J. Kopitz

Mechanismen der Hemmung lysosomaler Funktionen im retinalen Pigmentepithel durch den Lipofuszin-Retinoidbestandteil A2-E

ZusammenfassungHintergrund. Die exzessive Akkumulation von Lipofuszin in retinalen Pigmentepithelzellen ist sowohl bei der altersabhängigen Makuladegeneration (AMD) als auch bei verschiedenen erblichen Makuladystrophien von pathogenetischer Bedeutung. Wir haben gezeigt, dass der Lipofuszinfluorophor A2-E (N-Retinyliden-N-Retinyl-Ethanolamin) speziell den lysosomalen Stoffwechsel humaner retinaler RPE-Zellen hemmt und phototoxische Eigenschaften besitzt. Hier wurden neben der vorher gezeigten intralysosomalen pH-Wert-Erhöhung weitere Mechanismen der Hemmung lysosomaler Enzyme untersucht. Methoden. RPE-Zellen wurden durch Potter-Elvejem-Homogenisation aufgeschlossen und in den resultierenden RPE-Zellhomogenaten mithilfe spezieller Enzymtests die Aktivitäten 24 lysosomaler Enzyme vor und nach Inkubation mit A2-E gemessen. Ergebnisse. In humanen RPE-Zellen wurde erstmals ein breites Spektrum lysosomaler Hydrolasen, das Proteasen, Lipasen, Glykosidasen, Nukleasen, Sulfatasen und Phosphatasen umfasst, gemessen. Lysosomale Enzymaktivitäten können hierbei in RPE-Zellen exakt und reproduzierbar bestimmt werden. Selbst hohe Konzentrationen von A2-E (10 μM) zeigten keine hemmende Wirkung auf lysosomale Hydrolasen im RPE. Schlussfolgerung. Mit den hier verwendeten Methoden lassen sich reproduzierbar lysosomale Enzymaktivitäten in humanen RPE-Zellen bestimmen. Die A2-E bedingte Hemmung des lysosomalen Stoffwechsels wird offensichtlich nicht durch eine direkte Enzymhemmung vermittelt. Ursächlich scheint ein intralysosomaler pH-Anstieg mit konsekutivem Verlust der lysosomalen Enzymaktivität zu sein. Für diese pH-Verschiebung könnte eine inhibitorische Wirkung auf die membranständige Protonenpumpe verantwortlich sein. Das genaue Verständnis der Hemmungsmechanismen von A2-E auf die Funktion von RPE-Zellen kann neue Wege der gezielten pharmakologischen Intervention bei Erkrankungen mit exzessiver Lipofuszinakkumulation aufzeigen.AbstractBackground. Excessive accumulation of lipofuscin in the retinal pigment epithelium with age and in various hereditary and degenerative retinal diseases, is of pathogenetic significance. We have shown that the major lipofuscin fluorophor A2-E (N-retinylidene-N-retinylethanolamine) affects the lysosomal degradation of human RPE cells and damages the cellular metabolism by phototoxic properties. Herein we sought to determine mechanisms for the inhibitory effect on lysosomal function apart from pH elevation. Methods. Potter-Elvejem homogenates of RPE cells were used to measure the activity of 24 lysosomal enzymes before and after incubation with A2-E. Results. This is the first time that RPE cells have been screened for a large spectrum of lysosomal hydrolases including proteases, lipidases, glycosidases, nucleases, sulfatases and phosphatases. The activities of these hydrolases were readily detectable in cultured RPE cells. Incubation of RPE cell homogenates even with high A2-E concentrations (up to 10 μM) did not affect the activity of isolated lysosomal enzymes. Conclusions. The results suggest that a direct inhibition of lysosomal enzyme activity would not explain the inhibitory effect on lysosomal degradation. A2-E increases the acidic intralysosomal pH thereby probably hindering pH-dependent lysosomal enzymatic activities. The understanding of the inhibitory effects of A2-E on RPE cell metabolism may contribute to new approaches for treatment of retinal diseases with excessive lipofuscin accumulation such as ARMD or M. Stargardt.

