Rolf Kuse

Iron storage in macrophages and endothelial cells. histochemistry, ultrastructure, and clinical significance

Summaryl hour after i. v. infusion of colloidal iron in iron deficient subjects uniform phagosomal iron granules were observed in macrophages and endothelial cells of several organs. 7 to 10 days later transformation into ferritin could be visualized in macrophages only. Now, these cells showed diffuse iron staining of the cytoplasm due to dispersed ferritin molecules. Polymorphous lysosomes contained densely packed particles from still unchanged ferric hydroxide to paracristalline ferritin. The macrophageal iron was mobilizable in few days to several weeks. The uniform lysosomal iron granules of endothelial cells disappeared after 1 to 2 years. Endothelial iron siderosis without previous i.v. iron application was a frequent finding in pernicious anaemia and iron overload of diverse origin.Zusammenfassungl Stunde nach i.v. Infusion kolloidaler EisenprÄparate wurden gleichförmige phagosomale Eisengranula in Makrophagen und Endothelzellen verschiedener Organe gefunden. 7 bis 10 Tage spÄter konnte eine Umwandlung in Ferritin nur in Makrophagen sichtbar gemacht werden. Diese Zellen zeigten nun eine diffuse, durch fein verteiltes Ferritin bedingte EisenfÄrbung des Zytoplasma. Die polymorphen Lysosomen enthielten dicht gelagerte Eisenteilchen von z.T. noch unverÄndertem Ferrihydroxyd bis zu parakristallinem Ferritin. Das Makrophageneisen war in wenigen Tagen bis zu mehreren Wochen mobilisierbar. Die uniformen lysosomalen Eisengranula der Endothelzellen schwanden nach 1 bis 2 Jahren. Eine endotheliale Siderose ohne vorherige i.v. Eisengabe war ein hÄufiger Befund bei perniziöser AnÄmie und Eisenüberladung verschiedener Ätiologie.

Fehlermöglichkeiten der leukozytenzählung durch Verschleppung (carryover) im coulter counter S

ZusammenfassungAn 163 Venenblutproben mit deutlichen Leukozytosen (20 000 bis 172000 Zellen je mm3) lie\en sich Verschleppungen von 400 bis 22 000 Leukozyten bis in die 3. Zählung der nachfolgenden Proben (200 bis 9 300 Zellen/mm3) nachweisen. Auch nach 41 Normalbluten und geringen Leukozytosen (6 700 bis 17 700 Zelen/mm3) wurde bei extremen Leukopenien (<2000 Zellen/mm3) das richtige Ergebnis noch um 500 bis 1000 Zellen überschritten. An vier weiteren Geräten verschiedener Laboratorien waren Zellverschleppungen in unterschiedlichem Ausma\ reproduzierbar. Im Vergleich zu Vollblutproben wurden nur minimale Verschleppungen in nachfolgender isotonischer Salzlösung gefunden. Die ursächlich noch ungeklärte erhebliche Streuung des Verschleppungskoeffizienten zwischen 1,7 und 16,2% (Mittelwert 7,1%) verbot eine rechnerische Fehlerkorrektur. Irrtümlich zu hohe Leukoztenzahlen wurden durch mindestens zwei Wiederholungszählungen sicher vermieden.SummaryIn 163 samples of venous blood with significant leukocytosis (20 000 to 172 000 cells pro mm3) a carroyver of 400 to 22000 leukocytes up to the third count of the following specimens (200 to 9 300 cells/mm3) could be observed. Even after 41 specimens of normal leukocyte range and low leukocytosis (6700 to 17700 cells/mm3) in cases of extreme leukopenias (<200 cells/mm3) the correct result was exceeded by 500 to 1 000 cells. In four additional machines of other laboratories a carryover of different extent could be reproduced. In comparison to samples of venous blood only a very small carryover into subsequent samples of isotonic solution was found. The considerable spreading of the coefficient of variation between 1.7 and 16.2% (arithmetic mean 7.1%) prohibited a mathematical correction of error. Erroneously too high numbers of leukotytes could be absolutely avoided by at least two repeated counts.

[Electronic platelet counting with particular reference to thrombocytopenias (author's transl)].

Platelet counts in platelet-rich plasma without hematocrit dependent correction were performed by following rapid and simple steps: 1. pre-dilution of 20 microliter of whole blood by an isotonic solution 1:25; 2. stabilized low-speed centrifugation with 55 g for 5 minutes; 3. final dilution 1 : 5000; 4. enumeration by use of a TOA platelet counter PL-100 which has been technically improved in comparison to similar machines. Erroneously high results were obtained after a too short or too low centrifugation. As reason for this artifical small pulses due to disturbances of the flow patterns around the aperture (so-called vortex-effect) can be assumed having been caused by large-volumed erythrocytes and leukocytes in the suspension. The routinely used procedure was reliable for all platelet ranges, especially in thrombocytopenias between 100 X 10(9)/l and 25 X 10(9)l. In lower ranges comparisons with visual counts are essential.ZusammenfassungThrombozytenzahlen wurden im plättchenreichen Plasma ohne Hämatokritkorrektur mit folgenden Schritten einfach und schnell ermittelt: 1. 1∶ 25-Vorverdünnung einer 20-μl-Vollblutprobe mit isotoner Lösung; 2. niedertourige stabilisierte Zentrifugation über 5 min bei 55 g; 3. Endverdünnung auf 1∶ 5000; 4. Zählung mit Hilfe eines gegenüber ähnlichen Geräten technisch verbesserten TOA-Thrombozytenzählers PL-100. Fälschlich erhöhte Zahlen wurden bei zu kurzer oder zu niedriger Zentrifugation gefunden. Ursächlich sind Störimpulse infolge Wirbelbildungen in der Umgebung der Meßkapillare anzunehmen (sog. Vortex-Effekt), die von verbliebenen größervolumigen Erythrozyten und Leukozyten in der Suspension hervorgerufen werden. Das routinemäßig angewandte Verfahren hat sich in allen Zählbereichen, insbesondere auch bei Thrombozytopenien zwischen 100 × 109/l und 25 × 109/l bewährt. In niedrigeren Bereichen sind Kontrollzählungen mit der Kammer erforderlich.SummaryPlatelet counts in platelet-rich plasma without hematocrit dependent correction were performed by following rapid and simple steps: l. pre-dilution of 20 μl of whole blood by an isotonic solution 1: 25; 2. stabilized low-speed centrifugation with 55 g for 5 minutes; 3. final dilution 1: 5000; 4. enumeration by use of a TOA platelet counter PL-100 which has been technically improved in comparison to similar machines. Erroneously high results were obtained after a too short or too low centrifugation. As reason for this artificial small pulses due to disturbances of the flow patterns around the aperture (so-called vortex-effect) can be assumed having been caused by large-volumed erythrocytes and leukocytes in the suspension. The routinely used procedure was reliable for all platelet ranges, especially in thrombocytopenias between 100 × 109/l and 25 × 109/l. In lower ranges comparisons with visual counts are essential.

