Kurt Schumacher

Specific T-cell marking by Helix pomatia agglutinin after neuraminidase treatment.

SummaryAfter neuraminidase treatment of human lymphocytes the “anti-A” agglutinin from Helix pomatia reacts only with T-cells. This phenomenon can be used for the separation, discrimination and labelling of human T-lymphocytes.ZusammenfassungNach Neuraminidasebehandlung von Humanlymphocyten reagiert das „Anti-A Agglutinin von Helix pomatia ausschließlich mit T-Zellen. Dieses Phänomen wird ausgenutzt zur Trennung, Unterscheidung und Markierung von T-Lymphocyten.

Tridacnin, a New Mitogenic Lectin from Invertebrate Sources

A new group of invertebrate lectins with anti-beta-galactosyl specificity, the so-called Tridacnins from the Tridacnid bivalve clams have been found to show not only agglutinating and precipitating properties, but also mitogenic activity as tested with human lymphocytes.

Studies on the nature of the PHA receptor

SummaryIsoelectric focusing was the method applied to demonstrate the heterogeneity of the erythroagglutinin receptor for the lectin from Phaseolus vulgaris. The receptor activity was found in the fractions containing neuraminic acid and not in the neutral glycoprotein material.ZusammenfassungMit Hilfe der Methode der Isoelektrischen Fokussierung wurde die Heterogenität des Receptors für das Erythroagglutinin aus Phaseolus vulgaris demonstriert. Die wirksamen Receptorfraktionen fanden sich unter den neuraminisäurehaltigen Glykoproteinen, nicht bei den neuraminsäurefreien, neutralen Fraktionen.

Nachweis und Identifizierung eines Faktors von Immunglobulin-M-Natur und Antikörper-Eigenschaft im Serum von Kranken mit Multipler Sklerose

