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A cromatografia em camada fina (TLC) é uma técnica de cromatografia para isolar componentes de misturas não voláteis.Esse processo é realizado aplicando uma fina camada de material adsorvente a um sólido não reativo, conhecido como fase estática.A amostra é aplicada a uma placa cromatográfica e depois eluída com uma mistura móvel de solvente ou solvente, um processo conhecido como fase móvel (ou eluente).O solvente se move para cima por ação capilar e separa os componentes de acordo com suas diferenças de atração às fases estáticas e móveis.
A tecnologiaA cromatografia em camada fina é rápida, simples e fornece alta sensibilidade a um custo relativamente baixo.
TLC é particularmente adequada para monitorar o progresso da reação, identificar compostos em misturas, determinar a pureza ou executar a purificação de pequenas quantidades de compostos.Quando o TLC é realizado, as amostras geralmente são colocadas na borda inferior da tira e contatadas com o solvente na câmara de desenvolvimento.Sob diferentes condições de eluição, os compostos se movem em velocidades diferentes, formando pontos separados na placa de camada fina.
Processo de cromatografia em camada fina
As etapas de operação do TLC são semelhantes à cromatografia em papel, mas têm velocidades de corrida mais rápidas e melhores efeitos de separação.O processo básico de executar uma placa de cromatografia fina de camada inclui quatro estágios principais:
- Preparação da placa: Usando um tubo capilar, aplique uma pequena quantidade de solução de amostra concentrada na borda inferior da placa TLC.Antes de prosseguir para a próxima etapa, deixe o solvente evaporar completamente.
- Preparação da sala de desenvolvimento: Coloque o solvente de desenvolvimento na sala de separação para garantir que a profundidade seja menor que 1 cm e use papel de filtro para entrar em contato com a superfície do solvente.
- Processo de desenvolvimento: Coloque a placa TLC nesse recipiente para garantir que os pontos da amostra não submergirem na fase móvel e depois cubra para evitar a evaporação do solvente.
- Visualização: Após o solvente evapora da placa, observe os blocos usando métodos diferentes (como luz UV ou coloração).
Princípio de separação
A separação de compostos é causada por suas diferenças de atração à fase estática e suas diferenças na solubilidade aos solventes.Cada composto e fase móvel competem no local de ligação da fase estática, para que diferentes compostos se movam na placa TLC em velocidades diferentes.Essas diferenças podem ser ajustadas usando diferentes solventes ou misturas de solventes para melhor separação.
"Os efeitos de separação obtidos por diferentes fases móveis serão muito diferentes."
No TLC padrão, a fase estática é uma substância polar, como: silicone.Mais compostos polares interagem mais fortemente com a fase estática, fazendo com que seu movimento desacelere.Por outro lado, a fase reversa TLC usa uma fase estática não polar, como o gel de sílica funcionalizado C18, e o composto não polar se moverá lentamente nesse momento, enquanto o composto polar pode se mover para cima mais rapidamente.
Seleção de solvente
Selecionar a fase móvel apropriada é uma tarefa crítica, e os pesquisadores podem usar uma série de considerações, como a solubilidade dos solventes e seus prós e contras no TLC.As misturas de solventes comumente usadas incluem acetato de etila e hexano (EtOAC/Hex) e metanol e diclorometano (MeOH/DCM).
Tecnologia analítica
Como muitos produtos químicos são incolores, os cientistas desenvolveram uma variedade de métodos de visualização para observar manchas, como colocar uma placa cromatográfica no escuro para fazer com que certos compostos fluorescentes brilhem ou tingindo brevemente os compostos com vapor de iodo para visualizá -los.
"A cromatografia em camada fina é uma técnica importante, tanto no monitoramento da reação quanto na inspeção de pureza."
Aplicação de cromatografia em camada fina
A cromatografia de camada fina é amplamente utilizada no monitoramento e análise da reação.Ele fornece uma maneira rápida e fácil de estimar o progresso da reação.Por teste comparativo com diferentes compostos, você pode determinar diretamente se a semelhança deles ou se eles são a mesma substância. Além disso, a cromatografia em camada fina também é prática na inspeção da pureza da amostra e da purificação em pequena escala.Ao detectar a pureza da amostra, é ideal mostrar apenas um ponto e, se vários pontos aparecerem, pode ser uma mistura em vez de uma substância pura.Com suas propriedades rápidas e eficientes, a cromatografia em camada fina não é apenas uma ferramenta analítica básica, mas também ajuda a desempenhar um papel fundamental no controle quiral ou na separação de ingredientes farmacêuticos.Então, você explorará a história por trás desses compostos incolores?
