В современных биомедицинских исследованиях понимание динамического поведения клеток имеет решающее значение для раскрытия механизмов многих заболеваний. Технология под названием "микроскопия in vivo" становится мощным инструментом в этой области, позволяя ученым наблюдать активность клеток у живых животных. Основным преимуществом этого метода является возможность проводить наблюдения за клетками с высоким разрешением в их естественной среде, что дает ценную информацию о том, как клетки взаимодействуют друг с другом.
Прижизненная микроскопия может предоставить интуитивную картину взаимодействия между клетками и их микроокружением с микроскопической и макроскопической точки зрения.
Суть технологии прижизненной микроскопии заключается в наблюдении за живыми клетками путем имплантации окон визуализации в ткани животных. Эта минимально инвазивная хирургическая процедура позволяет исследователям проводить повторные наблюдения в течение дней или недель. Например, если исследователи хотят изучить клетки печени мыши, им необходимо имплантировать окно визуализации в брюшную полость мыши. Эта процедура обычно сопровождается анестезией, чтобы уменьшить вред для животного.
В прижизненной микроскопии могут использоваться различные оптические методы, включая широкопольную флуоресцентную микроскопию, конфокальную микроскопию, фотонную микроскопию с удвоенной частотой и т. д. Выбор каждого метода зависит, прежде всего, от глубины области, которую необходимо визуализировать, и уровня детализации межклеточных взаимодействий. Например, если интересующая область находится на глубине более 100 микрон от поверхности, лучшим выбором будет фотонная микроскопия с удвоенной частотой. Этот метод обеспечивает более глубокое проникновение, чем традиционная конфокальная микроскопия, позволяя визуализировать даже клетки, расположенные под костной тканью.
Одним из преимуществ прижизненной микроскопии является то, что она позволяет исследователям изучать поведение клеток в контексте реального многоклеточного организма, а не использовать исключительно результаты системы культивирования клеток.
Меняя различные клеточные линии флуоресцентными белками разного цвета, исследователи могут визуализировать клеточную динамику в микроокружении. Эти изображения с высоким разрешением могут даже создавать 3D-модели, показывающие взаимодействия и движения между клетками. Такая модель могла бы не только помочь оценить скорость и направление движения клеток, но и отслеживать изменения в структуре кровеносных сосудов и изменениях их проницаемости с течением времени.
С развитием технологии маркировки внутренней структуры расширяется и область применения прижизненной микроскопии. Стоит отметить, что хотя достижения прижизненной микроскопии позволили наблюдать динамику внутриклеточных органов в определенных тканях, они все же имеют определенные ограничения, такие как ограниченное количество меченых флуоресцентных агентов, что приводит к невозможности наблюдать все типы клеток. одновременно.
С точки зрения простоты визуализации различных типов тканей ткань головного мозга, как правило, проще, а ткань скелетных мышц сложнее.
В будущем, с развитием технологий и разработкой новых инструментов, прижизненная микроскопия продолжит проводить исследования в новых областях. По-прежнему растет потребность в межвидовых трансгенных мышах, которые имеют решающее значение для наблюдения за ролью конкретных генов в различных заболеваниях. В то же время, как эффективно объяснить изменения, наблюдаемые между мышами дикого типа и трансгенными мышами, также станет важной темой исследований прижизненной микроскопии.
Развитие науки и технологий часто сопровождается проблемами и возможностями. В какой степени применение прижизненной микроскопии может изменить наше понимание жизненных процессов?