Miroslav Dvořák

Mutational analysis (c.402C>G) of the FOXL2 gene and immunohistochemical expression of the FOXL2 protein in testicular adult type granulosa cell tumors and incompletely differentiated sex cord stromal tumors.

BackroundRecently a somatic point mutation in the FOXL2 gene has been characterized in ovarian adult type of granulosa cell tumor (ATGCT) (94.6%), thecomas (12.5%), but not in juvenile type of ovarian granulosa cell tumor, other ovarian sex cord tumors and ovarian surface epithelial neoplasms. Whether this mutation is present in testicular ATGCT or incompletely differentiated sex cord stromal tumor (ISCST) is not known. DesignFour ATGCTs, 4 ISCST were immunohistochemically investigated with anti-FOXL2 and 3 ovarian ATGCTs were used as positive control. ResultsWeak-to-moderate immunoreactivity was found in all tested testicular and ovarian tumors. PCR and direct sequencing were used for detection of c.402C>G of the FOXL2 gene. No mutation was found in any of the testicular ATGCTs or ISCSTs whereas all ovarian tumors showed the c.402C>G point mutation of the FOXL2 gene. ConclusionsOn the basis of this small series of these rare testicular neoplasms, it seems that the c.402C>G mutation of the FOXL2 gene frequently found in adult type of ovarian GCT does not play any significant role in the development of ATGCT and ISCST.

Characteristics of current passage through plant tissue

Plant tissue connected in a d.c. circuit behaves as a capacitor, short-circuited through a resistor. Using a saw-tooth voltage (T = 2 ma, Umax = + 13 V), structural and physiological conditions in a plant tissue can be analyzed on the basis of changes in the current character.

Peroxidases of different parts of the pumpkin plant (Cucurbita pepo L.)

We compared the occurrence of peroxidase isozymes in protein extract from roots, hypocotyls and cotyledons of 10 dayCucurbita pepo plants and of adult leaves of older plants by means of starch gel and polyacryl amide gel electrophoresis. We reached maximum discrimination by means of starch gel electrophoresis: 11 zones were ascertained on the cathode side and about 2 on the anode side at pH 3.1. Two zones occurred regularly:A and (the latter having a more complicated structure). ZoneD is characteristic for roots, but is it suppressed and seldom found with leaves. On the other hand zonesC1 andC2 are clearly discernible with leaves but are substantially less evident with roots. The character of anodic zoneZ is discussed later in this paper.AbstractSrovnávali jsme pomocí škrobové nebo polyakrylamidové elektroforézy přítomnost různých peroxidáz v bílkovinných extraktech z kořenů, hypokotylů a děloh desetidenních rostlin tykve (Cucurbita pepo L.) a z listů starších rostlin. Optimální rozlišení jsme získali pomocí škrobové elektroforézy při pH = 3.1; 11 zón na anodické a cca 3 na katodické straně. 2 zóny se vyskytovaly pravidelně, A(druhá se složtější strukturou). Zóna D je charakteristická pro kořeny, zatímco v listech bývá značně potlačena nebo není průkazná. Naproti tomu zóny C1 a C2 jsou velmi výrazné u listů a podstatně méné zřetelné v kořenech. Charakter anodické zóny Z je předmětem širší diskuse v předložené práci.AbstractПри помощи электрофореза на крахмальном геле (или полиакриламидном геле) мы сравнивали паличие разнокачественных пероксидаз в белковьгх вытяжках из корней, гинокотилей и семядолей растении тыквы (Cucurbita pepo) в возрасте 10 дней, и из листьев взрослых растений. Самое хорошое разделепие ферментов мы получили на крахмальном геле, где появилось 11 зон в катодной части и приблизителъно три в анодной при pH = 3,1.Мы всегда встречали две зоны: A и B (вторая с более сложным строением). Для набора пероксидаз корней характерным компонентом является D, мало или вовсе пе появляющийся в листовых органах. Б листьях, наоборот, ферменты C1 и C2 очень четкие, которые, однако, мало заметныв корнях. Б работе также обсуждается природа анодной зоны Z.

