Erika Glusa

Evidence for 5-HT2B and 5-HT7 receptor-mediated relaxation in pulmonary arteries of weaned pigs

This study characterizes the relaxant response to 5-hydroxytryptamine (5-HT) in prostaglandin F2α (PGF2α)-precontracted pulmonary arteries of weaned pigs. In arterial rings with intact endothelium, the relaxation to 5-HT was biphasic. The high affinity component of relaxation to 5-HT (0.1–10 nM) was abolished by mechanical removal of the endothelium or after the addition of l-NAME (200 μM), and was inhibited by the 5-HT2B/2C receptor antagonist SB 206553 (1 μM), but not the 5-HT2C receptor antagonist SB 242084 (0.1 μM). Endothelium-intact arteries were also relaxed by the selective 5-HT2B receptor agonist BW 723C86 (pD2 7.7). The relaxant response to BW 723C86 was inhibited by 1 μM SB 206553 (pKB 6.8). The low affinity component of relaxation to 5-HT (≥30 nM) remained unaffected after mechanical removal of the endothelium or the addition of l-NAME. In endothelium-denuded arterial rings, 5-HT, 5-carboxamidotryptamine (5-CT), 5-methoxytryptamine (5-MeOT), and frovatriptan produced monophasic relaxations with pD2 values of 6.5, 7.5, 5.9, and 4.7 respectively. Relaxant responses to the agonists were antagonized by the selective 5-HT7 receptor antagonist SB 269970 (pKB 8.2–8.9). The relaxant response to the potent 5-HT7 receptor agonist 5-CT was also antagonized by methiothepin (pKB 9.6), pimozide (pKB 8.2), mesulergine (pKB 7.7), methysergide (pKB 7.4), clozapine (pKB 7.6), and spiperone (pKB 7.4). The estimated pKB values argue in favor of an involvement of 5-HT7 receptors in the direct vasorelaxant action of 5-HT in the pulmonary arteries of weaned pigs. The relaxant response to 5-CT was associated with an increase in cAMP that was surmountably antagonized by SB 269970 (pKB 8.6). The present in vitro bioassay can be used to characterize new drugs with potential agonist or antagonist properties at functional 5-HT7 receptors.

Über die Freisetzung biogener Amine aus Blutplättchen durch tierische Gifte

ZusammenfassungEs wurde die Serotonin-, Histamin- und ATP-Abgabe aus Kaninchenblutplättchen bei Einwirkung von Schlangengiften und von Bienengift untersucht. Die starkste aminfreisetzende Aktivität wurde im Giftsekret der brasilianischen Klapperschlange (Crotalus terrificus) gefunden. Die durch dieses Gift ausgelöste Aminfreisetzung verläuft mit großer Geschwindigkeit. Sie ist abhängig von der Einwirkungstemperatur, dem Stoffwechsel der Blutplättchen und der Gegenwart von Calciumionen. Die elektrophoretische Auftrennung des Giftes und die Inaktivierung einzelner Giftaktivitäten durch Erhitzen oder Einwirkung von DFP zeigten, daß die serotoninfreisetzende Wirkung des Giftes nicht mit der Koagulase- oder Phospholipase-Aktivität des Giftes identisch ist.Bienengift bewirkte bereits in sehr geringer Konzentration eine Thrombozytolyse, die auch durch die Melittinfraktion allein, nicht aber durch die Phospholipase A des Giftes hervorgerufen werden kann.

