Dans la recherche biomédicale actuelle, l'imagerie par fluorescence, en tant que technologie d'imagerie non invasive, fait l'objet d'une attention croissante. Grâce à cette technologie, les scientifiques peuvent visualiser les processus biologiques dans les organismes vivants et obtenir des données riches. Traditionnellement, les expériences d’imagerie par fluorescence reposaient sur la combinaison de colorants fluorescents et de protéines fluorescentes, les colorants fluorescents étant particulièrement importants en raison de leurs avantages en termes de propriétés optiques.
La fluorescence est essentiellement le processus par lequel une substance absorbe un rayonnement électromagnétique et émet une lumière d'une certaine longueur d'onde, ce qui fait que l'utilisation de colorants fluorescents continue d'augmenter dans les expériences scientifiques.
Lorsqu'une molécule absorbe de l'énergie lumineuse, son énergie est instantanément élevée à un état excité plus élevé. Cet état est de courte durée, après quoi la molécule retourne à son état fondamental et émet de la fluorescence. La lumière émise a une longueur d'onde spécifique, prédéfinie afin que l'instrument puisse être correctement configuré pour la mesure pendant l'expérience.
Par rapport aux protéines fluorescentes, les avantages des colorants fluorescents sont leur plus grande luminosité et leur photostabilité. La luminosité de la fluorescence dépend de deux facteurs principaux : le coefficient d'extinction et l'efficacité quantique. Cela signifie que le colorant fluorescent peut absorber et convertir la lumière plus efficacement lorsqu'il atteint la cible, émettant ainsi un signal fluorescent plus fort.
Prenons l'exemple du NanoOrange. Ce colorant peut se lier à la région hydrophobe des protéines et sa stabilité le distingue dans de nombreuses études.
La plage des images de fluorescence est généralement comprise entre 300 et 800 nm et l'intensité de l'image est linéairement proportionnelle au nombre de molécules fluorescentes. Les effets d'ombre et la technologie de focalisation de la lumière assurent la clarté de la lumière émise et garantissent la précision de l'image. Grâce à des systèmes d’acquisition d’images de haute qualité, les scientifiques peuvent surveiller à tout moment les changements dans les processus biologiques.
L'imagerie par fluorescence est largement utilisée dans divers domaines biomédicaux, notamment la visualisation de l'ADN par PCR, la quantification des données par Western blot et la chirurgie guidée par l'image en temps réel pour le dépistage du cancer. Ces applications démontrent l'importance des colorants fluorescents dans des processus biologiques complexes.
Par exemple, le vert d'indocyanine utilisé dans la chirurgie du cancer peut aider les médecins à identifier et à éliminer le tissu tumoral, ce qui démontre pleinement la valeur clinique de l'imagerie par fluorescence.
La communauté scientifique continue de développer des protéines fluorescentes dans le but d'améliorer leurs capacités d'imagerie. Grâce au génie génétique, les scientifiques peuvent modifier les caractéristiques de fluorescence et la longueur d’onde de travail optimale des protéines, ainsi que réduire leur sensibilité à l’environnement.
En conclusion, bien que les protéines fluorescentes jouent un rôle important dans les recherches biologiques, le manque de temps de maturation et la luminosité élevée des colorants fluorescents en font le premier choix des laboratoires. Comment les développements futurs changeront-ils notre compréhension de la technologie d’imagerie biologique et de son potentiel d’application, et quelles nouvelles technologies favoriseront-ils ?