[Stage IIIB and IVB Hodgkin's disease. Response to chemotherapy, relapses, survival rates (author's transl)].

SummaryThirty-two of 71 (45%) stage IIIB and IVB patients up to the age of 60 achieved a complete remission (CR) by initial COPP-chemotherapy. Twelve additional cases were free of symptoms after COPP, but showed persistent disease at postprimary laparotomy or within 3 months after cessation of chemotherapy. Forty-four per cent (n=17) of the initial COPP failures could also be brought to CR by ABVD-chemotherapy or/and radiotherapy within 7 to 51 months. Cases with lymphocytic depletion reached CR in only 31% (n=5/16) in comparison to 80% (n=44/55) of the three other histological subtypes. Without additional consolidation therapy 60% relapsed, but only 11% after adjuvant total-nodal irradiation. An increase of side effects after therapy has not been observed so far. Patients with once attained CR have a survival probability of 93% after nearly 8 years from diagnosis. For the whole stage IIIB/IVB group the values were 85% up to the age of 30 (n=28) and 60% for the age group of 31–60 (n=43). They were clearly higher than in the 1966–1971 patients who showed values of 39% and 41%, respectively. Beyond the age of 60 (n=15) the survival probability of 10% after 3 years in comparison to former 15% revealed no improvement.ZusammenfassungDurch initiale COPP-Theapie ließen sich bei 32 von 71 (45%) Patienten bis zum 60. Lebensjahr (LJ) mit den Stadien IIIB (n=53) und IVB (n=18) Vollremissionen (VR) erzielen. 12 weitere Fälle waren nach COPP zwar symptomenfrei, zeigten aber bei der postprimären explorativen Laparotomie oder innerhalb von drei Monaten nach Therapieende doch noch Krankheitsherde. 44% (n=17) der initialen COPP-Versager konnten durch ABVD oder/und Radiotheapie nach insgesamt 7–51 Monaten ebenfalls in eine VR übergeführt werden. Bei lymphozytenarmer Histologie waren nur in 31% (n=5/16) Vollremissionen gegenüber 80% (n=44/55) bei den anderen drei Subtypen möglich. Ohne Konsolidierungstherapie kam es in knapp 60%, nach adjuvanter totalnodaler Bestrahlung nur in 11% zu Rezidiven. Therapiekomplikationen haben bisher nicht zugenommen. Patienten mit einer eimal erreichten VR (n:49/71=69%) hatten nach knapp 8 Jahren eine Überlebenswahrscheinlichkeit von 93% ab Diagnose. Diese betrug in der Gesamtheit der Stadien IIIB und IVB 85% für Patienten bis zum 30. LJ (n=28) und 60% für das 31.–60. LJ (n=43). Sie lag damit deutlich höher als im Kollektiv der Jahre 1966–1971 mit Werten von 39% bzw. 41% für beide Altersgruppen. Jenseits des 60. LJ (n=15) fand sich mit 10% gegenüber 15% nach 3 Jahren keine Verbesserung der Überlebensraten.

Aufdeckung von Reagenzienfehlern durch interne QualitÄtskontrolle für den Coulter Counter S

ZusammenfassungDurch ein einfaches Kontrollprogramm für den Coulter S lie\en sich zwei Reagen-zienfehler von klinischer Relevanz aufdecken: Zu hohe HÄmatokritwerte infolge einer fehlerhaften Isoton®-Charge gingen mit einer MCHC-Erniedrigung nativer Blutproben, nicht aber des stabilisierten 4 C-Blutes® einher. FÄlschlich überhöhte Leukozytenwerte durch ungenügend aufgelöste Riesenthrombozyten und Thrombozytenaggregate lie\en sich auf verÄnderte Lyse-S®-Chargen zurückführen, nachdem Vergleiche im Coulter F mit Zaponin® und in der ZÄhlkammer um bis zu 10000 Zellen niedrigere Werte ergeben hatten.SummaryBy a simple program of quality control for the Coulter counter model S two deficient reagents could be detected. To high values of PCV associated with a decrease of MCHC were caused by a faulty Isoton® batch. This error was revealed by native blood samples but not by the stabilized 4 C® standard. Falsely elevated leukocyte counts due to insufficiently lysed giant platelets and platelet aggregates were produced by modified Lyse-S® batches. Comparisons made with a Coulter counter model F using Zaponin® and with a counting chamber yielded values at lower levels.