Detergenzienwirkung des Lipofuszin-Retinoidbestandteils A2-E in retinalen Pigmentepithelzellen

ZusammenfassungHintergrund. Lipofuszin akkumuliert in postmitotischen retinalen Pigmentepithelzellen (RPE) mit dem Alter und in Assoziation mit verschiedenen Makula-/Netzhautdegenerationen. Wir konnten zeigen, dass der Lipofuszinretinoid-Bestandteil A2-E (N-Retinyliden-N-Retinyl-Ethanolamin) lysosomale Funktionen hemmt. Um weitere Wirkungsmechanismen für toxische Effekte von A2-E zu evaluieren, untersuchten wir nach Etablierung einer Methode zur Isolation intakter Lysosomen aus RPE-Zellkulturen Detergenzieneffekte auf lysosomale und andere zelluläre Membranen mittels Latenzmessungen. Methoden. Zur Isolation intakter Lysosomen wurde der postnukleäre Überstand humaner RPE-Zellen mittels sequenzieller Dichtegradientenzentrifugation fraktioniert. Die Ruptur der lysosomalen Membran wurde durch Latenzmessungen des lysosomalen Leitenzyms β-Hexosaminidase an mit A2-E inkubierten isolierten Lysosomen erfasst. Latenzen der Markerenzyme Succinatdehydrogenase and UDP-Galactosyltransferase zeigen Effekte des A2-E auf Membranen isolierter Mitochondrien und Mikrosomen. Nach Zugabe von A2-E in das Kulturmedium konnten durch Messung der Laktatdehydrogenase Schäden der Plasmamembran erfasst werden. Ergebnisse. Bis auf eine geringe Restaktivität mitochondrialer Leitenzyme konnte eine 100fache Anreicherung der lysosomalen Fraktion erzielt werden. Eine Kontamination mit anderen Zellfraktionen wurde nicht beobachtet. In geeigneten isotonischen Puffern besitzen die Lysosomen eine ausreichende Stabilität, um mögliche Detergenzieneffekte des A2-E auf lysosomale Membranen nachzuweisen. Bei Konzentrationen über 2 μM A2-E kam es zur Leckage des lysosomalen Leitenzyms. Leckage des mitochondrialen Leitenzyms erfolgte bereits ab 1 μM A2-E, während ER/Golgi-Membranen und Plasmamembranen relativ resistent gegenüber Detergenzieneffekten von A2-E waren. Schlussfolgerung. Die beschriebene Methode zur Isolation intakter Lysosomen aus RPE-Zellen ist auch für zukünftige Untersuchungen für lysosomale Effekte verschiedener Biomoleküle nutzbar. A2-E induziert bereits in niedriger Konzentration eine Desintegration der lysosomalen Membran. Detergenzieneffekte an der mitochondrialen Membran stellen offensichtlich einen weiteren Pathomechanismus dar, wodurch Reaktionskaskaden, die letztlich zum Zelltod führen können, induziert werden. Unsere Beobachtungen sprechen für einen Detergenzieneffekt von A2-E an verschiedenen zellulären Membranen, der bei allen retinalen Erkrankungen mit exzessiver Lipofuszinakkumulation, wie der AMD, von Bedeutung sein könnte. Ein besseres Verständnis dieser molekularen Mechanismen eröffnet neue therapeutische Perspektiven.AbstractPurpose. Several lines of evidence suggest that excessive accumulation of lipofuscin in postmitotic retinal pigment epithelial (RPE) cells with age and in various hereditary retinal diseases, plays a pathogenetic role. The lipofuscin retinoid component A2-E (N-retinylidene-N-retinylethanolamine) inhibits lysosomal degradation. Here we sought to evaluate additional toxic mechanisms of A2-E, whereby possible detergent-like effects on various membranes in human RPE cells were investigated by latency measurements. Methods. A postnuclear supernatant prepared from cultured human RPE cells was used to isolate intact lysosomes by fractionation of cellular organelles in two sequential gradients. Destabilization of the lysosomal membrane was tested by incubating the purified lysosomal fraction in the presence of A2-E and subsequent measurement of the latency of the lysosomal luminal marker β-hexosaminidase. In order to compare the effect of A2-E on other cellular membranes, latencies of the specific markers succinate dehydrogenase and UDP-galactosyltransferase were assessed using partially purified mitochondria and microsomes. Intactness of the plasma membrane was tested by including A2-E in the culture medium before leakage of lactate dehydrogenase into the medium was determined. Results. A more than 100-fold purification of the lysosomal fraction was achieved. Except for a minor activity of the mitochondrial marker, no contamination with other cell fractions was observed. Intactness of the purified lysosomes was well preserved during incubation in isotonic media and provided the basis for investigations on a possible detergent-like action of A2-E on lysosomal integrity. At concentrations above 2 μM A2-E, progressive leakage of the lysosomal marker was observed. In comparison leakage of the mitochondrial marker was induced at significantly lower concentrations (1 μM), whereas ER/Golgi membranes and the plasma membrane were relatively insensitive to a detergent effect of the retinoid. Conclusions. The described practical and fast methodology to obtain highly purified and intact lysosomes from RPE cells, provides a very suitable tool for investigations on compounds affecting the lysosomal structure. The results suggest that A2-E causes disintegration of the lysosomal membrane at relatively low concentrations which may implicate an involvement of such a mechanism in triggering lipofuscin-induced dysfunction of aged RPE in vivo. Secondary to disintegration of the lysosomal membrane, damage to mitochondria might be an additional pathogenic mechanism. Our data provide evidence for surfactant-like properties of A2-E on biomembranes which might be operative in retinal diseases associated with excessive lipofuscin accumulation including age-related macular degeneration.

