Language
Country/Area
No result found
Dunia misterius albumin serum sapi: Mengapa ia menjadi “asisten universal” di laboratorium?
Bovine serum albumin (BSA atau "Fraction V") adalah serum albumin dari sapi yang banyak digunakan di laboratorium, khususnya sebagai standar untuk konsentrasi protein. "Fraction V" dalam nama protein berasal dari fraksi kelima yang diekstraksi dengan metode pemurnian Edwin Cohn yang sudah lama ada, yang memanfaatkan sifat kelarutan protein plasma yang berbeda. Selama proses ini, para ilmuwan secara bertahap mengekstraksi "fraksinasi" yang berbeda dengan memvariasikan konsentrasi pelarut, pH, konsentrasi garam, dan suhu. Metode ini pertama kali digunakan untuk komersialisasi albumin manusia dan kemudian diadopsi untuk produksi albumin serum sapi.
“Keragaman dan stabilitas albumin serum sapi menjadikannya mitra yang ideal untuk banyak eksperimen ilmiah.”
Sifat-sifat albumin serum sapi
Polipeptida prekursor BSA yang lengkap terdiri dari 607 asam amino. Setelah disekresikan, peptida sinyal yang terdiri dari 18 residu di N-terminus dibelah, sehingga produk awal terdiri dari 589 residu asam amino. Kemudian, 6 asam amino dihilangkan untuk membentuk protein BSA matang, yang mengandung 583 asam amino. BSA memiliki tiga domain yang homolog tetapi berbeda secara struktural, masing-masing disebut I, II, dan III, dan setiap domain dibagi lagi menjadi dua subdomain, A dan B.
Sifat fisik BSA adalah sebagai berikut:
- Jumlah residu asam amino: 583
- Berat molekul: 66.463 Da (sekitar 66,5 kDa)
- Titik isoelektrik pada suhu 25°C: 4,7
- Koefisien kepunahan pada 279 nm: 43.824 M⁻¹cm⁻¹
Selain itu, BSA berukuran sekitar 140 × 40 × 40 Å dan berbentuk oval dengan dayung yang panjang.
Fungsi
Seperti albumin serum lainnya, BSA memainkan peran penting dalam menjaga tekanan asam fosfonat dalam kapiler, mengangkut asam lemak, bilirubin, mineral dan hormon, dan juga berfungsi sebagai antikoagulan dan antioksidan. Ada sekitar 6 situs pengikatan asam lemak rantai panjang pada BSA, dengan tiga yang terkuat terletak di setiap domain.
"Albumin serum sapi lebih dari sekadar protein, ia merupakan jembatan antara penelitian laboratorium dan mekanisme biologis."
Aplikasi
BSA sering digunakan sebagai model untuk albumin serum lainnya, terutama albumin serum manusia, dengan homologi struktural hingga 76%. Dalam aplikasi biokimia, termasuk uji imunosorben terkait enzim (ELISA), imunoblotting, dan imunohistokimia, BSA sering digunakan sebagai stimulan atau inhibitor. Dalam imunohistokimia, irisan jaringan sering diinkubasi dengan agen penghambat BSA untuk mengikat tempat pengikatan nonspesifik, yang dapat meningkatkan spesifisitas antibodi terhadap antigen dan membuat hasil eksperimen lebih akurat.
BSA juga digunakan sebagai nutrisi dalam kultur sel dan mikroba. Selama pencernaan enzim restriksi, BSA menstabilkan beberapa enzim yang dicerna dan mencegahnya menempel pada tabung reaksi, ujung pipet, dan wadah lainnya. Yang lebih menarik, BSA sering digunakan untuk menentukan jumlah protein lain dengan membandingkan jumlah protein yang tidak diketahui dengan jumlah BSA yang diketahui (misalnya Uji Protein Bradford).
"BSA populer karena tidak berdampak dan hemat biaya dalam berbagai reaksi biokimia."
Selain itu, penggunaan BSA lainnya adalah untuk mengisolasi sementara zat yang menghambat aktivitas enzim tertentu, yang sering memengaruhi kinerja reaksi berantai polimerase (PCR). BSA juga telah banyak digunakan dalam sintesis nanostruktur dan mengevaluasi efek toksik atau menguntungkan dari ion logam dan kompleksnya, yang tidak diragukan lagi mendorong penelitian di banyak bidang.
Singkatnya, bovine serum albumin tidak diragukan lagi merupakan "asisten universal" yang sangat diperlukan dalam penelitian ilmiah. Keragaman dan jangkauan aplikasinya yang luas memungkinkannya memainkan peran penting dalam penelitian laboratorium. Jadi, aplikasi BSA baru apa yang belum ditemukan di masa mendatang?