End-stage kidney disease: gains of chromosomes 7 and 17 and loss of Y chromosome in non-neoplastic tissue.

The aim of this study was to determine the copy number changes of chromosomes 7, 17, 3p, and Y in a non-neoplastic tubular epithelium in end-stage kidney disease (ESKD). Seventeen kidneys from 11 patients with ESKD were retrieved from the archive files. Non-neoplastic kidney tissue in these cases was examined separately. Tissues containing papillary adenomas (PA), clear (CRCC) and papillary renal cell carcinomas (PRCC), and myxoid liposarcoma (LPS) were examined using the same probes and compared with non-neoplastic tissue. Tubular changes in the kidney parenchyma were classified into three types: (1) The vast majority of tubules were entirely atrophic; (2) Several tubules were hyperplastic, i.e., tubules with undifferentiated large epithelial cells, in which it was impossible to establish the specific type of a renal tubulus; (3) Dysplastic tubules were dilated, sometimes wrinkled. The basal membranes were lined by large eosinophilic epithelial cells with polymorphic nuclei and pseudostratification. Nucleoli were clearly visible. These tubular changes were multifocal with a haphazard distribution within the atrophic parenchyma. PA were detected in nine patients, of whom eight patients also revealed an additional tumor type(s) (4x CRCC, 3x PRCC, 1x PRCC, and CRCC). One patient had a CRCC only, another had a combination of PRCC and LPS. Chromosomal abnormalities were found in the second and third group of tubular changes, i.e., in hyperplastic and dysplastic tubules. Trisomy of chromosome 7 was detected in six cases, whereas trisomy of chromosome 17 in eight cases. A combination of both trisomies was found in five cases. Loss of chromosome Y was found in two cases. Fluorescence in situ hybridization on tissues containing papillary adenomas, renal cell carcinomas, and liposarcoma revealed expected results, i.e., trisomy of chromosomes 7 and 17 in all PAs and PRCC. No gains were present in CRCC and LPS. Loss of Y was found in six PA, five PRCC, and one LPS; loss of X was found in two CRCCs. We suggest that chromosomal changes typical of the papillary renal cell lesions, i.e., trisomies of chromosomes 7 and 17, are very frequent in non-neoplastic parenchyma of the end-stage kidney, and they have a tendency to a multifocal occurrence.

