Gotfried Walther

Aktivitätsbestimmungen der sauren phosphatase in verschiedenen biologischen medien unter verwendung von o-Carboxyphenylphosphat

SummaryOn investigation of human seminal traces the evidence of high activity of acid phosphatase implies important information. Some substrates are known for measurement of this enzyme activity. With the aid of o-Carboxyphenylphosphate in 0.1 M sodium acetate/acetic acid buffer the conditions for quantitative measurement of human seminal acid phosphatase were found to be optimal at pH 4.6–5.8 and pS 2.3–2.7 (Walther). As the acid phosphatase is present in many biological fluids, it is necessary to know the rate of hydrolysis by these enzymes. Therefore in this paper the activity of acid phosphatase in the following biological fluids was measured: Human and bull ejaculates, vaginal smears, urines, anal swabs, secretes of snails, plant juices (cauli flower and painters flower) and some bacteria.In the human ejaculates were notized activities about 104–106 U, in bovine ejaculate about 102–104 and in fluid of cauli flower 103–104 U. In the other investigated fluids substrate splitting was very low or negative (see table). It is impossible to detect a very small trace of acid phosphatase because the substrate is splitting spontaneously. But this is not important because anyway activities from 104–106 U have diagnostical information.ZusammenfassungUnter den für die Bestimmung der menschlichen sauren Spermaphosphatase festgestellten Bedingungen wurden die Spaltungsraten verschiedener Substanzen menschlicher, tierischer und pflanzlicher Herkunft bestimmt. Im Humansperma wurden etwa 104–106 U, im bovinen etwa 102–104 und im Blumenkohlpreßsaft 103–104 U festgestellt. In den übrigen Substanzen ist zwar eine geringe Hydrolyserate, die auch durch saure Phosphataseaktivität bedingt sein kann, nicht auszuschließen, jedoch ist dieses Ferment nicht mit Sicherheit nachweisbar. Die Untersuchungsergebnisse zeigen, daß die saure Phosphatase des menschlichen Ejaculates o-Carboxyphenylphosphat sehr schnell hydrolysiert, aber auch im Blumenkohlpreßsaft ist eine relative hohe Aktivität vorhanden.

