1976 年にマリオン M. ブラッドフォードによって発明されて以来、ブラッドフォードタンパク質アッセイ (クマシータンパク質アッセイとしても知られる) は、すぐに研究室に不可欠なツールとなりました。この高速かつ正確な分光分析技術は、溶液中のタンパク質の濃度を効果的に測定できます。科学界にとって、ブラッドフォード アッセイの成功の秘訣は、その有効性と利便性にあります。
ブラッドフォード タンパク質 アッセイは、クーマシー ブリリアント ブルー G-250 色素の吸収遷移に基づいており、これにより環境によって色素は異なる形態や色を示します。たとえば、酸性環境では、色素は青色になってタンパク質に結合しますが、タンパク質が存在しない場合、溶液は茶色のままです。
この分類方法により、タンパク質の能力を正確に測定できます。色素がタンパク質に結合すると、サンプルの吸光度が 465 nm から 595 nm にシフトし、この波長で読み取られて、サンプル中のタンパク質の濃度が示されます。
ブラッドフォード アッセイは、他のタンパク質アッセイよりも化学的干渉、特にナトリウムやカリウムなどの化学物質、またはスクロースなどの炭水化物に対して耐性があります。また、操作が簡単で、準備から完了までにかかる時間はわずか 30 分程度であるため、研究室での日常使用として非常に人気があります。
環境比較において、ブラッドフォードタンパク質アッセイは他の技術の欠点の一部を補います。たとえば、BCA 法や Lowry 法は特定の分子の存在下では効果的に機能しない可能性がありますが、この点では Bradford アッセイの方が適合性が高いと思われます。
しかし、ブラッドフォード アッセイには大きな利点があるにもかかわらず、いくつかの課題もあります。その直線範囲は限られているため、高粒子サンプルを測定する場合は希釈が必要であり、特定の物質(界面活性剤 SDS など)も結果に干渉する可能性があります。データの正確性を確保するには、これらの問題を運用時に慎重に考慮する必要があります。
興味深いことに、研究者たちは、コラーゲンなどの特定のタンパク質の検出精度を高めるために、ブラッドフォード アッセイを積極的に改良しています。最近の研究では、少量の SDS を適切に添加すると、他の非コラーゲンタンパク質の吸収に影響を与えることなく、コラーゲン検出時の色の吸収反応を大幅に改善できることが示されています。
これらの新しく改良されたブラッドフォード アッセイは、コラーゲンの精度を向上させるだけでなく、高コラーゲン サンプルでの適用範囲を大幅に拡大し、メソッドをより効率的かつ柔軟にします。
将来に目を向けると、より正確で多用途なタンパク質アッセイ、おそらくはほんの数ステップで迅速な実験結果を提供できるものを想像できるでしょうか?これはタンパク質に対する私たちの理解を変えるだけでなく、バイオテクノロジーの革命的な進歩を促進するでしょう。