Sorption of some ions by algae related to their trophic conditions

The unicellular algaeScenedesmus obliquus (125),Chlorella pyrenoidosa (82) andCoccomyxa solorinae saccatae (111) were studied with respect to the form of uptake of potassium, phosphate, calcium and zinc ions and to the energy sources involved: light under autotrophic conditions, glucose under mixotrophic or heterotrophic conditions (in light and in darkness or together with yeast extract as an auxotrophic substrate). We respected the trophic conditions of algae when preparing the experimental material (precultivation). The following conditions were reached:(1)The three algae grow faster in a glucose medium under mixotrophic conditions and are capable of growing on it also heterotrophically:Ch. pyrenoidosa andSc. obliquus grow substantially better thanC. solorinae saccatae. The first two algae grow more intensively in a glucose medium containing yeast extract whileCoccomyxa does not. After cultivation under mixotrophic conditions the first two diminish endogenous respiration, the third raises it. Glucose stimulates respiration in the first two when grown autotrophically, while after mixotrophic cultivation the effect of glucose is suppressed inCh. pyrenoidosa and in the other two only after growth on glucose with yeast extract.(2)A relationship between sorption and metabolism was established for potassium in all the algae investigated. The effect of light is generally positive, heterotrophic components (glucose and possibly yeast extract) stimulate the uptake in the dark as long as they represent a suitable mixotrophic medium for the given alga.(3)The uptake of K+ was proportional to concentration in solution and independent of Ca2+.(4)The uptake of phosphate is clearly stimulated by light, while no stimulation under mixotrophix or heterotrophic conditions on glucose was observed—actually, a depression usually took place.(5)At concentrations from 10−6M to 10−2M the uptake of phosphate is non-linearly but positively related to the concentration in the medium. The presence of Ca2+ is the cause of non—metabolic forms of phosphate sorption.(6)Two forms of calcium uptake were found: the predominant one is adsorption which can be associated with the presence of phosphate ions; the metabolic uptake represents a considerably lower fraction which is characterized either by a light dependence or at least by a rise of calcium content between t=0.1–6 h.(7)The absorbed Ca2+ can be washed out up to 75% with dilute hydrochloric acid. The total adsorption and remainder after washing depend on the pH of the solution from which the sorption took place (a considerable rise beyond pH 6·5). A substantial effect on the formation of the adsorption system was found to be due to organic nutrients. Algae after mixotrophic precultivation possess a decreased sorptive capacity.AbstractV práci jsme sledovali u několika druhů jednobuněěných řas, především uScenedesmus obliquus (125),Chlorella pyrenoidosa (82) aCoccomyxa solorinae saccatae (111), formy příjmu iontů K+, PO43−, Ca2+, ev. Zn2+ a energetické zdroje, které se při něm uplatní: světlo v autotrofních podmínkách, glukóza v mixotrofních, či heterotrofních za světla a za tmy nebo spolu s kvasničným extraktem jako autotrofním substrátem. Respektovali jsme též trofické podmínky řas při přípravě exp. materiálu (prekultivace). Shrnujeme závěry:1.U tří z pokusných rostlin byl podrobněji studován růst a respirační metabolismus ve vztahu ke glukóze: všechny tři mají rychlejší růst na glukózovém médiu v mixotrofních podmínkách a jsou s to růst na něm i heterotrofně:Ch. pyrenoidosa aSc. obliquus podstatně lépe nežC. colorinae saccatae. Prvé dvě řasy rostou intenzívněji na glukózovém médiu s kvasničným extraktem,Coccomyxa ne. Po kultivaci v mixotrofních podmínkách snižují prvé dvě endogenní respiraci, třetí zvyšuje; glukóza stimuluje u prvých dvou respiraci řas, pěstovaných autotrofně, po mixotrofní kultivaci je glukózový efekt uCh. pyrenoidosa potlačen, u dalších dvou až při kultivaci na glukóze s kvasničným extraktem.2.Pro draslík byla u všech