ZusammenfassungDie Untersuchungen waren von der Frage ausgegangen, ob eine Autosensibilisierung gegen Gewebsbestandteile des menschlichen Zentralnervensystems im Prinzip möglich ist, mit welcher Methode zirkulierende Antikörper gegen Hirnextrakte nachgewiesen werden können, und bei welchen Krankheiten derartige Antikörper gebildet werden. Unter Verwendung der vonOuchterlony angegebenen Technik der Diffusion und Präcipitation im Agargel hatten wir in früheren Untersuchungen festgestellt, daß Seren von Kranken mit Multipler Sklerose, disseminierter Encephalomyelitis und „idiopathischer“ Polyradikuloneuritis (Gulliain-Barre) relativ häufig mit Extrakten aus normalem menschlichen Gehirn (weißer Substanz) eine Präcipitationslinie im Agargel bilden. Die Entstehungsbedingungen dieses Phänomens waren weiter aufzuklären, insbesondere war zu untersuchen, ob das Phänomen durch einen Serum-Eiweißkörper mit bestimmten Eigenschaften hervorgerufen wird. Folgende Ergebnisse wurden festgestellt:1.Das Präcipitationsphänomen wird durch einen Faktor verursacht, der bei verschiedenen Fällen von Multipler Sklerose in gleicher Weise nachgewiesen werden kann.2.Der Faktor gehört der Euglobulin-Fraktion an. Er ist in destilliertem Wasser und in neutraler Pufferlösung von geringer Ionenstärke (0,005 M Phosphat) unlöslich.3.Der Faktor hat die elektrophoretische Beweglichkeit eines schnell wandernden gamma-Globulins.4.Durch Chromatographie an DEAE-Cellulose kann der Faktor aus größeren Serum-Mengen oder aus Euglobulin präparativ gereinigt und angereichert werden. Der Faktor wird durch Pufferlösungen von hoher Ionenstärke und niedrigem pH-Wert (0,15 bis 0,3 M Phosphat, pH 5,0) aus DEAE-Cellulose eluiert. Der Faktor wird durch Anti-IgM-Seren vom Pferd in typischer Weise präcipitiert, er zeigt Kreuz-Reaktionen mit Anti-IgA- und Anti-IgG-Seren. Gereinigtes Immunglobulin-G (7 S-gamma-Globulin) aus MS-Seren enthält den präcipitierenden Faktor nicht.5.Der Faktor wird aus größeren Mengen aktiven Serums durch Absorption mit Hirnextrakt vollständig auspräcipitiert. Das gewaschene Immunpräcipitat kann in sauerem Milieu (pH 3,2) dissoziiert werden. Die Immunelektrophorese des dissoziierten Komplexes ergibt ein Protein mit den Eigenschaften eines schnell wandernden gamma-Globulins. Als ein Immunglobulin-M mit Antikörper-Eigenschaften entspricht der Faktor als Protein anderen hochmolekularen Antikörpern der IgM-(19 S)-Klasse, wie z. B. dem Rheumafaktor der primär chronischen Polyarthritis, bestimmten antinucleären Faktoren des Lupus erythematodes visceralis und den Thyreoglobulin-Antikörpern entzündlicher Schilddrüsen-Erkrankungen. Der Faktor in MS-Seren unterscheidet sich jedoch in seiner Antikörper-Eigenschaft von den genannten Faktoren durch die Substratbindung an Hirnextrakt. Er ist mit keinem bisher beschriebenen Faktor identisch. Der Faktor findet sich in Seren von Kranken mit Multipler Sklerose in aktiven Stadien der Entzündung. Nach den vorliegenden Ergebnissen ist es wahrscheinlich, daß der Faktor in einer relativ engen Beziehung zu der entzündlichen Gewebsdestruktion steht.SummaryThe investigations were carried out to determine whether autosensitization against tissue constituents of normal human CNS can develope, and if so, in what diseases and with what methods circulating antibodies against brain extracts could be demonstrated. Using the Ouchterlony technique of double diffusion in agar plates in previous experiments we observed, that sera from patients with Multiple Sclerosis, Disseminated Encephalomyelitis and Polyradikuloneuritis (Gullain - Barré - Syndrome) frequently give a precipitin reaction with extracts from the white substance of normal human brain. — The conditions leading to the formation of this phenomenon were still to be investigated and in particular whether it is brought about by a special serum-protein-factor.The following results were observed:1.A factor which could be demonstrated in various MS-cases under the same conditions is responsible for the reaction.2.The factor belongs to the euglobulins. It is insoluble in destilled water and in neutral buffer solutions of low ionic strength (0.005 M Phosphate).3.The electrophoretic mobility of the factor corresponds to that of a fast moving gamma-Globulin.4.The factor can be purified and concentrated from large quantities of serum or euglobulin by anionic-exchange-Chromatography on DEAE-Cellulose. The factor can be eluated from DEAE-Cellulose using buffer solutions of high ionic strength and low pM-values (0.15–0.3 M Phosphate, pH 5.0). The factor exhibits typical precipitation with anti-IgM-sera. Purified Immunglobulin-G (7 S gamma-Globulin) obtained from sera of patients with multiple sclerosis does not contain the factor.5.The factor could be completely precipitated from large quantities of active sera by absorption with human brain extracts. The washed immune-precipitates could be dissociated. The dissociated complex containes a protein with electrophoretic properties of a fast moving gamma-Globulin. As a Immunglobulin-M with antibody-activity the factor has resemblance to other high molecular weight antibodies of the 19 S class, such as the rheumatoid factor of the rheumatoid arthritis, particular antinuclear factors of systemic lupus erythematosus, and the thyreoglobulin-antibodies of the autoimmune-thyreoiditis. The factor in MS-sera is clearly different in its antibody properties from the above mentioned factors. The factor is not identical with any other factor already described. It is to be found in sera of patients with Multiple Sclerosis in the active inflammatory phase.

A new group of mitogenic lectins from invertebrate sources.

In the haemolymph of the Tridacnid bivalve clams anti-galactans occur which do not have only glycosubstance precipitating and cell agglutinating properties, but also show mitogenic activity with respect to the blast transformation of human peripheral lymphocytes. This new property can be inhibited in a specific way by galactans and is destroyed by the degradation of the mitogenic lectin into subunits by polymer bound pronase. Quite a number of invertebrate haemolymph samples and snail albumin gland extracts, containing agglutinin activity, proved to have no mitogenic potency. The only exception was found in an extract of the snail albumin gland of Ampullaria canaliculata which contained a strong mitogen of the lectin type.

