Oreste Triggiani

Occurrence of entomopathogenic fungi in soils in Southern Italy

The natural occurrence of entomopathogenic fungi was investigated in Southern Italian soils using larvae of Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Galleriidae) as “bait insect”. Since September (1996) to March (1997) 188 samples of soil were collected from different habitats (woodland, orchard, field, seacoast, grassland, uncultivated land and salt pan). Parasitic fungi were obtained from 14.9% of the soil samples. There were 3 entomopathogenic species: Metarhizium anisopliae (Metchnikoff) Sorokin, Paecilomyces lilacinus (Thom) Samson and Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin. The most common fungal pathogen was B. bassiana. Both M. anisopliae and P. lilaci- nus were isolated only once. The occurrence of B. bassiana seems to be affected by the soil type and the habitat. Key words: survey, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Paecilomyces lilacinus. FUNGHI ENTOMOPATOGENI NEI TERRENI DELL’ITALIA MERIDIONALE E stata effettuata un’indagine per valutare la presenza e la distribuzione di funghi entomopatogeni nei terreni dell’Italia meridionale utilizzando larve di Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Galleriidae) come insetto esca. Da settembre 1996 a marzo 1997, sono stati esaminati 188 cam- pioni di terreno provenienti da diversi biotopi. Sono state rinvenute larve infettate da funghi in 28 campioni (14,9%) e sono state identificate 10 specie di funghi parassiti di cui 3 propriamente entomopatogeni: Metarhizium anisopliae (Metchnikoff) Sorokin, Paecilomyces lilacinus (Thom) Samson e Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin. Il fungo patogeno rinvenuto con maggior frequenza e risultato essere B. bassiana. La sua presenza sembra correlata alle caratteristiche del suolo e dell’habitat. Parole chiave: indagine, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Paecilomyces lilacinus.

Efficacy and Persistence of Entomopathogenic Nematodes in Controlling Larval Populations of Thaumetopoea pityocampa (Lepidoptera: Thaumetopoeidae)

A 3-year study was conducted in a Pinus halepensis reforestation of Apulia Region (Southern Italy) injecting IJs (infective juveniles) of Steinernema feltiae , S. carpocapsae and Heterorhabditis bacteriophora in aqueous and gel suspensions (Idrosorb SR 2002 [Nigem ® ], and Compex) into the nests of Thaumetopoea pityocampa caterpillar. This study showed that the gel suspensions do not percolate and that slow release of water from the gels allowed nematodes to survive and complete their life cycle in the host. Results demonstrate the feasibility of reducing overwintering larval populations by injecting gel suspension of S. feltiae . We found no negative effects on the endoparasite Phryxe caudata .

Laboratory studies on the competition for insect haemocoel between Beauveria bassiana and Steinernema ichnusae recovered in the same ecological niche

Abstract Laboratory assays evaluated the combined action of the entomopathogenic nematode Steinernema ichnusae and the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana isolated from the same ecological niche, an oak forest in Sardinia (Italy). Galleria mellonella larvae were used as the test insect with the aim of understanding what happens in host haemocoel during a simultaneous infection with two different entomopathogens. Larval mortality assays were performed using nematodes and fungi both alone and together, at the same and different times, and in different concentrations. No additive or synergistic effects were observed, but there was a clear antagonism and competition for survival space in the haemocoel. Moreover, mutual effects between the symbiotic bacteria of the entomopathogenic nematode Xenorhabdus bovienii and entomopathogenic fungi were investigated. In laboratory experiments, X. bovienii crude extracts were tested for their activity against fungal growth. Compounds produced by B. bassiana were tested for their activity against the growth of bacteria, revealing that X. bovienii and B. bassiana are antagonistic to each other.

Steinernema ichnusae sp. n. (Nematoda: Steinernematidae) a new entomopathogenic nematode from Sardinia Island (Italy).

A new Steinernema species was isolated from three different sandy soil samples along the Platamona Beach, in the north-west coast of Sardinia Island (Italy). This new species is characterized by the following morphological characters: infective third-stage juvenile with a body length of 866+/-61 (767-969)microm, distance from head to excretory pore of 63+/-2.7 (59-68)microm, tail length of 81+/-3.2 (76-89)microm, ratio E (%) 77+/-3.4 (68-83); male tail with a mucron only in the second generation, spicule length of 66+/-1.4 (64-67)microm and gubernaculum length of 44+/-1.4 (43-46)microm in the first generation male; female of first generation with a slight vulval protrusion and ratio D (%) of 53+/-4.0 (47-63). The new species differs distinctly from the related species (S. feltiae, S. kraussei, S. litorale, S. oregonense and S. cholashanense) in some morphometric values such as percentage of hyaline portion, ratios of gubernaculum/spicule length, spicule head length/width. The DNA analyses of the internal transcribed spacers and D2D3 regions show that the studied nematode isolates are a new species. Cross hybridisation tests with S. feltiae, S. kraussei, S. litorale, S. weiseri and S. oregonense showed that these species were reproductively isolated.

