を研究できるようになりました。
蛍光タンパク質技術と遺伝子編集ツールの発達により、生体顕微鏡の研究は急速に進歩しました。これらの技術の発展により、研究者は特定の時間に標的組織内の特定の遺伝子の発現を制御することが可能になり、多くの実験研究において極めて重要な適切なトランスジェニックマウスの生成に役立っています。
生体内顕微鏡検査は、正方形蛍光イメージング、共焦点顕微鏡、周波数制御顕微鏡など、さまざまな光学技術を使用して実行できます。技術を選択する際に考慮すべき重要な点としては、望ましい浸透深度と詳細な細胞相互作用の捕捉などがあります。対象領域が表面から 50 ~ 100 ミクロン以上下にある場合は、単一光子共焦点顕微鏡よりも深い浸透が得られる二光子顕微鏡が必要です。
SHG 顕微鏡は、骨組織の下の細胞を観察できるだけでなく、生体内の血管構造の 3 次元モデルを再構築することも可能であり、研究者は血管の透過性の変化を追跡できます。
イメージング技術の進歩により、生体顕微鏡検査はより柔軟になり、細胞の動的なプロセスを捉えられるだけでなく、より高い解像度で画像化できるようになり、研究者はさまざまなレベルから細胞とその微小環境の変化を理解できるようになりました。 。
これまで、生体顕微鏡検査は主に組織または単一細胞レベルの画像化に使用されていました。しかし、娘細胞の標識技術の開発とモーションアーティファクトの低減の進歩により、現在では特定の組織の細胞小器官内の動的プロセスを画像化することが可能になりました。
生体顕微鏡検査には利点があるものの、細胞とその微小環境との相互作用を観察する際にはいくつかの制限があります。識別可能な蛍光ラベルの数により、すべての細胞タイプの可視化が制限されます。さらに、さまざまな組織の透明度と均一性の違いは、特に骨格筋などの組織の場合、イメージングの容易さに影響を与える可能性があります。
興味のある表現型を持つトランスジェニックマウスを生成することの難しさ、および野生型マウスとトランスジェニックマウスの間で観察される変化を解釈することの難しさは、科学研究における重要な問題です。
生体内顕微鏡検査は、疾患研究に前例のない視点と方法を提供しますが、その限界は将来の研究に課題をもたらすでしょうか?