Ein Retinoidbestandteil von Lipofuszin, A2-E, ist ein Photosensitizer in humanen RPE-Zellen

ZusammenfassungHintergrund. A2-E, ein fluoreszierender Bestandteil von Lipofuszin, beeinträchtigt den lysosomalen Stoffwechsel humaner retinaler Pigmentepithel- (RPE-)Zellen. Als weiterer möglicher Schädigungsmechanismus wurde hier das phototoxische Potenzial des Retinoidanteils untersucht. Methode. Die A2-E-Akkumulation wurde durch Fluoreszenzmikroskopie und FACS-Analyse erfasst. Mittels Acridine-Orange-Färbungen wurden die lysosomale Stabilität und der intralysosomale pH untersucht. A2-E beladene RPE-Zellen sowie Kontrollen ohne A2-E wurden kurzwelligem sichtbaren Licht (400–500 nm) ausgesetzt, und die Überlebensrate der RPE-Zellen wurde gemessen. Ergebnisse. Fluoreszenzmikroskopie und FACS-Analyse zeigten eine intralysosomale Akkumulation von A2-E. Acridine-Orange-Färbungen bestätigten die lysosomale Speicherung und pH-Steigerung nach A2-E-Applikation. A2-E beladene und belichtete RPE-Zellen zeigten eine signifikante Reduktion der Überlebensrate im Vergleich zu ausschließlich belichteten oder A2-E beladenen Zellkulturen. A2-E-Exposition führt zu einem Verlust lysosomaler Stabilität. Schlussfolgerung. A2-E schädigt RPE-Zellen offensichtlich durch eine Vielzahl von Mechanismen einschließlich einer Hemmung des lysosomalen Abbaus, Verlust der Integrität von Zellmembranen und Phototoxizität. Diese Mechanismen könnten bei der Pathogenese retinaler Erkrankungen eine Rolle spielen, die mit exzessiver Lipofuszinakkumulation im RPE einhergehen einschließlich altersabhängiger Makuladegeneration, Morbus Best und Morbus Stargardt.AbstractBackground. A fluorescent compound of lipofuscin, A2-E, has been shown to impair lysosomal function and to increase the intralysosomal pH of human retinal pigment epithelial (RPE) cells. This study addressed the phototoxic potential of A2-E on RPE cells. Methods. A2-E accumulation was confirmed by fluorescence microscopy and fluorescence-activated cell sorter analysis. Acridine orange staining allowed assessment of lysosomal integrity and intralysosomal pH. Phototoxic properties of A2-E were determined by exposing A2-E-free and A2-E-fed RPE cell cultures to short-wavelength visible light and assessing cell viability and lysosomal integrity. Results. Intralysosomal accumulation of A2-E was confirmed. Acridine orange staining showed that the A2-E was located in the lysosomal compartment and induced an elevation of inralysosomal pH. Exposure of A2-E fed cells to light resulted in a significant loss of cell viability by 72 h which was not observed in either RPE cells maintained in the dark or A2-E-free cultures exposed to light. Toxicity was associated with a loss of lysosomal integrity. Conclusion. A2-E is detrimental to RPE cell function by a variety of mechanisms including inhibition of lysosomal degrading capacity, loss of membrane integrity, and phototoxity. Such mechanisms could contribute to retinal aging and to retinal diseases associated with excessive lipofuscin accumulation.