TIPOLOGIE STRUTTURALI E CARATTERISTICHE FUNZIONALI DELLE AREE VERDI PERIURBANE: IL CASO DI STUDIO DELLA CITTÀ DI BARI

Si riportano i risultati di uno studio multidisciplinare finalizzato alla comprensione dei rapporti struttura-processo tra aree verdi periurbane e specie dell’entomofauna (coleotteri terricoli). Lo studio ha interessato una vasta superficie verde posta ai margini dell’agglomerato urbano di Bari denominata «Lama Balice» (Parco Naturale Regionale). Per tale area sono stati effettuati rilievi in campo al fine di determinare gli habitat vegetazionali prevalenti e le principali specie di coleotteri terricoli presenti in ciascun habitat. Complessivamente sono stati identificati 1779 coleotteri, di cui 1209 carabidi, 99 silfidi, 240 stafilinidi, 231 tenebrionidi. L’analisi statistica dei dati raccolti ha evidenziato una relazione significativa tra habitat e coleotteri carabidi e silfidi, con prevalenza dei coleotteri nell’habitat macchia-gariga. Di contro, nell’analisi non sono state riscontrate relazioni significative tra stafilinidi e tenebrionidi e i diversi habitat vegetazionali. Lo studio si conclude con alcune considerazioni circa il ruolo delle aree verdi in ambito urbano e periurbano in ragione della specifica tipologia (componente strutturale) e della presenza di specie vegetali ed animali (componente funzionale).

Survey of Steinernema and Heterorhabditis (Rhabditida: Nematoda) in Southern Italian soils

The occurrence of Steinernematid and Heterorhabditid entomopathogenic nematodes was pointed out in samples of soil collected from cultivated and uncultivated habitats in Southern Italy. Nematodes were isolated from samples of soil by “baiting” with larvae of Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Galleriidae). Entomopathogenic nematodes were obtained from 26 (13.82%) of 188 soil samples collected: Steinernema was located in 16 sites (8.51%), Heterorhabditis in 10 sites (5.32%). The Steinernema strains were identified as S. feltiae (Filipjev, 1934) (50%), S. anomali (Kozodoi, 1984) (25%) and as S. affinis (Bovien, 1937) (25%). The Heterorhabditis strains were identified as H. bacteriophora Poinar, 1976. This is the first report of S. anomali and S. affinis in Italy; the presence of S. anomali in the soil of salt pan borders with 3,550 mg of Cl- /100 g of soil is extremely interesting. Key words: Entomopathogenic nematodes, occurrence, Steinernema feltiae, S. anomali, S. affinis, Heterorhabditis bacteriophora. INDAGINI SU STEINERNEMA E HETERORHABDITIS (RHABDITIDA: NEMATODA) NEI TERRENI DELL’ITALIA MERIDIONALE E stata effettuata una indagine per valutare la presenza e la distribuzione di nematodi entomopatogeni (Steinernema ed Heterorhabditis) in campioni di terreno provenienti da diversi habitat dell’Italia meridionale. I nematodi sono stati estratti dai campioni di terreno utilizzando larve di Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Galleriidae), come insetto esca. La presenza di nematodi entomopatogeni e stata accertata in 26 campioni (13,82%) su 188 esaminati: gli Steinernema sono stati rinvenuti in 16 campioni (8,51%), Heterorhabditis in 10 (5,32%). Tra gli isolati di Steinernema sono state identificate 3 specie: S. feltiae Filipjev, 1934 (=S. bibionis) (Bovien, 1937) (50%), S. anomali (Kozodoi, 1984) (25%) e S. affinis (Bovien, 1937) (25%). I ceppi di Heterorhabditis sono risultati appartenere alla specie H. bacteriophora Poinar, 1976. La presenza di S. anomali e S. affinis viene segnalata per la prima volta in Italia. Di particolare interesse e il ritrovamento di un isolato di S. anomali in un terreno con Cl- /100 g di 3.550 mg. Parole chiave: nematodi entomopatogeni, distribuzione, Steinernema feltiae, S. anomali, S. affi- nis, Heterorhabditis bacteriophora.

