Clarissa Silveira Luiz Vaz

Determinação da diversidade fenotípica e genotípica de Salmonella enterica subsp. enterica SOROVAR Enteritidis no Rio Grande do Sul

Salmonella enterica sorovar ( S .) Enteritidis e uma das principais bacterias envolvidas em surtos de infeccao alimentar em humanos decorrentes do consumo de produtos de origem animal. Nas investigacoes epidemiologicas, a subtipificacao fenotipica e genotipica permitem verificar diferencas ou similaridades entre linhagens, as quais podem indicar sua origem, auxiliando os programas de controle e prevencao do patogeno. No presente trabalho, foram analisados os padroes de resistencia a antimicrobianos, fagotipificacao, macrorestricao de DNA seguida de eletroforese em campo pulsado (PFGE) e polimorfismo de comprimento do fragmento amplificado utilizando uma unica enzima de restricao (SE-AFLP) de 107 linhagens de S . Enteritidis, sendo 53 isoladas de aves e seus produtos (carcacas, carne, visceras e ambiente) e uma de origem suina. Foram ainda analisadas 29 linhagens isoladas de alimentos e 14 isoladas de humanos envolvidos em surtos de salmonelose notificados no Rio Grande do Sul, uma amostra de referencia (ATCC 13076), alem de 9 linhagens isoladas na Europa e Africa. Na comparacao entre amostras isoladas de aves e de surtos de salmonelose, as linhagens de origem avicola foram significativamente mais resistentes a antimicrobianos do que as isoladas de humanos e, embora nao tenha sido encontrada relacao entre os genotipos de PFGE e os padroes de resistencia, a associacao de ambas as tecnicas possibilitou uma melhor caracterizacao de S . Enteritidis, podendo ser uteis como marcadores epidemiologicos. Por outro lado, SE-AFLP agrupou a maioria das linhagens de S . Enteritidis num padrao principal. Paralelamente, na comparacao de tecnicas genotipicas com base em PCR, SE-AFLP apresentou maior capacidade de discriminacao, embora inferior a verificada pela fagotipificacao e perfil de resistencia a antimicrobianos. Assim, foi recomendado que esta tecnica deve ser utilizada em associacao com outras metodologias na tipificacao de S . Enteritidis. Posteriormente, na caracterizacao do conjunto de linhagens de S . Enteritidis, foram identificados 13 diferentes padroes de resistencia a antimicrobianos, alem de 12 padroes de PFGE e 3 de SE-AFLP. As tecnicas genotipicas demonstraram que existe um genotipo predominante de S . Enteritidis no Rio Grande do Sul, o qual esta presente em aves e produtos relacionados, alem de alimentos e humanos envolvidos em surtos de salmonelose, sugerindo que estas linhagens possam derivar de uma fonte comum, tendo provavel relacao clonal. Embora havendo um genotipo predominante de S . Enteritidis, a associacao das tecnicas propostas possibilitou a melhor caracterizacao do patogeno.