C. Moinard

P015 Le niveau d’apport azoté module l’expression des enzymes du carrefour arginine-ornithine-citrulline dans les cellules Caco-2/TC7

Introduction et but de l’etude Le flux portal d’Arginine (Arg) est un element cle de la regulation de l’ureogenese hepatique. L’intestin est l’organe qui controle la disponibilite de l’Arg apportee par voie digestive. Cela dependrait d’une modulation de l’expression de differentes enzymes (arginase, glutaminase, ornithine ami-notransferase (OAT) et argininosuccinate lyase (ASL) et synthetase (ASS)) par les apports en proteines de la ration alimentaire. Le but de ce travail a ete d’etudier l’influence d’apports croissants en acides amines (AA) sur l’expression de ces enzymes dans un modele de cellules intestinales, les cellules Caco-2/TC7. Materiel et methodes Des cellules Caco-2/TC7 ont ete cultivees sur filtre semi-permeable pendant 15 jours en milieu standard puis ont ete reparties en 4 groupes (n=3). Les cellules ont alors ete exposees pendant 3 jours a differents milieux depourvu d’AA (0), ou contenant des concentrations croissantes en AA, correspondant a une (1X), deux (2X) et quatre (4X) fois les concentrations physiologiques plasmatiques post-prandiales. Les ARNm codant pour les enzymes d’interet ont ete quantifies par PCR en temps reel. Les resultats ont ete analyses par regression lineaire (test de Student sur la pente). Resultats Il existe une relation inverse entre les apports en AA et l’expression de la glutaminase (p= 0,028), de l’OAT (p= 0,035), de l’ASS (p= 0,028) et de l’arginase (p= 0,058). Conclusions Cette etude montre pour la premiere fois un effet direct des AA sur la regulation au niveau transcriptionnel des enzymes du carrefour intestinal de l’arginine en fonction de l’apport Tableau 1 [AA] Glutaminase Arginase OAT ASS O 1,03 ± 0,34 2,85 ± 1,81 ,33 ± 1,44 1,49±0,48 1X 1,05 ± 0,19 0,96 ± 0,01 1,02 ± 0,01 0,91 ± 0,10 2X 0,34 ± 0,05 1,11 ± 0,15 0,42 ± 0,07 0,55 ± 0,02 4X 0,37 ± 0,10 0,27 ± 0,07 0,29 ± 0,04 0,52 ± 0,11 Les niveaux d’expression des differentes enzymes, rapportees a la quantite d’ARNr 18S azote. Cette regulation permettrait ainsi, dans des situations de faibles apports azotes, de favoriser la synthese intestinale de citrulline et par consequent la neosynthese renale d’Arg. Lors d’apports azotes plus importants, cela favoriserait le passage de l’Arg absorbee dans le systeme porte et donc une stimulation adaptee de l’ureoge-nese hepatique.