L'AVIFAUNA COME INDICATORE DI BIODIVERSITÀ IN AMBITO URBANO: APPLICAZIONE IN AREE VERDI DELLA CITTÀ DI BARI

Negli ultimi anni e emersa sempre piu l’importanza delle aree verdi urbane per la conservazione della biodiversita, sebbene questa risulti assai variabile in funzione della struttura intrinseca dell’area verde, e del contesto paesaggistico in cui e immersa. Utilizzando struttura e composizione specifica dei popolamenti di uccelli, che vengono considerati buoni indicatori di biodiversita complessiva, abbiamo analizzato tre aree verdi urbane e periurbane della citta di Bari. Le tre aree sono assai diverse tra loro: i Giardini di Piazza Umberto sono l’unico giardino storico centrale della citta, il Parco 2 Giugno e invece situato vicino ai margini dell’area urbana, ed e di recente istituzione, infine Lama Balice e un’area a vegetazione spontanea mediterranea, situata in area periurbana. I censimenti di uccelli, svolti con due metodi complementari (punti di ascolto e metodo McKinnon) standardizzati, hanno permesso di confrontare correttamente le tre situazioni. La situazione registrata nelle tre aree appare ben delineata: passando dall’area piu periferica verso il centro si assiste a una drastica riduzione della biodiversita, misurata secondo tutte e tre le sue componenti (alfa, beta e gamma). Questa riduzione pare dipendere, oltre che dalla frammentazione e dall’isolamento delle due aree piu centrali, anche da fattori agenti a scala vasta; tra questi soprattutto la scarsita di specie ornitiche forestali che caratterizza tutta l’area barese, e pugliese in generale.

Indagini sui nematodi entomopatogeni (Rhabditida: Steinernematidae e Heterorhabditidae) in pinete e querceti dell’Italia meridionale

OCCURRENCE OF ENTOMOPATHOGENIC NEMATODES (RHABDITIDA: STEIENERNEMATIDAE AND HETERORHABDITIDAE) IN PINE AND OAK WOODS IN SOUTHERN ITALY. Entomopathogenic nematodes (Steinernematidae and Heterorhabditidae) were isolated from southern italian wood soils using the Galleria mellonella baiting technique. Six % of pine woods and 15.5% of oak woods were positive for the presence of nematodes. Steinernema feltiae (Filipjev, 1934) was the most common species reaching 47% of the total. S. feltiae, S. arenarium (= anomali) Artyukhovsky, 1967 and Heterorhabditis bacteriophora Poinar 1976 were the species collected in pine woods; S. feltiae and S. affine (Bovien, 1937) in oak woods. The presence of S. arenarium seems to depend on the soil structure since it was recovered from pine wood sand soils with alcaline pH in the provinces of Taranto, Lecce and Matera. S. affine was the most common species in silty loam and clay loam soils with neutral and alcaline pH and rich of organic content. This species seems to prefer oak soils as widely confirmed by its recovery in Puglia, Basilicata and Calabria regions. The distribution of S. affine comprises in addition to north Europe also the south Europe and southern Italy in particular. The confirmation of S. arenarium (= anomali) in costal soils of pine woods is of remarkable importance; in fact, the recentely recovered species also from orchards of southern Italy have been known only in central Russia and Spain. Key words: Steinernema feltiae, S. affine, S. arenarium (= anomali), Heterorhabditis bacteriophora, Mediterranean areas, soil. Nematodi entomopatogeni (Steinernematidae e Heterorhabditidae) sono stati isolati dai terreni di boschi dell’Italia meridionale utilizzando larve di Galleria mellonella come insetto esca. La presenza dei nematodi e stata accertata nel 6% delle pinete e nel 15,5% dei querceti. S. feltiae (Filipjev, 1934) e risultata la specie piu comune costituendo il 47% del totale dei nematodi rinvenuti. Nelle pinete sono stati individuati Steinernema feltiae, S. arenarium (= anomali) Artyukhovsky, 1967 e Heterorhabditis bacteriophora Poinar 1976. Nei querceti sono stati rinvenuti S. feltiae e S. affine (Bovien, 1937). La presenza di S. arenarium parrebbe essere dipendente dalla struttura del terreno, infatti e stata rinvenuta solo nelle pinete con suolo sabbioso e pH alcalino nelle provincie di Taranto, Lecce e Matera. S. affine e risultata la specie piu comune in terreni franco-limosi e franco-argillosi a pH neutro o alcalino, ricchi di sostanza organica. La specie sembra avere una spiccata preferenza per i querceti, come ampiamente confermato dai rinvenimenti in Puglia, Basilicata e Calabria. L’areale di diffusione di S. affine oltre al nord Europa include quindi anche l’Europa meridionale e piu particolamente l’Italia meridionale. Di notevole importanza e la conferma di S. arenarium (= anomali) anche nelle pinete costiere, infatti, la specie rinvenuta recentemente in aree coltivate del mezzogiorno d’Italia era nota soltanto per la Russia centrale e la Spagna. Parole chiave: Steinernema feltiae, S. affine, S. arenarium (= anomali), Heterorhabditis bacteriophora, Bacino del mediterraneo, terreno.

