Com o avanço da tecnologia, os métodos tradicionais de diagnóstico de patógenos estão enfrentando desafios sem precedentes. O sequenciamento genômico metabólico clínico de próxima geração (mNGS) tem gradualmente mostrado suas vantagens únicas, especialmente no diagnóstico de doenças infecciosas complexas. Suas capacidades de detecção abrangentes o tornam tão importante quanto um super-herói.
O que é mNGS?O sequenciamento de última geração da genômica metabólica clínica oferece a possibilidade de detecção abrangente de patógenos potenciais, o que é particularmente valioso quando os métodos tradicionais são difíceis de usar.
mNGS refere-se à análise de material genético (DNA ou RNA) de microrganismos e hospedeiros em amostras clínicas por meio de tecnologia de sequenciamento de última geração, sem a necessidade de conhecer o patógeno específico. Uma vantagem fundamental dessa abordagem é sua capacidade de detectar múltiplos patógenos simultaneamente, principalmente quando outros métodos de detecção mais direcionados (como PCR) falham.
O fluxo de trabalho típico do mNGS inclui coleta de amostras, extração de RNA/DNA, preparação de estoque, sequenciamento de alto rendimento e análise bioinformática. A qualidade da coleta da amostra afeta diretamente os resultados do teste, por isso ela deve ser realizada com cautela.
As fontes de amostra mais comumente usadas incluem sangue, fezes, líquido cefalorraquidiano (LCR), urina e swabs nasofaríngeos. Ao extrair amostras, escolha o kit de extração apropriado para excluir interferências de fundo e se concentrar no RNA ou DNA do patógeno.
Devido à influência do ruído de fundo, estratégias para aumentar os sinais de patógenos são particularmente importantes. A escolha da plataforma de sequenciamento de alto rendimento depende dos objetivos da pesquisa e da experiência do laboratório. Atualmente, o sistema Illumina MiSeq é a escolha mais comum, mas tecnologias emergentes como MinION também mostram grande potencial.
A melhoria da tecnologia de sequenciamento de alto rendimento tornou o monitoramento sensível ao tempo e as aplicações epidemiológicas de várias causas desconhecidas mais imediatos e precisos.
mNGS mostra potencial significativo no diagnóstico de doenças infecciosas, especialmente para patógenos que não podem ser localizados por métodos tradicionais de detecção. Por exemplo, o mNGS supera os testes microbiológicos tradicionais no diagnóstico de meningite e encefalite.
À medida que a resistência aos antibióticos se torna um problema crescente, o mNGS fornece uma nova maneira de detectar e caracterizar esses genes, ajudando a comunidade médica a entender e enfrentar melhor esse desafio.
Embora o mNGS tenha aplicações em vários campos, desafios como sua utilidade clínica, validade laboratorial e economia ainda precisam ser enfrentados. Muitos estudos ainda estão na fase de relato de caso e carecem de ampla aplicação clínica.
ConclusãoNo futuro, se os desafios atuais puderem ser superados, o mNGS demonstrará seu valor indispensável na saúde pública e na prevenção e controle de epidemias.
Com a demanda por ferramentas de diagnóstico rápido aumentando cada vez mais, a mNGS se tornará uma prática mais comum e padrão no diagnóstico de doenças infecciosas no futuro?