高效能薄層色譜(HPTLC)作為薄層色譜(TLC)的延伸,不僅提供堅韌性與簡便性,還在化合物的定量分析中展現出速度與效率。這種基於TLC的分析技術增強了化合物解析度,使定量分析更加精確。許多改善措施涉及運用更高品質的薄層色譜板,這些板的固定相粒子大小更細,促進了更佳的解析度。此外,利用多重發展裝置對分離進行重複的板面發展也能進一步提升分離性能。因此,HPTLC提供了優越的解析度與低檢測限。
HPTLC結合了色譜分離與效應導向檢測,能夠使用酶或生物分析來獲得單一化合物在複雜或自然樣品中的影響。
在HPTLC的操作中,有幾個關鍵的優勢。首先,它能直接提供有關複雜樣品中各個化合物影響的簡潔資訊。其次,它幫助選擇樣品中的重要化合物以進行進一步的高解析質量分析。HPTLC提供獨特的好處,如超高分辨率的標識、最小的樣品準備需求、對多重作用化合物的檢測,以及區分激動與拮抗效應的能力。
HPTLC有三種模式:線性模式、圓形模式和反圓形模式。其中反圓形模式在理論和實踐中都顯示出速度的優勢。這種模式通過使流動相沿著外圓路徑進入薄層,然後以幾乎恆定的速度向中心流動來實現分離。這一方法在最小化時間、層和流動相消耗的同時,最大化樣品容量,使其成為最具成本效益的HPTLC技術。與線性和圓形模式相比,反圓形模式顯示出更優越的分離能力和顯著提升的靈敏度,尤其是在較高的Rf值下。
開始HPTLC之前,必須確定固定相以分離混合物中的不同化合物。大約90%的製藥分離是在正常相的矽膠上進行;然而,對於具有解離化合物的樣品,還可以使用鋁土礦作為固定相,而對於離子化合物則可使用纖維素。高極性化合物則採用反相HPTLC方法。選擇流動相是HPTLC中最重要的過程之一,通常遵循“試錯”的實驗方法。然而,'PRISMA'系統可作為尋找最佳流動相的指南。流動相的選擇依賴於固定相的吸附性和所關注的化合物的組成。
HPTLC板通常會先用甲醇洗滌後在烘箱中乾燥,以去除過量溶劑。“噴霧式”自動樣品應用技術能克服手動應用樣品時的滴液大小和位置不確定性。
HPTLC在製藥、臨床化學、法醫化學、生物化學、化妝品、食品和藥物分析、環境分析等多個領域得到了廣泛應用,這得益於其諸多優勢。它以圖像方式呈現結果,是唯一能夠做到這一點的色譜方法,並提供簡便性、成本效益、樣品的平行分析、高樣品容量、快速結果等多項優勢,如此多的偉大特性,能否引發更多科學界的關注?
Le Roux的研究團隊對HPTLC進行評估,以確定臨床試驗中沙丁胺醇血清水平,得出這是一種適合分析血清樣品的方法。
隨著HPTLC技術的進步和應用的擴展,其在臨床及多個科技領域的利用潛力是否還能進一步挖掘,為何不思考一下呢?