Juvenile neuronale Zeroidlipofuszinose

Neuronal ceroid lipofuscinoses (NCL) are a heterogeneous group of neurodegenerative diseases with mostly autosomal recessive inheritance whose common feature is the intralysosomal accumulation of ceroid lipofuscin. With varying manifestation ages the diseases result in cognitive and motor deterioration, epilepsy, diffuse retinal degeneration, and eventually death. Juvenile ceroid lipofuscinosis (JNCL, CLN3, Batten disease) has the distinctive feature that the ophthalmologic symptoms precede the neurologic symptoms by several years, and thus the ophthalmologist plays a central role in early diagnosis. Important clinical signs of JNCL include bulls eye maculopathy, severely reduced Ganzfeld ERG already at initial presentation, and unusually rapid progression of the functional decline. If JNCL is clinically suspected the diagnosis can be made by means of a standard blood smear and confirmed by genetic detection of the mutation. Although causal therapeutic options are currently only in the developmental stage, early diagnosis by the ophthalmologist is of utmost importance to allow for medical and educational support of the affected child and for adequate counseling of the parents.ZusammenfassungDie neuronalen Zeroidlipofuszinosen („neuronal ceroid lipofuscinoses“, NCL) sind eine heterogene Gruppe meist autosomal-rezessiv vererbter, neurodegenerativer Erkrankungen, deren gemeinsames Merkmal die intralysosomale Akkumulation von Zeroidlipofuszin ist. Mit unterschiedlichem Manifestationsalter kommt es zu kognitivem und motorischem Abbau, Epilepsie, diffuser Netzhautdegeneration und schließlich zum Tod. Die juvenile NCL (JNCL, CLN3, Spielmeyer-Vogt-Krankheit), die in der Regel im frühen Schulalter manifest wird, hat die Besonderheit, dass die ophthalmologischen Symptome den neurologischen um einige Jahre vorausgehen, so dass hier dem Augenarzt die Aufgabe der Erstdiagnose zukommt. Wichtige klinische Zeichen für eine JNCL sind die Schießscheibenmakulopathie, das bereits bei Erstvorstellung stark reduzierte Ganzfeld-ERG und die ungewöhnlich rasche Progredienz der Sehverschlechterung. Bei entsprechendem Verdacht kann die Diagnose anhand eines Blutausstrichs gestellt und mittels molekulargenetischem Nachweis der Mutation gesichert werden. Auch wenn sich kausale Therapiemöglichkeiten momentan erst im Entwicklungsstadium befinden, ist eine frühzeitige Diagnosestellung durch den Augenarzt für die medizinische und pädagogische Betreuung des betroffenen Kindes und die angemessene Beratung der Eltern von größter Bedeutung.AbstractNeuronal ceroid lipofuscinoses (NCL) are a heterogeneous group of neurodegenerative diseases with mostly autosomal recessive inheritance whose common feature is the intralysosomal accumulation of ceroid lipofuscin. With varying manifestation ages the diseases result in cognitive and motor deterioration, epilepsy, diffuse retinal degeneration, and eventually death. Juvenile ceroid lipofuscinosis (JNCL, CLN3, Batten disease) has the distinctive feature that the ophthalmologic symptoms precede the neurologic symptoms by several years, and thus the ophthalmologist plays a central role in early diagnosis. Important clinical signs of JNCL include bull’s eye maculopathy, severely reduced Ganzfeld ERG already at initial presentation, and unusually rapid progression of the functional decline. If JNCL is clinically suspected the diagnosis can be made by means of a standard blood smear and confirmed by genetic detection of the mutation. Although causal therapeutic options are currently only in the developmental stage, early diagnosis by the ophthalmologist is of utmost importance to allow for medical and educational support of the affected child and for adequate counseling of the parents.

