Développement d’une nouvelle technique de détection du C3 Nephritic Factor : impact sur la prise en charge de la glomérulonéphrite à dépôts de C3

Abstract

Introduction La glomerulonephrite a depots de C3 (GC3) est associee a la presence d’un auto-anticorps stabilisant la C3\xa0convertase alterne (C3bBb), le C3\xa0Nephritic Factor (C3NeF), conduisant a une activation incontrolee du complement. Cependant, sa technique de detection, le test hemolytique (TH), n’est pas standardisee et reservee aux laboratoires specialises. Nous avons donc developpe la recherche de C3NeF par Luminex®. Methodes La capacite de fixation et de stabilisation d’une C3\xa0convertase alterne, formee sur bille, par des immunoglobulines G (IgG) de patients atteints de GC3\xa0a ete etudiee.\xa0Ces resultats ont ete confrontes a ceux du TH. Les anticorps anti-C3b ont ete egalement recherches. La C3Bb est formee avec du facteur B et D sur des billes recouvertes de C3b. Les IgG purifiees de patients sont ensuite ajoutees, puis la fixation des IgG anti-C3bBb (ou anti-C3b sur billes seules) est quantifiee par un anticorps anti-IgG couple\xa0a la phycoerythrine (PE). La stabilisation de la C3\xa0convertase alterne est revelee par un anticorps anti-Bb biotinyle, melange a la streptavidine-PE. Le seuil de positivite des tests (moyenne\xa0+\xa02\xa0ecarts-types) est determine a partir des IgG de 30\xa0donneurs sains et exprime en intensite de fluorescence moyenne (MFI). Resultats obtenus ou attendus Trente deux patients positifs en TH ont ete testes. 21/24\xa0etaient positifs en stabilisation\xa0(p\xa0=\xa00,62\xa0versus TH, kappa\xa0=\xa00,82) et\xa024/29\xa0en fixation de la C3bBb\xa0(p\xa0=\xa01\xa0versus TH, kappa\xa0=\xa00,72). 15/31\xa0patients presentaient des anticorps anti-C3b. Trois patients negatifs en TH presentant une GC3\xa0etaient positifs en IgG anti-C3bBb, suggerant une meilleure sensibilite du Luminex®. La MFI de l’IgG anti-C3bBb etait inversement correlee au dosage plasmatique de C3 (p\xa0=\xa00,0001). Conclusion Cette technique, simple de mise en œuvre, presente une bonne correlation avec le TH, et permettrait une meilleure detection des C3NeF et des anticorps anti-C3b. Ce test pourrait devenir l’outil de reference pour le diagnostic et le suivi des GC3.