Language
Country/Area
No result found
Thế giới bí ẩn của albumin huyết thanh bò: Tại sao nó lại là trợ thủ đắc lực trong phòng thí nghiệm?
Albumin huyết thanh bò (BSA hay "Fraction V") là một albumin huyết thanh từ gia súc được sử dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm, đặc biệt làm chất chuẩn cho nồng độ protein. "Fraction V" trong tên của protein xuất phát từ phần thứ năm được chiết xuất bằng phương pháp tinh chế Edwin Cohn lâu đời, phương pháp này khai thác các đặc tính hòa tan khác nhau của protein huyết tương. Trong quá trình này, các nhà khoa học dần dần chiết xuất các "phân đoạn" khác nhau bằng cách thay đổi nồng độ dung môi, độ pH, nồng độ muối và nhiệt độ. Phương pháp này lần đầu tiên được sử dụng để thương mại hóa albumin của con người và sau đó được áp dụng để sản xuất albumin huyết thanh bò.
“Tính đa dạng và ổn định của albumin huyết thanh bò khiến nó trở thành đối tác lý tưởng cho nhiều thí nghiệm khoa học.”
Tính chất của albumin huyết thanh bò
Polypeptide tiền thân có chiều dài đầy đủ của BSA bao gồm 607 axit amin. Sau khi bài tiết, peptit tín hiệu 18 dư ở đầu N bị phân cắt, do đó sản phẩm ban đầu bao gồm 589 dư lượng axit amin. Sau đó, 6 axit amin được loại bỏ để tạo thành protein BSA trưởng thành, chứa 583 axit amin. BSA có ba miền tương đồng nhưng khác nhau về cấu trúc, lần lượt được gọi là I, II và III và mỗi miền được chia thành hai miền phụ là A và B.
Các tính chất vật lý của BSA như sau:
- Số lượng dư lượng axit amin: 583
- Trọng lượng phân tử: 66.463 Da (khoảng 66,5 kDa)
- Điểm đẳng điện ở 25°C: 4,7
- Hệ số tuyệt chủng ở bước sóng 279 nm: 43.824 M⁻¹cm⁻¹
Ngoài ra, BSA có kích thước khoảng 140 × 40 × 40 Å và có hình bầu dục với một cánh chèo dài.
Chức năng
Giống như các albumin huyết thanh khác, BSA đóng vai trò chính trong việc duy trì áp suất axit photphonic trong mao mạch, vận chuyển axit béo, bilirubin, khoáng chất và hormone, đồng thời đóng vai trò là chất chống đông máu và chống oxy hóa. Có khoảng 6 vị trí liên kết axit béo chuỗi dài trên BSA, trong đó có 3 vị trí mạnh nhất nằm ở mỗi vùng.
"Albumin huyết thanh bò không chỉ là một loại protein, nó là cầu nối giữa nghiên cứu trong phòng thí nghiệm và cơ chế sinh học."
Ứng dụng
BSA thường được sử dụng làm mẫu cho các albumin huyết thanh khác, đặc biệt là albumin huyết thanh người, với độ tương đồng về cấu trúc lên tới 76%. Trong các ứng dụng sinh hóa, bao gồm xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme (ELISA), phương pháp thấm miễn dịch và hóa mô miễn dịch, BSA thường được sử dụng làm chất kích thích hoặc chất ức chế. Trong hóa mô miễn dịch, các phần mô thường được ủ với chất chặn BSA để liên kết các vị trí liên kết không đặc hiệu, có thể cải thiện tính đặc hiệu của kháng thể đối với kháng nguyên và giúp kết quả thí nghiệm chính xác hơn.
BSA còn được sử dụng làm chất dinh dưỡng trong nuôi cấy tế bào và vi sinh vật. Trong quá trình tiêu hóa enzyme hạn chế, BSA ổn định một số enzyme được tiêu hóa và ngăn chúng bám vào ống phản ứng, đầu pipet và các vật chứa khác. Thú vị hơn, BSA thường được sử dụng để xác định lượng protein khác bằng cách so sánh lượng protein chưa biết với lượng BSA đã biết (ví dụ: Xét nghiệm protein Bradford).
"BSA phổ biến vì không gây tác động và tiết kiệm chi phí trong nhiều phản ứng sinh hóa."
Ngoài ra, một công dụng khác của BSA là cô lập tạm thời các chất cản trở hoạt động của một số enzyme, thường ảnh hưởng đến hiệu suất của phản ứng chuỗi polymerase (PCR). BSA cũng đã được sử dụng rộng rãi trong việc tổng hợp các cấu trúc nano và đánh giá tác dụng độc hại hoặc có lợi của các ion kim loại và phức hợp của chúng, chắc chắn sẽ thúc đẩy nghiên cứu trong nhiều lĩnh vực.
Tóm lại, albumin huyết thanh bò chắc chắn là “trợ lý vạn năng” không thể thiếu trong nghiên cứu khoa học. Tính đa dạng và phạm vi ứng dụng rộng rãi của nó cho phép nó đóng một vai trò quan trọng trong nghiên cứu trong phòng thí nghiệm. Vậy trong tương lai sẽ có những ứng dụng BSA mới nào chưa được khám phá?