Juvenile neuronal ceroid lipofuscinosis. Ophthalmologic findings and differential diagnosis

Neuronal ceroid lipofuscinoses (NCL) are a heterogeneous group of neurodegenerative diseases with mostly autosomal recessive inheritance whose common feature is the intralysosomal accumulation of ceroid lipofuscin. With varying manifestation ages the diseases result in cognitive and motor deterioration, epilepsy, diffuse retinal degeneration, and eventually death. Juvenile ceroid lipofuscinosis (JNCL, CLN3, Batten disease) has the distinctive feature that the ophthalmologic symptoms precede the neurologic symptoms by several years, and thus the ophthalmologist plays a central role in early diagnosis. Important clinical signs of JNCL include bulls eye maculopathy, severely reduced Ganzfeld ERG already at initial presentation, and unusually rapid progression of the functional decline. If JNCL is clinically suspected the diagnosis can be made by means of a standard blood smear and confirmed by genetic detection of the mutation. Although causal therapeutic options are currently only in the developmental stage, early diagnosis by the ophthalmologist is of utmost importance to allow for medical and educational support of the affected child and for adequate counseling of the parents.ZusammenfassungDie neuronalen Zeroidlipofuszinosen („neuronal ceroid lipofuscinoses“, NCL) sind eine heterogene Gruppe meist autosomal-rezessiv vererbter, neurodegenerativer Erkrankungen, deren gemeinsames Merkmal die intralysosomale Akkumulation von Zeroidlipofuszin ist. Mit unterschiedlichem Manifestationsalter kommt es zu kognitivem und motorischem Abbau, Epilepsie, diffuser Netzhautdegeneration und schließlich zum Tod. Die juvenile NCL (JNCL, CLN3, Spielmeyer-Vogt-Krankheit), die in der Regel im frühen Schulalter manifest wird, hat die Besonderheit, dass die ophthalmologischen Symptome den neurologischen um einige Jahre vorausgehen, so dass hier dem Augenarzt die Aufgabe der Erstdiagnose zukommt. Wichtige klinische Zeichen für eine JNCL sind die Schießscheibenmakulopathie, das bereits bei Erstvorstellung stark reduzierte Ganzfeld-ERG und die ungewöhnlich rasche Progredienz der Sehverschlechterung. Bei entsprechendem Verdacht kann die Diagnose anhand eines Blutausstrichs gestellt und mittels molekulargenetischem Nachweis der Mutation gesichert werden. Auch wenn sich kausale Therapiemöglichkeiten momentan erst im Entwicklungsstadium befinden, ist eine frühzeitige Diagnosestellung durch den Augenarzt für die medizinische und pädagogische Betreuung des betroffenen Kindes und die angemessene Beratung der Eltern von größter Bedeutung.AbstractNeuronal ceroid lipofuscinoses (NCL) are a heterogeneous group of neurodegenerative diseases with mostly autosomal recessive inheritance whose common feature is the intralysosomal accumulation of ceroid lipofuscin. With varying manifestation ages the diseases result in cognitive and motor deterioration, epilepsy, diffuse retinal degeneration, and eventually death. Juvenile ceroid lipofuscinosis (JNCL, CLN3, Batten disease) has the distinctive feature that the ophthalmologic symptoms precede the neurologic symptoms by several years, and thus the ophthalmologist plays a central role in early diagnosis. Important clinical signs of JNCL include bull’s eye maculopathy, severely reduced Ganzfeld ERG already at initial presentation, and unusually rapid progression of the functional decline. If JNCL is clinically suspected the diagnosis can be made by means of a standard blood smear and confirmed by genetic detection of the mutation. Although causal therapeutic options are currently only in the developmental stage, early diagnosis by the ophthalmologist is of utmost importance to allow for medical and educational support of the affected child and for adequate counseling of the parents.