Untersuchungen über den Einfluß von Papaverin auf Reaktionen der Blutplättchen

SummaryA series of reactions of human blood platelets responsible for hemostasis and thrombogenesis is inhibited by papaverine. Following reactions of blood platelets have been studied in detail: adhesiveness to glass-surfaces, aggregation by adenosine diphosphate or thrombin, release of biogenic amines by thrombin and clot-retraction and uptake of adenosine. These reactions are also inhibited in a lesser extent by some papaverine derivatives. The inhibitory action of papaverine on platelet aggregation was also demonstrable in in vivo experiments with rabbits.ZusammenfassungBei Einwirkung von Papaverin auf menschliche Blutplättchen wird eine Reihe der für die Hämostase und Thrombogenese wichtigen Funktionen der Plättchen gehemmt. Im einzelnen wurden folgende Plättchenreaktionen geprüft: die Adhäsion an Glasoberflächen, die durch ADP oder Thrombin bewirkte Aggregation, die durch Thrombin ausgelöste Freisetzung biogener Amine und Retraktion sowie die Aufnahme von Adenosin. Die geprüften Plättchenreaktionen wurden in geringerem Maße auch von einigen Papaverin-Derivaten gehemmt. Die aggregationshemmende Wirkung des Papaverins ließ sich auch in vivo an Kaninchen nachweisen. Es bestanden keine Beziehungen zwischen spasmolytischer Aktivität und Beeinflussung von Thrombocytenfunktionen.

Antiserotonergic properties of terguride in blood vessels, platelets, and valvular interstitial cells.

Serotonin (5-hydroxytryptamine; 5-HT) is involved in heart valve tissue fibrosis, pulmonary arterial fibrosis, and pulmonary hypertension. We aimed at characterizing the antiserotonergic properties of the ergot alkaloid derivative terguride [1,1-diethyl-3-(6-methyl-8α-ergolinyl)urea] by using functional receptor assays and valvular interstitial cell culture. Terguride showed no vasoconstrictor effect in porcine coronary arteries (5-HT2A receptor bioassay) and no relaxant effect in porcine pulmonary arteries (5-HT2B receptor bioassay). Terguride behaved as a potent antagonist at 5-HT2A receptors (noncompetitive antagonist parameter pD′2 9.43) and 5-HT2B receptors (apparent pA2 8.87). Metabolites of terguride (N″-monodeethylterguride and 6-norterguride) lacked agonism at both sites. N″-monodeethylterguride and 6-norterguride were surmountable antagonists at 5-HT2A receptors (pA2 7.82 and 7.85, respectively) and 5-HT2B receptors (pA2 7.30 and 7.11, respectively). Kinetic studies on the effects of terguride in pulmonary arteries showed that the rate to reach drug-receptor equilibrium for terguride was fast. Washout experiments showed that terguride easily disappeared from the receptor biophase. Pretreatment with terguride inhibited 5-HT-induced amplification of ADP-stimulated human platelet aggregation (IC50 16 nM). In porcine valvular interstitial cells, 5-HT-induced activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) 1/2, an initiator of cellular proliferation and activity, was blocked by terguride as shown by Western blotting. In these cells, the stimulatory effect of 5-HT on [3H]proline incorporation (index of extracellular matrix collagen) was blocked by terguride. Because of the inhibition of both 5-HT2A and 5-HT2B receptors, platelet aggregation, and cellular proliferation and activity (ERK1/2 phosphorylation and collagen production) terguride may have therapeutic potential in the treatment of fibrotic disorders.

Die Vernderungen des Serotonin- und Histamingehaltes der Blutplttchen unter dem Einflu von Lokalanaesthetica

Blutplattchen geben unter der Einwirkung von Lokalanaesthetica in Abhangigkeit von der Dosis und der Wirkungsstarke der angewandten Lokalanaesthetica den grosten Teil ihres Serotonins ab. Bei Einwirkung hoherer Lokalanaesthetica-Konzentrationen kommt es auch zu einem Austritt von Histamin und ATP, der mit einer morphologischen Veranderung der Zelle einhergeht und Ausdruck einer Plattchenschadigung ist. Die von niedrigen Lokalanaesthetica-Konzentrationen bewirkte Serotoninabgabe ist vermutlich die Folge einer kompetitiven Hemmung des stoffwechselabhangigen Aufnahmemechanismus fur Serotonin. Fur Histamin konnte kein aktiver Transportvorgang nachgewiesen werden. Es diffundiert passiv in die Thrombocytenzelle hinein. Die Histaminaufnahme der Blutplattchen ist daher auch nicht hemmbar durch Lokalanaesthetica.