随着分析化学的快速发展,高效能薄层色谱(HPTLC)作为薄层色谱(TLC)的延伸,提供了稳健性、简易性、快速性和高效能的优势。这项基于TLC的分析技术不仅增强了化合物的分离能力,还显著提高了定量分析的准确性。随着高品质TLC板的使用,颗粒更细小的固定相让分离过程变得更加精细。进一步的分离则可通过多次发展装置来实现,最终使HPTLC在分离效率和检出限(LOD)方面都提供了卓越的性能。
HPTLC的优势在于它能提供有关复杂或自然样品中单一化合物所产生的影响的直观信息,并结合色谱分离与酶或生物检测的效应指导。
HPTLC的运行模式可分为线性模式、圆形模式和抗圆形模式。其中,抗圆形模式在理论和实践中都被认为是最快的分离技术。这种模式使流动相能够沿着外圆路径进入基板层,然后以近乎恒定的速度向中心流动。这种方法不仅最大限度地利用了样品容量,还减少了所需的时间、层数和流动相消耗,使其成为最具成本效益的HPTLC技术。
在抗圆形HPTLC中,独特的狭带路径促进了自动化定量分析,尤其在较高的Rf值处展示了卓越的分离效果和敏感度。
HPTLC的操作始于固定相的选择,以便分离混合物中的不同化合物。大约90%的制药分离都是在正常相矽胶上进行的,然而其他如铝土矿的固定相则可用于含有解离化合物的样品,而纤维素则适用于离子化合物。对于极性化合物,则可使用逆相HPTLC。
选择流动相的过程是HPTLC中最重要的步骤之一,这通常是通过‘试错’的方式进行。然而,‘PRISMA’系统作为寻找最佳流动相的指导方案,促进了这一过程的高效性。液体选择主要依赖于固定相的吸附性及其中化合物的组成。根据不同的模式进行相应的化学溶液测试后,选出可提供最大Rf值的流动相为最终流动相。
HPTLC具有广泛的应用范围,包括制药、临床化学、法医化学、生物化学、化妆品、食品和药品分析、环境分析等领域,这都得益于它所具备的众多优势。它因能提供图像结果而成为唯一一种此类色谱方法,并提供了简单的、成本效益高的样品平行分析、高样品容量、快速结果和多重检测方法的选择。
例如,Le Roux研究小组对HPTLC在临床试验中测定沙丁胺醇血清水平的有效性做出了探索,并得出结论认为这是一种适合分析血清样品的方法。
从各种临床医学研究中可见,HPTLC的优越性得到了广泛认可,并已被强烈推荐用于血清及其他组织的药物分析。它的成功使其在许多科学领域中占据一席之地,这不仅展示了HPTLC的威力,还引人深思:在未来的研究中,HPTLC是否能为我们揭示更多潜在的科学秘密?