Paulo Guilherme Markus Lopes

Antifungal Susceptibilities of Sporothrix albicans, S. brasiliensis, and S. luriei of the S. schenckii Complex Identified in Brazil

ABSTRACT We studied 40 strains of the species complex formerly classified as the single species Sporothrix schenckii to identify new species within this complex and evaluate their antifungal susceptibility profiles. Based on phenotypic tests (ability to grow at 37°C, colony diameters, and pigmentation of the colonies, as well as assimilation of sucrose and raffinose) and molecular assays (amplification of a fragment of the calmodulin gene), here we report the identification of S. albicans, S. brasiliensis, S. luriei, and S. schenckii; two isolates of these species were detected as itraconazole-resistant strains.

Comparison of the susceptibilities of clinical isolates of Candida albicans and Candida dubliniensis to essential oils.

Here, a microdilution technique based on the M27‐A2 protocol (NCCLS, 2002) was employed to compare the susceptibilities of Candida albicans and Candida dubliniensis to essential oils extracted from plants used as spices. The chemical compositions of the essential oils were defined based on the analysis of retention indices obtained by gas chromatography–mass spectroscopy. Taken together, the results showed that the activity of the compounds against the two species was similar.

Sporothrix schenckii COMPLEX: SUSCEPTIBILITIES TO COMBINED ANTIFUNGAL AGENTS AND CHARACTERIZATION OF ENZYMATIC PROFILES

SUMMARY Sporothrix schenckiiwas reclassified as a complex encompassing six cryptic species, which calls for the reassessment of clinical and epidemiological data of these new species. We evaluated the susceptibility of Sporothrix albicans (n = 1) , S. brasiliensis (n = 6) , S. globosa (n = 1), S. mexicana(n = 1) and S. schenckii(n = 36) to terbinafine (TRB) alone and in combination with itraconazole (ITZ), ketoconazole (KTZ), and voriconazole (VRZ) by a checkerboard microdilution method and determined the enzymatic profile of these species with the API-ZYM kit. Most interactions were additive (27.5%, 32.5% and 5%) or indifferent (70%, 50% and 52.5%) for TRB+KTZ, TRB+ITZ and TRB+VRZ, respectively. Antagonisms were observed in 42.5% of isolates for the TRB+VRZ combination. Based on enzymatic profiling, the Sporothrix schenckii strains were categorized into 14 biotypes. Leucine arylamidase (LA) activity was observed only for S. albicans and S. mexicana. The species S. globosaand S. mexicanawere the only species without β-glucosidase (GS) activity. Our results may contribute to a better understanding of virulence and resistance among species of the genus Sporothrixin further studies.

Reavaliação da suscetibilidade de candida a anfotericina B : estudo comparativo com isolados de três hospitais do estado do Rio Grande do Sul

Susceptibility to amphotericin B was compared between isolates of Candida spp that were obtained from candidemia cases as follows: 41 from Hospital Universitario de Santa Maria, 56 from Hospital de Clinicas, Porto Alegre, and 47 from the Santa Casa hospital complex, Porto Alegre. The tests were based on the document M27-A2 from the Clinical Laboratory Standards Institute, but with 20 concentrations of amphotericin B ranging from 0.1 to 2mg/ml. The tests were carried out using RPMI 1640 medium with glucose, antibiotic medium 3 and yeast nitrogen base-dextrose. The antibiotic medium 3 broth generated wide ranges of minimum inhibitory concentrations and minimum fungicidal concentrations in relation to the other agents. The variations in susceptibility between the hospitals were best detected in antibiotic medium 3. The isolates from Hospital Universitario de Santa Maria showed lower susceptibility than did those from the Santa Casa hospital complex, Porto Alegre (p < 0.05). The causes of the susceptibility variations were not assessed but they indicate the need for surveillance regarding the susceptibility to amphotericin B.