sledovaných kultur zjištěna závislost sorpce na metabolismu; všeobecně je zřetelný pozitivní vliv světla, heterotrofní složky (glukóza, ev. + kvasničný extrakt) stimulují temnostní příjem, pokud jsou pro danou řasu vhodným mixotrofním prostředím.3.Příjem K+ byl úměrný koncentraci v roztoku a nezávislý na přítomnosti Ca2+.4.Příjem fosfátu je zřetelně stimulován světlem, není patrna stimulace v mixotrofních čí heterotrofních podmínkách na glukóze, dochází naopak zpravidla k depresi.5.V koncentracích 10−6 až 10−2m je příjem fosfátu nelineárně přímo závislý na koncentraci v roztoku. Přítomnost Ca2+ je přćinou nemetabolických forem sorpce fosfátu.6.Pro vápník byly zjištěny 2 formy příjmu: převládající je adsorpce, která může být spojena s přítomností fosfátových iontů; podstatně menší podíl tvoří metabolický příjem, charakterizovaný bud závislostí na světle, nebo aspoň vzestupem obsahu Ca2+ mezi t=0,1 až 6 hod.7.Adsorpčně přijatý Ca2+ možno ze tří čtvrtin vymýt zřed. HCl; celková sorpce i zbytek po vymývání jsou závislé na pH roztoku, v němž sorpce probíhala (značný vzestup nad pH=6,5). Podstatný vliv na vznik sorpčního systému řasy má org. výživa: řasy překultivované mixotrofně mají sníženou sorpční kapacitu.AbstractВ работе с некоторыми видами одноклеточных водорослей, прежде всего соScenedesmus obliquus (125).Chlorella pyrenoidosa (82) иCoccomyxa solorinae saccatae (111) мы исследовали формы поглощения ионоб K+, PO43−, Ca2+, Zn2+ в зависимости от источника энергии: света в эвтотрофных условиях, глюкозы в миксотрофных или гетеротрофных условиях (на снету и в темноте), а также от добавления дрожжевого экстракта в качестве ауксотрофного субстрата. Учитывали, также трофические условия при подготовке материала (предкультивапии). Краткие итоги:1.В опытах с тремя водорослями изучался более подробно рост и дыхательный обмен в зависимости от глюкозы. Все три растут быстрее на питательной среде с глюкозой в миксотрофных условиях и способны расти на ней и гетеротрофно:Ch. pyrenoidosa иSc. obliquus значительно лучше, чемCoccomyxa. Первые две растут более интенсивно на питательной среде с глюкозой и дрожжевым экстрактом, уCoccomyxa дрожжевой экстракт не улучшает рост. Эндогенное дыхание снижается после культивации в миксотрофных условиях уCh. pyrenoidosa иSc. obliquus, уCoccomyxa пояышается. Глюкоза стимулирует дыхание уCh. pyrenoidosa иSc. obliquus после автотрофной предкультивации, после выращивания в миксотрофных условиях эффект глюкозы уCh. pyrenoidosa подавлен, у других двух водорослей подавление глюкозного эффекта происходит лишь при применении глюкозы совместно с дрожжевым экстрактом.2.У калия была у всех изучаемых культур установлена зависимость сорпции на уровне обмена и во всех случаях очевидно положительное влияние света, гетеротрофные компоненты (глюкоза, глюкоза с дрожжевым экстрактом) стимулируют темновое поглощение при условии, что они являются подходящей миксотрофной средой для данной водоросли.3.Поглощение K+ пропорционально концентрапии в растворе и независимо от присутствия Ca2+.4.Свет стимулировал поглощение фосфата, стимуляция не была замечена в миксотрофных или гетеротрофных условиях на глюкозе, при этих условиях наоборот обычно происходит депрессия.5.При концентрациях 10−6 до 10−2 М поглощение фосфата нелинейно прямо пропорционально концентрации в растворе. Присутствие Ca2+ определяет метаболическую форму сорпции фосфата.6.Для кальция установлены две формы ноглощения: преобладающей является адсорпция, которая может быть связана с присутствием фосфатных ионов: значительно меньшая доля поглощаемого кальция приходится на метаболическое поглощение характеризованное зависимостью от света или хотя бы повышением содержания Ca2+ между t=0,1 до 6 час.7.Адсорбированную часть поглощенного Ca2+ можно на три четверти отмыть разведенной HCl: общая сорпция и остаток после отмывки зависят на pH раствора, из которого происходила сорпция (значительное повышение над pH=6,5). Существенное влияние на возникновение сорпционной системы водоросли оказывает органическое питание: у водорослей миксотрсфно предкультивированных сорпционная емкость понижена.

