Chen Fadi

菊花 Cm14-3-3v 基因的克隆及表达分析

目的本文旨在克隆菊花‘神马’Cm14-3-3v基因，并初步分析其表达特征，为其功能研究奠定基础。 方法从菊花‘优香’转录组库中获得编码拟南芥同源基因14-3-3v序列信息，根据NCBI比对确定基因的cDNA全长并进行克隆，再利用生物信息学方法对该蛋白的功能和活性位点进行预测，同时利用实时定量PCR分析了在非生物胁迫条件下该基因的表达变化。 结果Cm14-3-3v的ORF序列长774 bp，编码257个氨基酸；亚细胞定位表明Cm14-3-3v定位在细胞质和细胞核；生物信息学分析表明该蛋白有19个Ser、7个Thr和7个Tyr潜在的磷酸化位点，在N-端有5个蛋白结合区；表达模式分析显示，Cm14-3-3v基因在根、茎、叶、花中均有表达，且受脱落酸（ABA）、茉莉酸甲酯（MeJA）、盐和冷胁迫的诱导表达。 结论本文克隆得到菊花Cm14-3-3v基因，表达模式分析表明其受ABA、MeJA、盐和冷胁迫诱导表达。