Beata Rafinska

Unusual profiles of pediatric acute lymphoblastic leukemia with MLL gene rearrangement

The most common chromosomal abnormality of infant acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the t(4;11)(q21;q23), which gives rise to the MLL-AF4 fusion gene [1]. MLL (also known as ALL-I, HTRX or HRX) gene translocations are among the most common chromosomal abnormalities recognized in both B-lineage acute lymphoblastic leukemia (ALL) and acute myeloid leukemia (AML). Translocations interrupting the mixed lineage leukemia gene (MLL) occur in 7 – 10% of acute lymphoblastic leukemia and 5 – 6% of acute myeloid leukemia cases [2]. The MLL gene, which is located at the 11q23, has been cloned and has homology to the Drosophila trithorax gene [3]. MLL is required for the proper maintenance of HOX gene expression during development and hematopoiesis. About 50 different MLL fusion partners have been isolated to date, and while similarities exist between groups of partners, there exists no unifying property shared by all the partners. MLL gene rearrangements are found in leukemias with both lymphoid and myeloid phenotypes, and are often associated with infant and secondary leukemias. The immature phenotype of the leukemic blasts suggests an important role, including therapyrelated leukemias, for MLL in the early stages of hematopoietic development [4 – 6]. Rearrangements of chromosome band 11q23 are common in infant leukemias, comprising more than 70% of the observed chromosome abnormalities in children less than 1 year of age [3]. Mixed lineage leukemia (MLL) abnormalities occur in *50% of childhood pre-pre-B acute lymphoblastic leukemia [7]. In spite of the fact that it is one of the most common nonrandom chromosomal abnormalities, there are scant data showing occurrence of MLL rearrangement in childhood ALL with different phenotype, such as common-ALL or T-ALL. We analyzed 121 consecutive pediatric ALL cases diagnosed and treated in one center. All children were screened at diagnosis for immunophenotype, DNA index, karyotype by G-banding method, MLL, and BCR-ABL gene rearrangements by FISH (fluorescence in situ hybridization) and RT-PCR. Both conventional cytogenetics and FISH were carried out. FISH analysis was performed utilizing commercially available DNA probes, including whole chromosome painting probes, locus specific probes, and specific dual color translocation fusion probes. As far as MLL rearrangements are concerned, FISH can not only detect reciprocal translocation but also a deletion of at least 190 kb from the 30 region of the MLL gene [8]. Common/ pre-B-ALL immunophenotype was diagnosed as CD19þ, HLA-DRþ, CD10þ, and surface immunoglobulin7 [sIg7]; pre-pre-B-ALL (pro-B-ALL) immunophenotype as (CD19þ, HLA-DRþ, CD107, cytoplasmic m chain7 and surface immunoglobulin7 [sIg7]). Mature B-ALL cells characterized

Hiperdiploidia limfoblastów i jej związek z immunofenotypem w ostrej białaczce limfoblastycznej

Wstep Do najwazniejszych badan diagnostycznych w ostrej bialaczce limfoblastycznej (ALL) zalicza sie: badania morfologiczne, badania cytochemiczne, immunofenotypowanie, badania indeksu DNA i analize cyklu komorkowego oraz badania cytogenetyczne i molekularne aberracji chromosomowych. Cel pracy Analiza związku wynikow badania immunologicznego i analizy faz cyklu komorkowego określanych metodą cytometrii przeplywowej z obrazem cytogenetycznym przy rozpoznaniu ostrej bialaczki limfoblastycznej u dzieci. Pacjenci i metodyka Analize profilu diagnostycznego pacjentow z nowo rozpoznaną ALL przeprowadzono u 151 dzieci. Za kryterium rozpoznania ostrej bialaczki limfoblastycznej przyjeto stwierdzenie w szpiku kostnym co najmniej 20% blastow bialaczkowych. Immunofenotyp blastow i indeks DNA oznaczano metodą cytometrii przeplywowej. Badania cytogenetyczne wykonano metodą prązkową, a badania molekularne metodami FISH i PCR. Wyniki i wnioski Pacjenci z ostrą bialaczką limfoblastyczną z wartością indeksu DNA limfoblastow powyzej 1,16 mają immunofenotyp charakterystyczny dla prekursorow limfocyta B, w przewazającej wiekszości przypadkow z obecnością antygenu common CD10. Aberracje cytogenetyczne limfoblastow o charakterze hiperdiploidii lub rearanzacji genow TEL-AML1 stwierdzono wylącznie wśrod pacjentow z immunofenotypem common-ALL. Nie stwierdzono znaczenia prognostycznego wartości indeksu DNA limfoblastow. Korzystny profil cytogenetyczny wyrazający sie hiperdiploidią limfoblastow lub obecnością translokacji t(12;21) lub rearanzacji TEL-AML1 ma bardzo korzystne znaczenie rokownicze w ostrej bialaczce limfoblastycznej.

Profil diagnostyczny wznowy ostrej białaczki limfoblastycznej

Ostra bialaczka limfoblastyczna (ALL) jest najczestszym nowotworem u dzieci. Pomimo stalego postepu w terapii ALL, u okolo 20% pacjentow z tą chorobą dochodzi do wznowy. Szacuje sie, ze wznowa ostrej bialaczki limfoblastycznej moze byc traktowana jako czwarty co do czestości nowotwor wieku dzieciecego. Cel pracy Analiza profilu diagnostycznego ALL w okresie rozpoznania i we wznowie szpikowej. Pacjenci i metodyka Badaniom poddano 24 pacjentow ze wznową szpikową ALL, u ktorych przeprowadzono analize profilu diagnostycznego choroby w momencie rozpoznania i jej wznowy (morfologia limfoblastow wg klasyfikacji FAB, badania cytochemiczne, analiza immunofenotypu metodą cytometrii przeplywowej, ocena indeksu DNA i analiza cyklu komorkowego, analiza wynikow badan cytogenetycznych i molekularnych). Wyniki We wznowie stwierdzono zmiany w morfologii blastow (u 3 pacjentow z L1 na L2), zmiany reakcji PAS lącznie u 4 dzieci, zmiany w immunofenotypie u 7 pacjentow, w tym u 4 z ALL z linii B-komorkowej oraz u 3 z rozpoznaniem ALL linii T-komorkowej. Zmiana immunofenotypu byla związana ze zmianą wartości indeksu DNA w 3 przypadkach. Stwierdzono 2,4-krotnie wieksze ryzyko wznowy u pacjentow, u ktorych na limfoblastach nie wystepowal antygen CD10 (tj. pre-pre-B-ALL lub T-ALL) niz u pacjentow z obecnością CD10 (tj. common-pre-B-ALL). We wznowie stwierdzono nieprawidlowy kariotyp limfoblastow u wiekszości pacjentow. Wniosek We wznowie ALL u dzieci stwierdza sie zmiany w morfologii i immunofenotypie limfoblastow, czestsze wystepowanie bardziej niedojrzalego immunofenotypu, zlozonych zaburzen cytogenetycznych oraz rzadkie wystepowanie korzystnych zmian cytogenetycznych.