在組織學中,H&E染色(紅藍染色)是最為廣泛使用的染色方式之一,並且它在醫學診斷中被認為是金標準。當病理學家檢查可疑癌症的活檢時,H&E染色無疑是其常用的染色技術。這一染色法結合了兩種主要的組織染色劑,血藍學染劑和伊紅,分別為細胞核和細胞質附上鮮明的顏色。
H&E染色能讓病理學家輕鬆區分核和細胞質部分,並通過顏色的整體模式提供組織樣本結構的概覽。
血藍學染劑將細胞核染成紫藍色,而伊紅則將細胞外基質和細胞質染成粉紅色,各種細胞結構則呈現出不同的色調和混合色彩。這種顏色的對比使得病理學家可以快速識別細胞的核和質,並且能夠識別出組織的整體分佈和結構。
H&E染色之所以成為組織學的主要染色方法,部分原因是其操作快速、成本低廉,且能夠揭示大量的顯微解剖學細節。這使其能夠廣泛用於多種病理狀況的診斷。儘管H&E染色的結果不會過於依賴於固定組織所使用的化學物質或實驗室的操作不一致,但在某些情況下,則需要更專門的染色和方法來獲得足夠的對比以識別所有的組織和細胞結構。
目前有許多製備血藍學溶液的方式,而隨著不同的實驗室協定,H&E染色的製作流程也各不相同。儘管沒有標準化的操作流程,但根據慣例,細胞核應為藍色,細胞質和細胞外基質則為粉紅色。實驗室通常會根據特定病理學家的需求來調整染色的數量或類型。
在一系列過程中,組織樣本需經過固定、脫水和嵌入等步驟,最後會被切成薄片並附在顯微鏡載片上。H&E染色法使用的染劑包括與金屬鹽(或稱為固定劑)混合的血藍學,並通過在弱酸溶液中沖洗去除多餘的染色,然後再用微鹼性水進行漂白處理。在染色完成後,組織樣本會被固定於酒精中並進行瑪赫手術。
使用血藍學染劑所染的細胞核,主要呈現藍色或深紫色,同時還包括一些組織結構,如角蛋白顆粒和鈣化物。伊紅會把細胞質及部分其他結構染成多達五種不同的粉紅色,這些肉色的結構主要由細胞內或細胞外的蛋白質組成。
大多數細胞質會被伊紅染成粉紅色,紅血球則會被染成鮮紅色。
血藍學實際上是經過氧化的化合物,當與固定劑(多數情況下為鋁鹽)結合時,便會出現顏色。血藍學具有正電性,進而吸附DNA等細胞成分;而伊紅則帶有負電荷。
根據證據,血藍學的變體(即血藍鹽合金)能夠與DNA及細胞核中的蛋白質交聯,因而賦予細胞核特有的藍色。而由於某些結構如基底膜,需使用PAS染色或銀染等特殊方法才能清晰可見。
在許多組織切片樣本中,H&E染色的重要性不言而喻。舉例來說,在乳腺組織的檢測中,H&E染色可以有效幫助識別潛在的病變。而在肝臟病理檢查中,H&E表現的細胞結構所含信息,可以指引醫生對疾病進行分類和治療規劃。
對於腫瘤的檢測,病理學家能通過H&E染色觀察細胞形狀、大小以及組織結構,以便進一步評估腫瘤的良惡性並制定相應的治療方案。
H&E染色不僅簡便易行,其可重複性以及顯示出豐富結構的能力,使得它成為了醫學診斷中不可或缺的重要工具,但這是否代表了H&E的未來仍將一帆風順呢?