Komplikationen nach zelltherapie

SummarySo far, the law in the Federal Republic of Germany still allows the injection of fresh-cell preparations from animals as a roborant to increase the vitality of the organism and to strengthen the bodys immune defense system. The use of “sicca-cell” preparations was provisionally forbidden in 1987 by the Federal Health Organization (Bundesgesundheitsamt; BGA). Prohibition of fresh-cell injections would have exceeded the authority of this office, although the same serious reservations also applied in the case of this treatment method. Several publications that have appeared since 1955 have reported serious complications of this therapy, some life-threatening and some even lethal. Two further cases are now added: (1) A woman aged 69 had been receiving treatment with cell injections for 9 years. Immediately after an injection of sicca cells she collapsed and was hospitalized; 7 days thereafter she developed an ascending paralysis with increasing inability to swallow or breathe. She died 25 days after the injection as a consequence of central and peripheral respiratory failure. Autopsy revealed the alterations typical for acute Landry-Guillain-Barré-Strohl syndrome. (2) A 76-year-old healthy woman had been receiving treatment with fresh-cell preparations for several years. After an injection of cell suspensions a painful local swelling was observed. The symptoms were interpreted as the consequence of an iatrogenic local hematoma, and repeated punctures were performed to obtain blood. The patient was transferred to a surgical department for further therapy. Two days after the injection she suddenly died with signs of acute cardiovascular failure. Autopsy revealed the signs of a fulminating clostridial infection and also the characteristic signs of Landry-Guillain-Barre syndrome with involvement of the autonomic nervous system. In both cases the development of an inflammatory process in the peripheral nervous system could be interpreted as an immune-mediated allergic disease, related to the repeated injection of heterologous antigenic material containing nervous tissues. This hypothesis would also explain the two other cases already published and would be consistent with the observed perivenous leukoencephalopathy of the central nervous system. The human disease pictures correspond to the well-established animal models of EAEM (experimental allergic encephalomyelitis) and EAN (experimental allergic neuritis). The pathogenesis is discussed; the major role of the central and peripheral nervous system is stressed, with especial reference to the risk of acute autonomic failure. The need for specific autopsy techniques for the investigation of the entire nervous system, including spinal cord, roots, spinal ganglia and peripheral nerves with sympathetic chains, is raised. A third case of acute lethal Guillain-Barre syndrome is discussed: A 26-year-old woman who had previously been treated with so-called cytoplasmic preparations died within 2 days in an irreversible toxic-allergic shock syndrome of unknown and unsolved pathogenesis and etiology.ZusammenfassungNach wie vor dürfen tierische Frischzellpräparationen zur sog. Zellulartherapie verabreicht werden unter der Vorstellung einer allgemeinen Vitalisierung und Roborierung des Organismus, insbesondere des Immunsystems. Die Verwendung von Trockenzelltherapeutica hat das Bundesgesundheitsamt bereits 1987 vorläufig verboten, nicht ohne darauf hinzuweisen, daß auch gegen die sog. Frischzelltherapie schwerwiegende Bedenken bestünden, daß ein generelles Verbot auch dieser Behandlungsweise jedoch nicht in seiner Kompetenz läge. Wiederholt waren z. T. lebensbedrohliche und auch tödliche Komplikationen im Verlauf dieser Therapie beobachtet und beschrieben worden. Den bereits publizierten Beobachtungen werden weitere hinzugefiigt: 1. Eine 69jährige Fran war etwa 9 Jahre lang mit Zellpräparationen behandelt worden. Jetzt trat nach einer erneuten Sicca-Zellinjektion ein Kollaps auf und etwa 7 Tage später eine rasch aufsteigende Landrysche Paralyse mit Schluckstörungen und Atemlähmung. Sie verstarb 31/2 Wochen nach dieser letzten Injektion infolge respiratorischer Insuffizienz. Die Obduktion ergab u. a. die typischen Veränderungen eines akuten Landry-Guillain-Barré-Syndroms. 2. Eine 76jährige Patientin war bereits seit einigen Jahren mit Frischzellpräparationen behandelt worden. Jetzt trat nach einer erneuten Injektion eine lokale Schwellung am Injektionsort auf, welche zunächst als iatrogene Blutung gedeutet wurde. Zur operativen Versorgung dieser Komplikation in ein anderes Krankenhaus verlegt, verstarb die Patientin 2 Tage nach der Therapie unter den Zeichen eines perakuten Schocks. Die Obduktion ergab eine Clostridieninfektion; weiterhin fanden sich Veränderungen am peripheren Nervensystem im Sinne eines akuten Landry-Guillain-Barré-Syndroms mit Beteiligung auch des vegetativen Nervensystems. In beiden Fällen könnte die Erkrankung des Nervensystems als allergisch-hyperergische Reaktion nach Sensibilisierung durch Injektion frischer bzw. getrockneter tierischer Zellsuspensionen aufgefaßt werden. Auch die bereits publizierte perivenöse Leukoencephalopathie nach Frischzellentherapie ist vermutlich auf immunologische Prozesse zurückzuführen. Die möglichen pathogenetischen Mechanismen werden erörtert und gemeinsam mit anderen Beobachtungen aus Mainz und Berlin diskutiert. Auf die entscheidende Rolle des Nervensystems bei diesen Komplikationen, insbesondere des peripheren Nervensystems, und vor allem auf die Bedeutung vegetativer Regulationsstörungen für die Propose wird hingewiesen. Es sei betont, daß die Aufklärung derartiger Erkrankungen mit tödlichem Ausgang eine besondere Sektionstechnik erfordert mit Entnahme der gesamten Wirbelsdule und mit Untersuchung auch der peripheren Nerven, einschließlich des vegetativen Systems.

Discelektrophoretische Differenzierung saurer Phosphatasen verschiedener Herkunft