Comparison of effects of calcium deficiency and IAA on the pumpkin plant (Cucurbita pepo L.)

In pumpkin plants suffering from calcium deficiency growth of the root system is characteristically suppressed. A biochemical symptom of calcium deficiency is a decrease or even complete disappearance of activity of one of the isoperoxidases (isoperoxidaseD). In the present study the two characteristics were used to compare the effects of calcium deficiency and of IAA in the supraoptimal concentration of 10−5 M. Peroxidases were separated by centrifugal fractionation: peroxidasesA andB were found in the sediment corresponding to the mitochondrial fraction, peroxidaseD in the supernatant. It was not possible, however, to obtain the sediment completely free of peroxidaseD. A negative correlation between the activity of isoperoxidaseD and the logarithm of concentration of IAA in nutritive solution was found and similarities in the effects of IAA in supraoptimal concentration and of calcium deficiency on the development of root system were demonstrated. Still, it would be difficult to imagine that the mechanism of the action of the two factors is the same. For this reason, a scheme of possible interactions was suggested with the aim to explain how similar changes in the content of isoperoxidases are brought about by the two factors. In this scheme, calcium is considered chiefly as a substance regulating membrane permeability.AbstraktRostliny tykve, trpící nedostatkem vápníku, mají charakteristicky potlačený růst kořenového systému. Z biochemického hlediska je jedním ze symptomů deficience snížení aktivity (či úplná ztráta) jedné z izoperoxidáz (D). Podle těchto dvou charakteristik jsme srovnávali působení deficitu Ca2+ a supraoptimální koncentrace IAA (10−5 M).Centrifugační frakcionací bylo zjištěno, že peroxidázyA aB přísluší partikulátní (mitochondriální) frakci, zatímcoD jinému (supernatantnímu) systému; partikulátní frakci se však od peroxidázyD nepodařilo zcela očistit.Prokázali jsme negativní korelaci mezi aktivitou izoperoxidázyD a log10 koncentrace IAA v živném roztoku a podobnost účinku supraoptimální koncentrace IAA a deficitu Ca na rozvoj kořenového systému. Cestu vlivu těchto dvou faktorů však není možno považovat za totožnou. Bylo proto navrženo schema možných interakcí aspoň s ohledem na změny v obsahu izoperoxidáz, podobně ovlivněném oběma faktory. Přitom Ca2+ považujeme předně za regulátor permeability membrán.

The amylolytic activity of Ca-deficient pumpkin plants (Cucurbita pepo L.)

We studied the significance of actual accessibility of ions for presence of α-amylase in roots and cotyledons of young pumpkin plants. We considered α-amylases to be—in agreement with published data—amylolytic enzymes which lose their activity after being dialysed against EDTA or a dilute solution of hydrochloric acid and which can be reactivated by addition of Ca2+. N connection with activity and Ca2+ nutrition appeared in cotyledons; it did, however, in roots: Ca-deficient plants revealed after preparation either completely inactive enzymes or enzymes with slight activity. It was, however, possible to reactivate them by addition of Ca2+ during preparation.So, using polyacrylamide disc electrophoresis we present evidence for the appearence of amylase with typical characteristics for α-amylases of other sources. Its relative mobility was the same for isolates from both roots and cotyledons. Its biosynthesis was not dependent upon metal which is associated with enzyme. No conclusion can be drawn as to whether Ca-deficient α-amylases are activein vivo; therefore it was impossible to judge whether α-amylase activity is subject to feed-back regulation.AbstractV souvislosti se studiem funkce Ca2+ v metabolismu rostliny jsme sledovali význam aktuální dostupnosti iontu pro výskyt α-amyláz v kořenech a dělohách mladých rostlin tykve. Za α-amylázy jsme považovali—shodně s údaji v literatuře—amylolytické enzymy, které ztrácejí aktivitu dialýzou proti EDTA či ve zředěné HCl a které je možno reaktivovat adicí Ca2+. V dělohách nebyl pozorovatelný vztah aktivity k výživě vápníkem, v kořenech ano: „*#x2014;Ca” rostliny dávaly po preparaci neaktivní nebo málo aktivní enzym; bylo jej však možno aktivovat přidáním Ca2+ během preparace. Tak jsme prokázali pomocí polyakrylamidové diskové elektroforézy výskyt amylázy s typickými charakteristikami pro α-amylázy jiných objektů. Měla stejnou relativní pohyblivost u kořenů i u děloh. Dále, že její biosyntéza není závislá na kovu enzymu. Práce nemohla řešit otázku, zda jsou Ca-deficientní α-amylázy in vivo aktivní a nelze tedy soudit, zda existuje „feed-back” regulace produktem hydrolytické aktivity.

Polyphenol oxidase in the roots ofCucurbita pepo L.