Impiego di semiochimici nel monitoraggio e nel controllo di Tomicus destruens (Woll.) (Coleoptera: Scolytidae) in Toscana e in Puglia

USE OF SEMIOCHEMICALS TO MONITOR AND CONTROL TOMICUS DESTUENS (WOLL.) (COLEOPTERA: SCOLYTIIDAE) IN THE REGIONS OF TUSCANY AND APULIA Herein are reported the results of experiments carried out in the coastal pine woods of the Tuscany and Apulia regions to control Tomicus destruens adults with attractive or repellent semiochemicals.(-)- a pinene and Ipm were the most attractive for T. destruens, especially in the coastal pine woods. The Pherotech traps caught more adults than did Theysohn traps, particularly in autumn. The repellents used to protect bait logs had a weak action. Key words: pine forests, monoterpenes, Witasek trap, Pherotech trap, Theysohn trap. Sono riportati i risultati di prove, con semiochimici a potere attrattivo o repellente, per il controllo degli adulti dello scolitide Tomicus destruens in pinete litoranee e interne della Toscana e della Puglia. Le sostanze piu attrattive nei riguardi di T. destruens sono state (-)-a- pinene e Ipm, soprattutto nelle pinete litoranee. Le trappole Pherotech hanno catturato un numero maggiore di adulti rispetto alle Theysohn principalmente in autunno. Le sostanze repellenti impiegate hanno evidenziato scarsa attivita di protezione nei riguardi dei tronchetti esca Parole chiave: pinete, monoterpeni, trappola Witasek, trappola Pherotech, trappola Theysohn.

Preliminary attempts to control overwintering populations of Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae) with Steinernema feltiae (Filipjev, 1934) (Nematoda: Steinernematidae)

The Pine processionary caterpillar Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae) is a very dangerous lepidopterous pest spread in all mediterranean area. A preliminary survey was conducted with 3 different strains of Steinernematid entomopathogenic nematodes in the nests of pine processionary caterpillars in a Pinus halepensis Miller reforestation at “Pulicchie” (Gravina in Puglia, 338 m a.s.l.) of Apulia Region (southern Italy). A suspension of 300,000 IJs in 20 ml of gel (Idrosorb SR 2002 - Nigem®) was employed in each nest and mortality recorded every 10 days, for 30 days. The results of this preliminary experiment pointed out: - a real feasibility to reduce the overwintering larval populations injecting gel suspension of Steinernema feltiae IJs in their nests; - the persistence in the nests of IJs for more than 20 days from treatment; - the possibility of a limited number of nematodes to complete their life cycle in the larvae of T. pityocampa; - very low effects on the parasite Phryxe caudata Rond. (Diptera: Tachinidae). Key words: aqueous suspension, gel suspension, IJs injection, nests, Pinus halepensis, reforestation, Phryxe caudata. PROVE PRELIMINARI PER IL CONTROLLO DI POPOLAZIONI SVERNANTI DI Thaumetopoea pityocampa (DEN. ET SCHIFF.) (LEPIDOPTERA: THAUMETOPOEIDAE) CON Steinernema feltiae (FILIPJEV, 1934) (NEMATODA: STEINERNEMATIDAE) Sono state effettuate preliminari prove di controllo con Steinernema feltiae in un rimboschimento di Pinus halepensis Miller gravemente infestato da Thaumetopoea pityocampa (Den. et Schiff.) (Lepidoptera: Thaumetopoeidae). Una sospensione di 300.000 IJs in Idrosorb SR 2002 (Nigem®) e stata iniettata nel gennaio 2000 in ciascun nido contenente larve svernanti del lepidottero. La mortalita e stata verificata ogni 10 giorni, per 30 giorni. I risultati hanno evidenziato: - la capacita di S. feltiae di ridurre le popolazioni larvali svernanti di Thaumetopoea pityocampa tramite iniezioni di gel con IJs nei nidi; - la persistenza di IJs nei nidi per piu di 20 giorni dal trattamento; - la abilita da parte dello Steinernematide di completare il ciclo nelle larve di T. pityocampa, anche se in un numero limitato; - basso livello di parassitizzazione nei confronti delle larve di Phryxe caudata Rond. (Diptera: Tachinidae). Parole chiave: sospensione in acqua, sospensione in gel, iniezioni con IJ, nidi, Pinus alepensis, rimboschimento, Phryxe caudata.