SummaryHuman seminal fluid contents a very high activity of acid phosphatase. Therefore this enzyme attaches medico-legal importance to the evidence of seminal traces. But this enzyme is present in many other biological fluids—even in a very high activity almost like in human seminal fluid. Comparisms of the qualitative reaction on acid phosphatase gave positive results as well with older human seminal spots as with those of fresh fluids of plant or animal origin.Discelectrophoretical examinations in polyacrylamide gels evidence the heterogeneity of human acid phosphatase and that of plant or animal origin. The best results of separation were obtained by means of the following conditions: Spacer gel2.5% AcrylamidSeparating gel7.5% AcrylamidVoltage180 V, 2.5 mA each tubuliTime of separating110 minCooling the anode puffer with tap water. Under these conditions in the human seminal fluid could be detected 2 zones of enzyme activity. After a storing periode of 4 weeks in seminal traces on textile spots appears a 3rd zone between the two bands.Other investigated biological fluids (plants and snails) showed 3–8 zones of enzyme activity.This bands became unsharp and mixed up after one week of storage.These investigations implay conditional informations in medico-legal experience of seminal traces.Zusammenfassung1. Im menschlichen Ejaculat konnten discelektrophoretisch unabhängig vom Spurenalter konstant 2 Isoenzyme der sauren Phosphatase nachgewiesen werden.2. Spuren verschiedener Pflanzenpreßsäfte (Studentenblume, Blumenkohl und Schneckenschleime — Weinbergschnecke, Schnirkelschnecke —) zeigten 3–8 Isoenzymbanden. Diese Isoenzyme waren in mehr als 7 Tage alten Spuren nicht mehr scharf zu trennen.3. Die discelektrophoretische Untersuchung der Isoenzyme der sauren Phosphatase bringt für den gerichtsmedizinischen Spermaspurennachweis weitere wertvolle Informationen.

Medikamentöse Sterilität als Täuschungsmethode bei paternitätsgutachten

SummaryDuring forensic examination of male fertility in disputed paternity cases cheating is possible. There are substances with effects on spermatogenesis, on transport of spermatozoa and on hormonic regulation. Bis-dichloroacetyl-octamethylendiamine seems the most suitable. It has no side-effects, exept for an antabuse-effect. By daily treatment with 200 mg sterility starts after 2–3 months. After stopping the treatment fertility becomes normal after 2 months.ZusammenfassungBei der gerichtlichen Aufklärung einer strittigen Vaterschaft sind Täuschungen möglich. So kann eine medikamentös ausgelöste Infertilität durch Eingriff an der Spermatogenese, am Spermientransport und an der hormonalen Steuerung herbeigeführt werden. Bis-Dichloracetyl-Octamethylendiamin ist aufgrund der spermiogenesehemmenden Wirkung besonders geeignet. Außer einem Antabus-Effekt bei gleichzeitiger Einnahme von Alkohol entstehen keine Nebenwirkungen. Bei der täglichen Einnahme von ca. 200 mg ist nach 2–3 Monaten eine Sterilität ausgebildet. Nach Absetzen der Substanz ist die Spermatogenese und damit die Fertilität des Mannes nach etwa 2 Monaten wieder völlig normal.

