Caracterización enzimática de una celulasa producida por Bacillus sp. (GCB-13) para la degradación de sustratos lignocelulósicos

Abstract

Para esta investigacion, se estudio la cinetica de la enzima celulasa producida por la bacteria Bacillus sp GCB-13, aislada de los geiseres de Candarave. La bacteria alcanzo una fase logaritmica a partir de las 24 horas de incubacion. La produccion enzimatica fue desarrollada usando CMC como sustrato, determinandose la concentracion de azucares reductores mediante el metodo del Acido Dinitrosalicilico (DNS) y la evaluacion de proteinas totales con el metodo de Bradford. El extracto enzimatico crudo obtenido fue aplicado sobre sustratos lignocelulosicos naturales como tallos y hojas del geranio (Pelargonium x hortorum), y sobre sustratos sinteticos como papel bond y Carboximetilcelulosa (CMC), para evaluar su potencial de degradacion. Es asi que se obtuvieron los valores de azucares reductores de 3.499 mg/ml; 0.116 mg/ml, 0.083 mg/ml y 0.593 mg/ml. Los parametros cineticos fueron calculados empleando la ecuacion de Eadie-Hofstee, obteniendo un valor de Km y V de 3.43 μM de CMC y 0.012 max mg/ml.min, respectivamente. Finalmente, se evaluaron las actividades enzimaticas a diferentes valores de pH y temperaturas, correspondiendo los mayores niveles de actividades de 4.4 U/ml a 45 °C a pH 7.0, 3.04 U/ml a 45 °C a pH 5.0 y 3.6 U/ml a 45 °C a pH 10.