INFECÇÕES CAUSADAS POR MALASSEZIA: NOVAS ABORDAGENS

O genero Malassezia compreende fungos leveduriformes lipofilicos e lipodependentes que recentemente sofreram mudancas em sua classificacao taxonomica, com a introducao de quatro novas especies: M. globosa, M. obtusa, M. slooffiae e M. restricta, alem das especies M. furfur, M. pachydermatis e M. sympodialis, anteriormente descritas. Estes fungos estao associados a varios quadros patologicos que incluem infeccoes como a pitiriase versicolor, dermatite seborreica, dermatite atopica, fungemia, entre outros. Estes quadros eram, ate pouco tempo atras, considerados exclusivamente causados pela especie M. furfur. As mudancas na classificacao taxonomica do genero Malassezia levaram a uma reavaliacao dos procedimentos laboratoriais utilizados para a identificacao deste agente etiologico. Entre eles podemos citar o estudo e a caracterizacao morfologica das especies, sua tolerância termica, suas necessidades nutricionais para determinados tipos de acidos graxos, bem como a composicao e as caracteristicas do DNA de cada uma delas.

PERSPECTIVAS SOBRE ATIVIDADES ANTIMICROBIANAS DE COMPOSTOS DERIVADOS 1,2,4-OXADIAZÓLICOS

A emergência de infecções causadas por patógenos multi-resistentes aos protocolos terapêuticos estabelecidos tem conduzido a uma intensa e constante busca por novas drogas antimicrobianas. A resistência tem sido uma realidade nas diferentes etiologias infecciosas, sejam elas virais, bacterianas, fúngicas e até protozoóticas. Em grande parte, isto seria conseqüência de atitudes como prescrições incorretas, dificuldades dos pacientes em aderir ao tratamento por todo período recomendado e também pelo uso indiscriminado de medicamentos antimicrobianos. A identificação e caracterização dos fatores de virulência que auxiliam na patogenicidade dos microrganismos orientam o planejamento, desenvolvimento e produção de novos fármacos que podem ser modelados para um espectro bem específico ou de maior amplitude de atividade. Compostos heterocíclicos têm sido alvo de diversos estudos farmacológicos. Pode-se inferir sobre a existência de uma série ilimitada de diferentes estruturas com inúmeras diferenças em suas propriedades tais como reatividade e estabilidade. Alguns compostos demonstram bons resultados farmacocinéticos e farmacodinâmicos por apresentarem boa resistência à hidrólise e aumentada estabilidade metabólica. Os derivados azólicos destacamse entre os que apresentam atividades antimicrobianas relevantes. Entre os azólicos estudados sugere-se resultados promissores em atividade para os 1,2,4-oxadiazólicos frente a Gram positivos, Gram negativos e fungos leveduriformes 1 . Para obtenção dos compostos descreve-se uma rota de síntese considerada curta e prática, do tipo “one pot”, partindo-se de á-aminoácidos como blocos precursores quirais e benzamidoximas. A reação ocorre na presença de diciclohexilcarbodiimida (DCC) como ativador e dioxano como solvente. Imediatamente a reação é

NÍVEIS BASAIS DE ACETILCOLINESTERASE E BUTIRILCOLINESTERASE EM AGRICULTORES DA REGIÃO DE FREDERICO WESTPHALEN – RS

A elevada utilizacao de agrotoxicos, sem os devidos cuidados, tem contribuido em muito para oaumento das intoxicacoes ocupacionais, sendo hoje, um dos principais problemas de saude publica no meio rural brasileiro. Entre os pesticidas mais utilizados estao os compostos pertencentes acategoria dos organofosforados que sao inibidores da acetilcolinesterase e butirilcolinesterase comvariado grau de toxicidade em seres humanos. Intoxicacoes por esses compostos podem acarretardiversas alteracoes sendo a principal e de maior risco ao homem a alteracao neuropsicologica. Osdados referentes a utilizacao de compostos dessa categoria ainda sao uma realidade extra-oficial;todavia, motivaram a realizacao deste estudo. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar aexposicao dos agricultores da area rural de Frederico Westphalen – RS a agrotoxicos inibidores dascolinesterases, valendo-se de dados nao oficiais quanto ao uso indiscriminado de organofosforadosnessa regiao. As atividades enzimaticas foram avaliadas segundo metodo de Ellman (1961) modificado. Apos a determinacao individual das atividades da butirilcolinesterase plasmaticas eacetilcolinesterase eritrocitaria de 60 agricultores, verificou-se que 15 (25%) agricultores apresentaram valores de butirilcolinesterase abaixo dos valores de referencia obtidos para o grupo controle, aopasso que, todos os agricultores apresentaram valores de acetilcolinesterase inferiores aos valoresde referencia. Estes resultados sao indicadores seguros de uma exposicao e/ou intoxicacao porpesticidas inibidores de colinesterases.