Z kořenů tykveCucurbita pepo L., sorta „Kabačky”, byl získán acetonový preparát, který má polyfenoloxydásovou aktivitu vůči pyrogallolu, podstatně menší vůči pyrokatechinu či DOPA. Je kompetitivně inhibován DIECA, dále KCN, není inhibován NaN3, což svědčí pro Cu-enzym polyfenoloxydasového typu. Kvantitativní rozdíly mezi variantami „NS” a „-Ca” nebyly zjištěny, kvalitativní rozdíly, dané afinitou vůči substrátu, nejsou průkazné.SummaryFrom the roots ofCucurbita pepo L. an acetone preparation was obtained with a polyphenol-oxidase activity towards pyrogallol, less marked towards pyrocatechin and DOPA. It is competitively inhibited by DIECA and KCN, but is not indibited by NaN3, which is evidence that it is a copper enzyme of the polyphenol oxidase type. No quantitative differences between the two variants “NS” and “-Ca” were found nor qualitative differences expressed by the affinity for the substrate.AbstractИз корней тыквыCucurbita pepo L., сорт «Кабачки» получен ацетоновый препарат, отличающийся полифенолоксидазной активностью по отношению к пирокатехину или кDOPA. Пренарат комнетитивно торможенDIECA, дальше KCN, не торможен NaN3, что говорит в пользу его идентификации как Cu-энзима полифенолоксидазного типа. Количественных различий между вариантами „NS” и «-Ca» не установлено, качественные различия, определяемые сродством по отношению к субстрату недостоверны.