Isolation of the lymphoagglutinating fractions of phytohaemagglutinin (PHA) from phaseolus vulgaris and characterization of their biological properties

SummaryPhytohaemagglutinin (PHA-P) was separated by ion exchange chromatography, absorption procedures, and isoelectric focusing. Two active fractions were obtained. One of them was homogenous by physico-chemical characterization. Both fractions showed lymphoagglutinating, mitogenic, and cytoaggression-inducing activity. In spite of varying isoelectric points, the biological properties were qualitatively identical. It was not possible to associate single properties to different fractions. In our preparation, the biological activity was related to protein and to the protein content of the fractions. From other experimental data, we think that the binding sites of the active molecule are represented by carbohydrates.ZusammenfassungPHA-P wurde durch Ionenaustausch-chromatographie, Absorption der Fraktionen an Schweine-erythrocyten und isoelektrische Focussierung fraktioniert. Es fanden sich 2 aktive Fraktionen. Beide Fraktionen hatton lymphagglutinierende, mitogene und Cytoaggression induzierende Aktivität. Trotz verschiedener isoelektrischer Punkte waren die biologischen Eigenschaften der beiden Fraktionen qualitativ gleich. Es war nicht möglich, einzelne der an Lymphocyten auslösbaren Reaktionen verschiedenen Fraktionen zuzuordnen. In unserer Präparation stand die biologische Aktivität quantitativ in Relation zum Proteingehalt der Fraktionen. Auch war die biologische Wirkung an Protein geknüpft. Allerdings fehlen bisher Versuche, die biologische Aktivität vom Protein zu trennen. Wir sind aufgrund anderer Versuche davon überzeugt, daß die Bindungsstellen des aktiven Moleküls mehr durch Kohlenhydrate als durch Proteine repräsentiert werden.

Interaction of peanut agglutinin with human lymphocytes. Binding properties and topology of the receptor site.

The relationship between the mitogenic lectin PNA and other mitogenic and non-mitogenic lectins was investigated. PNA labelled with 125I was found to bind equally well to T and B lymphocytes, after neuraminidase treatment, with 3.88 times 10(6) and 3.73 times 10(6) binding sites respectively. Only the T cell fraction was stimulated, however, and only after neuraminidase treatment. Preincubation of neuraminidase-treated cells with non-mitogenic lectins and antiserum which appeared to bind to the same receptor as PNA, enhanced the latters stimulatory properties. Capping and co-capping techniques were used to examine the topology of lectin receptors on the lymphocyte surface. The receptor glycoprotein for the mitogenic PNA lectin was found to be distinct from that possessing the Con A and PHA receptors, as well as that possessing the receptor for the non-mitogenic lectin from Helix pomatia.

Detection of lymphocytes with increased DNA-Synthesis in the peripheral blood of patients with active chronic hepatitis

SummaryThe first observation of “in vivo activated lymphocytes” [IVAL] in cases of active chronic hepatitis is reported. Lymphocytes with an elevated metabolism were observed in about 30% of patients with this disease. The persistence of such active lymphocytes was associated with a bad prognosis. The role of these cells as mediators of specific immunity comparable to the graft rejection is discussed.ZusammenfassungEs wird über die erstmalige Beobachtung von „in vivo aktivierten Lymphocyten“ [IVAL] bei aktiver chronischer Hepatitis berichtet. Solche Lymphocyten mit einem erhöhten „Ruhestoffwechsel“ wurden bei 30% unserer Patienten mit dieser Erkrankung beobachtet. Eine Persistenz der Lymphocytenaktivität ist mit einer schlechten Prognose kombiniert. Die Deutung dieser Zellen als Träger der spezifischen Immunität, vergleichbar der Transplantat-Abstoßungs-Reaktion wird diskutiert.

The influence of urea on protein synthesis of stimulated lymphocytes

SummaryAfter an incubation time of 90 hours, urea at concentrations from 100 to 500 mg-% leads to a significant reduction of the protein synthesis of PHA-stimulated human lymphocytes.ZusammenfassungHarnstoff in Konzentrationen von 100–500 mg-% führt nach einer Inkubationszeit von 90 Std zu einer signifikanten Reduktion der Proteinsynthese in PHA-stimulierten menschlichen Lymphocyten.

Isolation of the mitogenic components from phytohaemagglutinin.

SummaryFrom PHA-P a pure mitogen was isolated, using a combination of two separation procedures, cation exchange chromotography and gel filtration. The biological activity of this purified mitogen was about a hundredfold higher compared with the starting material.ZusammenfassungDurch die Kombination zweier Trennverfahren, der Kationenaustausch-Chromotographie und der Gelfiltration wurde, ausgehend von PHA-P ein reines Mitogen isoliert. Die biologische Aktivität des gereinigten Mitogens war hundertfach höher als die des Ausgangsmaterials.