Language
Country/Area
No result found
Удивительная молекулярная адгезия: какова наука, лежащая в основе аффинной хроматографии?
На волне развития биотехнологий аффинная хроматография как эффективная технология разделения и очистки привлекает внимание все большего числа исследователей. Эта технология выделяет целевые биомолекулы среди других компонентов на основе специфических связывающих взаимодействий между ними. Полезность аффинной хроматографии заключается не только в ее высокой селективности и разрешении, но и в ее способности выполнять эффективную очистку без предварительного знания физических свойств целевой биомолекулы.
Принцип аффинной хроматографии
Суть технологии аффинной хроматографии заключается в специфическом связывании между целевой биомолекулой (обычно растворенной в подвижной фазе) и лигандом, иммобилизованным на неподвижной фазе. Обычно эти лиганды прочно иммобилизованы на твердых нерастворимых матрицах, таких как агароза или полиакриламид, а химическая модификация этих матриц позволяет им создавать стабильные ковалентные связи. Далее подвижная фаза проходит через неподвижную фазу, оставляя на матрице только биомолекулы, связанные с лигандами, а несвязанные примеси удаляются через промывной буфер, и, наконец, целевые биомолекулы восстанавливаются с помощью элюирующего буфера.
Аффинная хроматография не требует точного знания молекулярной массы, заряда или гидрофобности целевых биомолекул, что делает технологию очень гибкой при разделении и очистке биомолекул.
Различные методы настройки
Аффинную хроматографию можно организовать различными способами. Общие из них включают колоночную хроматографию и методы периодической обработки. При колоночной хроматографии твердофазный материал помещают в колонку и исходную смесь пропускают через колонку с последующей промывкой и элюированием. Метод периодической обработки заключается в смешивании смеси с твердофазным материалом в контейнере, затем центрифугировании для удаления жидкой фазы, а затем промывании и элюировании. В последние годы все большее внимание также уделяется комбинированным схемам, таким как последовательное использование нескольких колонн для повышения эффективности разделения.
Конкретная область применения
Аффинная хроматография широко используется для очистки нуклеиновых кислот, очистки белков и разделения различных компонентов крови. Преимущество этого типа технологии заключается в том, что она опирается на характеристики биомолекул и позволяет добиться разделения высокой чистоты за один этап, особенно при выделении белков, обладающих сродством к конкретным лигандам.
Независимо от того, используется ли технология аффинной хроматографии для очистки рекомбинантных белков, антител в сыворотке или отдельных гликопротеинов или других специальных белков, она показывает высокую эффективность.
Различные типы информационных материалов
В аффинной хроматографии используются различные среды. Например, среды с аминокислотами можно использовать для различных белков сыворотки, а среды, связывающие ксилозу, можно использовать для разделения гликопротеинов и других сахаросодержащих веществ. С помощью этих носителей исследователи могут выбирать подходящие носители для различных прикладных задач.
Иммуноаффинная хроматография
Иммуноаффинная хроматография — это метод, основанный на специфическом связывании антигенов с антителами и обычно используемый для очистки антител из сыворотки. Эта технология имеет большое значение для изучения иммунных реакций и диагностики заболеваний. Очистка многих моноклональных антител достигается с помощью аффинной хроматографии, что делает соответствующие исследования перспективными в области клинической диагностики и биофармацевтики.
Будущее развитие
По мере развития технологий применения аффинной хроматографии станут более распространенными и разнообразными. Исследователи продолжают исследовать новые лиганды и среды, стремясь к дальнейшему повышению эффективности очистки и расширению применимых возможностей аффинной хроматографии. Кроме того, слабоаффинная хроматография также показала свою полезность при разработке лекарств, предоставив новые идеи для скрининга новых лекарств. По мере развития этой технологии в будущем появятся более неожиданные применения, расширяющие границы биологической науки.
Поскольку аффинная хроматография продолжает развиваться, как эта технология повлияет на будущее современной биомедицины и открытия лекарств?