Participation of ascorbate oxidase in the respiration ofCucurbita roots

Askorbinoxydasa byla studována jako jedna z terminálních oxydas v kořenech sedmidenních kultur tykve (Cucurbita pepo L.) ve vztahu k výživě vápníkem, jak je její množství a kvalita ovlivněna Ca-deficiencí. Autor došel k závěrům:1.V kořenechCucurbita pepo L., sorta „Kabačky”, byla dokázána askorbinoxydasa. Identifikaci jsme provedli podle substrátu oxydace, citlivosti enzymu vůči 10−4 DIECA; možnost interference jiných oxydasových systémů byla při sledování oxydační reakce vyloučena použitím acetonového preparátu.2.Stanovili jsme závislost aktivity enzymu na pH, teplotě, na koncentraci substrátu a prověřili jsme stechiometrii reakce (na 1 mol. kys. askorbové připadá 1/2 mol. O2).3.Porovnali jsme aktivitu enzymu u kultur, pěstovaných na plném živném roztoku („NS”) a na Ca-deficientním („-Ca”) a změny aktivity během vývoje kultur. Přepočteno na čerstvou váhu je u var. “-Ca” aktivita průkazně vyšší (cca dvojnásobná) než u var. „NS”, v obou případech dostačující k tomu, aby kryla spotřebu O2 intaktními kořeny. Kvalitativní rozdíly u enzymu obou variant nebyly zjištěny.4.Na oxydaci kyseliny askorbové v kořenech se může podílet také cytochromoxydasa. Účast polyfenoloxydasy nebyla prokázána. Prostřednictvím kyseliny askorbové může askorbinoxydasa oxydovat vodík-SH— skupin cysteinu.5.Přidání kyseliny askorbové ke kořenovým špičkám působí podstatný vzestup QO2 (o 70 až 90%), není tedy v intaktních buňkách při endogenní respiraci aktivita systémů oxydace kyseliny askorbové plně vytížena.SummaryAscorbate oxidase was studied as one of the terminal oxidases in the roots of seven-day old squash cultures (Cucurbita pepo L.) in relation to calcium nutrition and the influence of calcium deficiency on the quantity and quality. The work led to the following conclusions:1)Ascorbate oxidase was identified inCucurbita pepo L. roots, sort “Kabačky”. Identification was carried out according to substrate oxidation, and the sensitivity of enzymes to 10−4 M DIECA; the possibility of interference by other oxidase systems was eliminated during the study of the oxidation reaction by the use of acetone preparations.2)Dependence of the activity of enzyme on pH, temperature and concentration of the substrate was determined and the stoichiometry of the reaction (1/2 mol. O2 per 1 mol. ascorbic acid) was verified.3)Activity of enzymes of cultures, cultivated in a complete nutritive solution (“NS”) and calcium deficient (“-Ca”) solution, and changes in activity during the development of cultures, were compared. Converted into fresh weight, the activity of the “-Ca” variant is significantly higher (about twice) than that of the “NS” variant. In both cases, however, it was sufficient to cover the O2 consuption of intact roots. Qualitative differences in enzymes of the two variants were not determined.4)Cytochromoxidase may participate in the oxidation of ascorbic acid in the roots. Participation of polyphenoloxidase was not proved. With the intermediation of ascorbic acid, ascorbinoxidase can oxidize hydrogen-SH—groups of cysteine.5)Addition of ascorbic acid to root tips causes a considerable rise in QO2 (by to 90%), therefore activity of oxidation systems of ascorbic acid is not fully used in intact cells during endogenous respiration.AbstractАскорбиноксидаза как одна из терминальных оксидаз изучалась в корнях семидневных культур тыквы (Cucurbita pepo L.) в ее отношении к питанию кальцием, с точки зрения влияния, которое на ее количество и качество оказывает Ca-недостаточность. Работы привели к следующим выводам:1.В корняхCucurbita pepo L. сорта «Кабачки» доказана аскорбиноксидаза. Идентификацию мы провели по субстрате оксидации, чувствительности энзима по отношению к 10−4 M DIECA; возможность интерференции других оксидазных систем при изучении оксидазной реакции исключалась использованием ацетонового препарата.2.Нами установлена зависимость активности энзима на pH, температуре, концентрации субстрата и проверена стехиометрия реакции (к 1 мол. аскорбиновой кислоты относится 1/2 мол. O2).3.Проведено сравнение активности энзима у культур, выращиваемых в полном питательном растворе („NS”) и в растворе без Ca («-Ca») и изменений активности в течение развития культур. В пересчете на свежий вес в варианте „-Ca” активность достоверно повышена (приблизительно дважды) по сравнению с вариантом «HC», однако, в обоих случаях ее хватит для покрытия расходования O2 интактными корнями. Качественных различий в энзиме обоих вариантов не установлено.4.В оксидации аскорбиновой кислоты в корнях может участвовать также цитохромоксидаза. Участие полифенолоксидазы не выявлено. Посредством аскорбиновой кислоты аскорбиноксидаза может окислять водород-SH— групп цистеина.5.Прибавление аскорбиновой кислоты к корневым верхушкам вызывает существенное новышение QO2 (на 70–90%), следовательно, в интактных клетках при эндогенной респирации активность систем оксидации аскорбиновой кислоты полностью не используется.

NADH- and ferredoxin-dependent glutamate synthase in the life span of the second leaf of wheat plant under conditions of senescence induced by nitrogen deficiency and natural senescence

The aim of this paper was to study, in the second leaf of wheat plants with a long ontogenesis (47 d), the activity of the enzyme which catalyzes the synthesis of glutamic acid. The activity of the NADH-dependent glutamate synthase prevailed in young tissues of not yet fully expanded second leaf at the stage of incomplete autotrophy (at this stage, organic carbon and nitrogen substances are transferred into the leaf). This form was completely inhibited by azaserine (1 mmol1−1). The activity of the ferredoxin-dependent GOGAT increased with increasing leaf blade area, with its peak occuring at the time of maximum expansion of the assimilation area. Thus fd-GOGAT activity was characteristic for the photosynthetic fully autotrophic phase of leaf development which is materialized in completely mature leaf tissues. In plants grown in full-strength Knop’s nutrient solution containing nitrogen, fd-GOGAT was active till the early and medium senescence, whereas only to the early senescence in plants grown in a solution lacking nitrogen. No fd-GOGAT could be detected at the stage of late leaf senescence.