<р>
В современных биологических исследованиях технология лазерной микродиссекции (ЛМД) стала инструментом, который нельзя игнорировать. Это дает ученым возможность точно выбирать определенные клетки под микроскопом, что делает возможным проведение различных молекулярных анализов отдельных клеток. Эта технология не только углубляет наше понимание клеточных функций, но и открывает потенциальные возможности ее применения в исследовании заболеваний.
р>
Принципы лазерной микрорезки
<р>
Технология лазерной микродиссекции позволяет исследователям непосредственно наблюдать и выбирать интересующие клетки тканей под микроскопом. Технология использует высокоточную режущую способность лазеров для удаления окружающих нецелевых клеток с целью получения чистых популяций клеток, выявляющих истинные биологические сигналы. Ключевым моментом LCM является то, что он может поддерживать множество последующих приложений, включая генотипирование ДНК, профилирование транскриптов РНК, создание библиотеки кДНК, протеомику и анализ сигнальных путей.
р>
Время выполнения всей программы обычно составляет от 1 до 1,5 часов. р>
Процесс экстракции
<р>
В LCM лазер интегрируется в микроскоп и фокусируется на ткани на предметном стекле. Лазер движется по траектории, заранее заданной пользователем, отсекая нежелательные клетки и извлекая целевые клетки. В этом процессе новейшие технологии внедрили методы бесконтактной микрорезки, позволяющие избежать загрязнения, которое может быть вызвано прямым контактом.
р>
<р>
Существует множество способов извлечения клеток, например, использование липких поверхностей для приклеивания образца, нагретой пластиковой пленки для удержания образца и новейшей технологии бесконтактного лазерного выталкивания. Все эти процессы направлены на извлечение клеток без повреждения молекул, таких как ДНК и РНК, что еще больше повышает их универсальность.
р>
Процесс работы
<р>
Срезы тканей визуализируются под микроскопом с помощью программного интерфейса, а клетки или клеточные кластеры идентифицируются вручную или автоматически. В настоящее время существует шесть основных методов разделения клеток под микроскопом. Большинство систем используют ультрафиолетовые импульсные лазеры для прямого разреза тканей или применяются в сочетании с инфракрасными лазерами для нагрева и расплавления адгезивных полимеров для адгезии и разделения клеток.
р>
Даже живые клетки не повреждаются после лазерной резки и могут быть клонированы и повторно культивированы в соответствующих условиях. р>
Области применения
<р>
Поскольку процесс LCM не изменяет и не повреждает морфологию и химические свойства собранных образцов, этот метод особенно эффективен при анализе ДНК, РНК и белков. Многим исследователям удалось успешно выделить бесклеточные структуры, такие как амилоидные бляшки, с помощью методов LCM. LCM можно проводить на различных образцах тканей, включая мазки крови, цитологические препараты, клеточные культуры и твердые образцы.
р>
<р>
Мы живем в эпоху бурного развития биологических наук, а потенциал и сфера применения технологии лазерной микродиссекции постоянно расширяются, что открывает новые перспективы для наших исследований и понимания различных заболеваний. Куда эта технология приведет биомедицину в будущем?
р>