Mary Trujillo

Plasmodium vivax Duffy binding protein peptides specifically bind to reticulocytes

Plasmodium vivax Duffy Binding Protein (Pv-DBP) is essential during merozoite invasion of reticulocytes. Reticulocyte binding region identification is important for understanding Pv-DBP reticulocyte recognition. Fifty 20 mer non-overlapping peptides, spanning Pv-DBP sequences, were tested in erythrocyte and reticulocyte binding assays. Ten HARBPs, mainly located in region II (Kd 50-130 nM), were High Activity Reticulocyte Binding Peptides (HARBPs); one bound to erythrocytes. Reticulocyte trypsin-, chymotrypsin- or neuraminidase- treatment affects HARBP binding differently, suggesting that these peptides have different reticulocyte-binding-sites. Some peptides bound to a Coomasie non-stainable 40 Kda band. Some HARBPs were able to block recombinant PvRII binding (Pv-DBP region II) to Duffy positive reticulocytes.

Amino terminal peptides of the ring infected erythrocyte surface antigen of Plasmodium falciparum bind specifically to erythrocytes.

The Ring-Infected Erythrocyte Surface Antigen (Pf155/RESA) sequence was chemically synthesized in fifty four 20-mer sequential peptides, covering the entire protein, each of which was tested in erythrocyte binding assays. Peptides 6671 and 6673, corresponding to residues 141-160 and 181-200, respectively, presented a high specific binding activity to erythrocytes with affinity constants of 190 nM and 105 nM respectively. Their binding was sensitive to previous enzymatic treatment of erythrocytes. A region of peptide 6673 has been identified, very recently, as a B-cell epitope, target of neutralizing antibodies (Siddique AB, Iqbal J, Ahlborg N, Wâhlin FB, Perlmann P, Berzins K. Antibodies to nonrepeat sequences of antigen Pf155/RESA of Plasmodium falciparum inhibit parasite growth in vitro. Parasitol Res 1998;84:485-91). The critical residues for erythrocyte binding for peptide 6671 (MTDVNRYRYSNNYEAIPHIS) and for peptide 6673 (LGRSGGDIIKKMQTLWDEIM) were recognized. Based on these data, the presence of five functional regions of RESA is postulated.

Evaluación de la intercambiabilidad in vitro de diferentes marcas de tabletas de diclofenaco sódico del mercado colombiano

Introducción. El diclofenaco sódico se clasifica como un antiinflamatorio no esteroide. Dado que es de venta libre, el paciente no tiene ningún seguimiento por parte de los equipos de salud, y como sus fuentes son múltiples, es necesario establecer la equivalencia entre ellas en estudios in vitro, que son los más prácticos y plantean un menor compromiso ético.Objetivos. Determinar la intercambiabilidad de diferentes marcas comerciales de diclofenaco sódico comparadas con el producto innovador mediante un estudio in vitro de tabletas comerciales de 50 mg, según los lineamientos del Sistema de Clasificación Biofarmacéutica (SCB).Materiales y métodos. Se desarrollaron pruebas físicas y químicas siguiendo las indicaciones de la edición 39 de la United States Pharmacopeia (USP). Para la cuantificación, se validó una metodología analítica según lo establecido en la mencionada farmacopea y la guía Q2 del International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (ICH). Los perfiles de disolución y sus análisis se rigieron por lo establecido por la Organización Mundial de la Salud y las normas nacionales.Resultados. Todos los productos aprobaron las pruebas físicas. En cuanto a la disolución, la etapa ácida también fue superada por todas las marcas, pero una marca falló en la etapa alcalina. El análisis de similitud reveló que solo un producto fue equivalente al innovador y tres fueron supradisponibles, aunque dichas marcas también podrían considerarse equivalentes al producto innovador.Conclusiones. De las ocho marcas evaluadas, tres no cumplieron totalmente con la prueba de valoración del principio activo y del porcentaje de disolución; solo una marca fue intercambiable con el producto innovador y tres fueron supradisponibles comparadas con este, por lo cual no constituyen un riesgo para el paciente.