Role of energy metabolism in retinal pigment epithelium

The universal energy source adenosine triphosphate (ATP)is reduced by approximately 30 % in the retinal pigment epithelium (RPE) of elderly persons. Increased oxidative stress and decreased antioxidative capacity, such as glutathione in aging eyes cause impairment of energy-dependent RPE processes and lead to loss of visual function. We developed a cell culture model of aging RPE using atractyloside to inhibit mitochondrial ATP synthesis and tert-butyl hydroperoxide as oxidant. The ATP levels were reduced by 30 % and oxidative damaged proteins and DNA increased whereas antioxidative glutathione decreased. Autophagy as an internal cellular repair mechanism and phagocytosis of photoreceptors were impaired. Antioxidative and mitochondria-activating Ginkgo biloba extract EGb 761 increased the intracellular ATP level and antioxidative glutathione. This cell culture model seems to be suitable to investigate in vitro the effect of protective substances and their compounds on aging processes in RPE.

Rolle des Energiestoffwechsels im retinalen Pigmentepithel@@@Role of energy metabolism in retinal pigment epithelium

The universal energy source adenosine triphosphate (ATP)is reduced by approximately 30 % in the retinal pigment epithelium (RPE) of elderly persons. Increased oxidative stress and decreased antioxidative capacity, such as glutathione in aging eyes cause impairment of energy-dependent RPE processes and lead to loss of visual function. We developed a cell culture model of aging RPE using atractyloside to inhibit mitochondrial ATP synthesis and tert-butyl hydroperoxide as oxidant. The ATP levels were reduced by 30 % and oxidative damaged proteins and DNA increased whereas antioxidative glutathione decreased. Autophagy as an internal cellular repair mechanism and phagocytosis of photoreceptors were impaired. Antioxidative and mitochondria-activating Ginkgo biloba extract EGb 761 increased the intracellular ATP level and antioxidative glutathione. This cell culture model seems to be suitable to investigate in vitro the effect of protective substances and their compounds on aging processes in RPE.

Rolle des Energiestoffwechsels im retinalen Pigmentepithel

The universal energy source adenosine triphosphate (ATP)is reduced by approximately 30 % in the retinal pigment epithelium (RPE) of elderly persons. Increased oxidative stress and decreased antioxidative capacity, such as glutathione in aging eyes cause impairment of energy-dependent RPE processes and lead to loss of visual function. We developed a cell culture model of aging RPE using atractyloside to inhibit mitochondrial ATP synthesis and tert-butyl hydroperoxide as oxidant. The ATP levels were reduced by 30 % and oxidative damaged proteins and DNA increased whereas antioxidative glutathione decreased. Autophagy as an internal cellular repair mechanism and phagocytosis of photoreceptors were impaired. Antioxidative and mitochondria-activating Ginkgo biloba extract EGb 761 increased the intracellular ATP level and antioxidative glutathione. This cell culture model seems to be suitable to investigate in vitro the effect of protective substances and their compounds on aging processes in RPE.

