생물학계에서 현미경의 발전은 언제나 생명의 신비를 밝히는 중요한 도구였습니다. 최근 LSFM(광시트형광현미경)의 출현으로 이 판도가 바뀌어 더 빠른 이미징 속도와 뛰어난 이미지 대비를 제공하여 연구자들이 살아있는 세포와 온전한 장기에서 더 선명한 시야를 얻을 수 있게 되었습니다.
광시트형광현미경은 이전 기술로는 상상할 수 없었던 초당 수십~수천 프레임의 속도로 3D 이미지를 캡처할 수 있습니다.
기존의 공초점 현미경과 비교하여 광시트 현미경의 검출 방법은 완전히 다릅니다. 이 기술에서는 샘플의 얇은 층(보통 수백 나노미터에서 수 마이크론 두께)만 수직으로 조명됩니다. 이 디자인은 샘플에 대한 빛의 손상을 줄일 수 있을 뿐만 아니라 이미지의 대비를 향상시켜 연구자가 독자는 샘플 내의 미묘한 변화를 더욱 예리하게 포착할 수 있습니다.
광시트형광현미경의 기본 설정은 원통형 렌즈를 통해 확대되고 초점이 맞춰진 레이저 빔으로 구성되어 한 방향으로만 얇은 시트를 형성합니다. 이 얇은 라이트 시트는 샘플의 특정 부분을 조명하고, 샘플에서 방출되는 형광 빛은 표준 현미경 대물렌즈를 사용하여 수집되어 이미지 센서에 투사됩니다.
평면 조명을 사용하기 때문에 광시트 형광 현미경의 이미징 속도는 기존 점 스캐닝 방법보다 100~1000배에 달할 수 있습니다.
광시트 현미경이 더 빠르기는 하지만 특별한 샘플 설정 방법도 필요합니다. 샘플은 일반적으로 현미경 아래에 매달거나 특수 지지 장치에 장착됩니다. 이러한 조치를 통해 현미경의 조명 및 감지 광 경로가 적절하게 정렬되어 선명한 이미지를 형성할 수 있습니다.
광시트 현미경의 이미징 모드에는 일반적으로 이미지 평면을 가로질러 샘플을 이동시키는 작업이 포함되며, 이미지 센서보다 큰 샘플의 경우 측면 이동이 필요합니다. 또한 연구자들은 다중 시점 이미징을 통해 이미지 해상도를 더욱 향상시킬 수 있습니다.
광시트형광현미경의 측면 해상도는 기존의 소화형광현미경과 비슷하며, 검출 대상의 능력과 사용되는 빛의 파장에 따라 달라집니다. 구조화 조명 및 초해상도 현미경과 같은 최근 몇 년간의 기술 발전으로 인해 이 기술의 기능이 더욱 향상되었으며 기존 현미경의 한계를 극복했습니다.
또한 적응광학 기술과 결합된 광시트 현미경은 두꺼운 샘플에서 더 깊은 이미지를 얻을 수 있어 이 기술을 적용할 수 있는 새로운 가능성을 열어줍니다.
광시트형광현미경은 발달 생물학, 신경과학, 약물 개발과 같은 분야에서 중요한 역할을 합니다. 이 기술을 사용하면 며칠에 걸쳐 배아 발달을 관찰할 수 있을 뿐만 아니라 많은 기존 현미경으로는 불가능했던 세포의 동적 변화를 정밀하게 추적할 수 있습니다.
광판 현미경의 출현으로 우리는 이전과는 전혀 다른 방식으로 생명을 탐구하고 이해할 수 있게 되었습니다.
미래에 기술이 더욱 발전함에 따라 광시트 현미경은 더 넓은 범위의 생물의학 연구에서 중요한 역할을 하고 생물학적 세계에 대한 우리의 이해를 변화시킬 가능성이 있습니다. 이 강력한 현미경 이미징 기술은 생명 과정에 대한 우리의 이해에 어떤 영향을 미칠까요?