Kausalitätsprobleme beim nachweis der tötung des neugeborenen

SummaryIn the years of 1948 to 1968 there were carried out 89 forensic post mortem investigations of still borns and life borns.In two cases there could be proved by post mortem investigation an intrauterine death of fetus with beginning mazeration. There were no indications of outside influences that might have caused the death of the newborns.In another 20 cases violent death could be proved only by post mortem investigation.There are the following manners of death: Partial to complete severance from the neck with sharp instruments (scissors, knife, spade) 3 cases. Strangulation 5 cases. Suffocation by violent occlusion of mouth and nose (soft coverings, manual, by gag) 7 cases. Scald (immediatetly after birth the newborn was held under hot water) 1 case.Consequently only 24,7% of the cases could be cleared through post mortem investigation. Of the remaining 67 post mortem investigations that is 75,3%, 11 cases could be proved to be violent cases of death with the help of histological examinations and consulting of the investigation results.There are the following manners of death: Death by drowning (birth into the lavatory, pail or other containers) 5 cases. Death by suffocation or drowning (newborn was left lying between the legs of mother) 3 cases. Death by suffocation 2 cases. Death by suffocation (child was wrapped up in a towel and put into a wardrobe) 1 case.In some further 7 cases the outer circumstances gave hint to an hostile action towards the newborn (i.e. concealment of pregnancy and birth, birth into the lavatory, into a pail), however death could be also explained as a consequence of birth-complications as there are premature birth, lesion of the tentorium cerebelli, aspiration of amniotic fluid.In 49 cases (55%) there could not be proved either killing nor death by birth injuries. This high rate deals mainly with unknown corpses (35 cases), which were found in water, in ruins, on cemeteries, in houses and left luggage offices. The corpses were in bad condition, sometimes only the torso or the extremities were left.From 89 post mortem investigations there were 39 (43,8%) premature births. The reason for the relatively high premature birth rate is under discussion.According to our material the frequency of homicide as well as the way of committing this delict has not changed during the last 20 years.Zusammenfassung]1. In den Jahren 1948–1968 wurden 89 Obduktionen von Tot- und Lebendgeburten im Hinblick auf den Nachweis eines fremden Verschuldens durchgeführt. In 22 Fällen (24,7%) konnte die Todesursache durch die Obduktion allein geklärt werden. Hiervon war in 20 Fällen (22,5%) der gewaltsame Tod des Neugeborenen zu beweisen.2. Nach Durchführung feingeweblicher Untersuchungen und Hinzuziehung der Ermittlungsakten konnte in weiteren 11 Fällen (12,4%) das Tötungsdelikt bestätigt werden. In 7 Fällen (7,8%) wies zwar die Geburtssituation auf eine Tötung des Neugeborenen hin, der Tod ließ sich jedoch durch Geburtskomplikationen erklären.3. In 49 Fällen (55,0%) konnte die gestellte Beweisfrage nicht geklärt werden. Es Bestanden sowohl Hinweise, daß gegen das Kind gerichtete Handlungen bzw. Unterlassungen stattgefunden haben, als auch pathologisch-anatomische Befunde, die als Geburtskomplikationen zu interpretieren sind. Darüber hinaus war die Aufklärung durch weiter fortgeschrittene Leichenzersetzung erschwert.4. Nach unserem Material hat sich die Häufigkeit der Tötung des Neugeborenen, sowie die Art und Weise der Begehung dieses Deliktes in den letzten 20 Jahren nicht verändert.]1. In den Jahren 1948–1968 wurden 89 Obduktionen von Tot- und Lebendgeburten im Hinblick auf den Nachweis eines fremden Verschuldens durchgefuhrt. In 22 Fallen (24,7%) konnte die Todesursache durch die Obduktion allein geklart werden. Hiervon war in 20 Fallen (22,5%) der gewaltsame Tod des Neugeborenen zu beweisen.

Über die Verwendung von o-Carboxyphenylphosphat zum Nachweis saurer Phosphatase im Sperma

ZusammenfassungFür die Bestimmung der sauren Spermaphosphatase wird an Hand eines Vergleiches mit Phenylphosphat (Methode nachErdmann-Müller) als Substrat o-Carboxyphenylphosphat empfohlen. Die optimalen Reaktionsbedingungen werden festgestellt. Das Inkubationsmedium ist wie folgt zusammengesetzt: o-Carboxyphenylphosphat 2,5·10−3 M, Essigsäure/Natriumacetatpuffer pH 4,8 0,1 M, Probelösung (bei 2,5 ml-Ansatz). 0,1 ml.Die Reaktionsgeschwindigkeit und spektrale Empfindlichkeit ist bei Verwendung dieses Substrates wesentlich höher als bei Phenylphosphat. Bei hoher Papiergeschwindigkeit des Schreibers genügen im allgemeinen Spermaverdünnungen von 1∶10 bzw. 1∶100, um meßbare Aktivitäten zu erhalten.SummaryEstimation of seminal acid phosphatase is carried out with sodium phenylphosphate and o-carboxyphenylphosphate. Comparism indicates more increase of extinction and higher rate of splitting with the aid of o-carboxyphenylphosphate. Dilution of seminal fluid 1∶10 ore 1∶100 is sufficient for estimation. The incubating medium is mixed as following: o-carboxyphenylphosphate 2,5·10−3 M, acetic acid/sodium acetate buffer pH 4.8 0,1 M, seminal fluid (at 2.5 ml test sloution) 0,1 ml.

Über die histochemische Verteilung der Malatdehydrogenase in der Kaninchenretina

Lowry found by quantitative biochemistry in the outer portion of the inner segment a very strong activity of malate dehydrogenase (MDH). On the contrary Princeet al. found by histochemical method relatively small activity in that layer but the highest activity in the ganglion cell layer. The present histochemical study by means of tetrazolium salts (MTT) confirms the strong activity in the outer portion of the inner segment; but in the ganglion cell layer the activity is also relatively strong. Histochemische Untersuchungen über das Vorkommen der Malatdehydrogenase in der Kaninchenretina konnten die von Lowry in den Außengliedern angegebene relativ hohe Aktivität bestätigen. In der Ganglienzellschicht fand sich eine nicht ganz so hohe Aktivität. Dies entspricht eher den histochemischen Befunden von Prince.