Juvenile neuronale Zeroidlipofuszinose@@@Juvenile neuronal ceroid lipofuscinosis: Ophthalmologische Diagnostik und Differenzialdiagnose@@@Ophthalmologic findings and differential diagnosis

Neuronal ceroid lipofuscinoses (NCL) are a heterogeneous group of neurodegenerative diseases with mostly autosomal recessive inheritance whose common feature is the intralysosomal accumulation of ceroid lipofuscin. With varying manifestation ages the diseases result in cognitive and motor deterioration, epilepsy, diffuse retinal degeneration, and eventually death. Juvenile ceroid lipofuscinosis (JNCL, CLN3, Batten disease) has the distinctive feature that the ophthalmologic symptoms precede the neurologic symptoms by several years, and thus the ophthalmologist plays a central role in early diagnosis. Important clinical signs of JNCL include bulls eye maculopathy, severely reduced Ganzfeld ERG already at initial presentation, and unusually rapid progression of the functional decline. If JNCL is clinically suspected the diagnosis can be made by means of a standard blood smear and confirmed by genetic detection of the mutation. Although causal therapeutic options are currently only in the developmental stage, early diagnosis by the ophthalmologist is of utmost importance to allow for medical and educational support of the affected child and for adequate counseling of the parents.ZusammenfassungDie neuronalen Zeroidlipofuszinosen („neuronal ceroid lipofuscinoses“, NCL) sind eine heterogene Gruppe meist autosomal-rezessiv vererbter, neurodegenerativer Erkrankungen, deren gemeinsames Merkmal die intralysosomale Akkumulation von Zeroidlipofuszin ist. Mit unterschiedlichem Manifestationsalter kommt es zu kognitivem und motorischem Abbau, Epilepsie, diffuser Netzhautdegeneration und schließlich zum Tod. Die juvenile NCL (JNCL, CLN3, Spielmeyer-Vogt-Krankheit), die in der Regel im frühen Schulalter manifest wird, hat die Besonderheit, dass die ophthalmologischen Symptome den neurologischen um einige Jahre vorausgehen, so dass hier dem Augenarzt die Aufgabe der Erstdiagnose zukommt. Wichtige klinische Zeichen für eine JNCL sind die Schießscheibenmakulopathie, das bereits bei Erstvorstellung stark reduzierte Ganzfeld-ERG und die ungewöhnlich rasche Progredienz der Sehverschlechterung. Bei entsprechendem Verdacht kann die Diagnose anhand eines Blutausstrichs gestellt und mittels molekulargenetischem Nachweis der Mutation gesichert werden. Auch wenn sich kausale Therapiemöglichkeiten momentan erst im Entwicklungsstadium befinden, ist eine frühzeitige Diagnosestellung durch den Augenarzt für die medizinische und pädagogische Betreuung des betroffenen Kindes und die angemessene Beratung der Eltern von größter Bedeutung.AbstractNeuronal ceroid lipofuscinoses (NCL) are a heterogeneous group of neurodegenerative diseases with mostly autosomal recessive inheritance whose common feature is the intralysosomal accumulation of ceroid lipofuscin. With varying manifestation ages the diseases result in cognitive and motor deterioration, epilepsy, diffuse retinal degeneration, and eventually death. Juvenile ceroid lipofuscinosis (JNCL, CLN3, Batten disease) has the distinctive feature that the ophthalmologic symptoms precede the neurologic symptoms by several years, and thus the ophthalmologist plays a central role in early diagnosis. Important clinical signs of JNCL include bull’s eye maculopathy, severely reduced Ganzfeld ERG already at initial presentation, and unusually rapid progression of the functional decline. If JNCL is clinically suspected the diagnosis can be made by means of a standard blood smear and confirmed by genetic detection of the mutation. Although causal therapeutic options are currently only in the developmental stage, early diagnosis by the ophthalmologist is of utmost importance to allow for medical and educational support of the affected child and for adequate counseling of the parents.