Kimio Bamba

Rapid and simultaneous detection of chromosome Y- and 1-bearing porcine spermatozoa by fluorescence in situ hybridization

This study was carried out to develop a rapid and simultaneous detection system of chromosome Y‐ and 1‐bearing porcine spermatozoa by fluorescence in situ hybridization (FISH). Chromosome Y‐ and 1‐specific DNA probes were produced by polymerase chain reaction with digoxigenin (Dig)‐ or biotin‐dUTP. The hybridization probe mixture of labeled Y‐chromosome and chromosome 1‐specific DNA was applied to the preparation, immediately denatured at 75°C for 8 min, hybridized for 5 min at 37°C and overall FISH steps were done within a few hours. When double FISH with Dig‐labeled chromosome Y‐specific and biotin‐labeled chromosome 1‐specific probes was applied to sperm nuclei pretreated with dithiothreitol, the average of 50.9% of sperm nuclei had the Dig‐signal, 99.2% of the sperm nuclei had the biotin‐signal and the average of 0.3% of sperm nuclei showed no signal. The putative rate of Y‐bearing spermatozoa ranged from 49.8% to 52.8% among 5 boars and the average putative rate of Y‐bearing spermatozoa was 51.0%. The results indicated that a rapid and simultaneous FISH with chromosome Y‐ and 1‐specific porcine DNA probes produced by PCR made possible more accurate assessment of Y‐bearing porcine spermatozoa.

The solubility of CO2 in boar seminal plasma

家畜の中でも豚の精漿中には特に多くのCO2が貯留されている。本実験ではこの貯留CO2が振盪や加温によってどのような影響を受けるか,また, 2貯留量とpHや, Na, Kイオン含量との関連性について調べた。得られた結果を要約すると次の通りである。1.加温や振盪操作により貯留CO2の一部が放出されるが,特に振盪によって放出は急激に促進された。2. 振盪を開始してから約5分間は, CO2放出が特に激しく起こった。 3mlの精漿を37°Cで振盪した場合の最初の5分間には95μlのCO2放出が認められた。3. 静置状態におけるCO2放出は徐々に起こり60分間以上続いた。4. CO2放出に伴って,精漿pHはアルカリ側に傾いた。5. pHが6.2~7.8のリン酸緩衝液の添加はCO2放出を促進した。6. 精漿のpHと貯留CO2量,あるいはNa, Kイオン含量との間には,正の相関関係が認められた。

Studies on the method of measuring the groupmovement of bull spermatozoa

要約精子の集団運動力を客観的に計測するために著者らが試作した装置を用いて実験したところ,次の結果を得た。1)本装置を用いた場合,shearingによって精子の運動を規制し,これを解く場合に復活する能力(R.T.)を測定することによって精子活力を計測することができることがわかった。2)R.T.の測定には用いた精子数の間には有意差がみられないことがわかった。但しR.T.を記録紙で読みとる点では1~2億精子/mlあたりが適当と思われた。3)用いたshearingの回転数はR.T.に対して有意差をもたらされないことがわかった。4)肉眼的測定値とR.T.との間には極めて高い負の相関々係γ=-0.826が検出された(P<0.01)。これによって,本装置は精子活力をR.T.で求めることにより数字的に示すことができる。