Rolf Winter

Incidence of bacterial and fungal contamination of donor corneas preserved by organ culture.

We reviewed the results of sterility testing from culture media of 1,134 donor corneas preserved by organ culture at 37°C in our eye bank. All corneas were stored in minimal essential medium containing 2% fetal calf serum, 0.1 mg/ml penicillin G, 0.1 mg/ml streptomycin, and 2.5 u.g/ ml amphotericin B. After removal of ocular adnexal tissue, donor globes were rinsed with sterile saline solution, incubated in 3% polyvinylpyrrolidone-iodine solution for 3-5 min, and subsequently rinsed again with sterile saline solution. Samples for microbiological evaluation were obtained from the initial evaluation medium, at every medium change (every 10 days), and from the medium used for deswelling of the individual cornea 1 day before transplantation. Incidence of contamination was 0.53% (6 of 1,134 corneas). Three corneas were contaminated by Micrococcus species, three by fungi. We conclude from our study that a combination of rinsing donor globes with sterile saline solution, the initial use of a disinfectant, and the employment of penicillin/streptomycin and amphotericin B in the organ culture medium, which have been commonly used in cell culture for decades, result in a low incidence of bacterial and fungal contamination of corneas preserved by organ culture.

Impact of transportation on short-term preserved corneas preserved in Optisol-GS, Likorol, Likorol-DX, and MK-medium.

Purpose. To investigate the impact of transportation, simulated under laboratory conditions, on the corneal endothelium preserved by Optisol-GS, Likorol-DX, Likorol, and MK-Medium. Methods. Three hundred twenty corneas from freshly slaughtered pigs were stored in Optisol-GS, Likorol-DX, Likorol, and MK-Medium for 1, 3, 6, or 10 days. After short-term preservation, the transportation was simulated on a laboratory shaker at 4°C with an acceleration of 0–100 km/h in 16 seconds for 5 hours. Mate corneas served as the control. Corneal endothelial cell density was determined at the time of dissection, directly before the experiment, and after subsequent organ culture. Results. A significant cell loss induced by transportation simulation was not observed in any experimental group. Preservation in MK-Medium starting at 3 days of short-term preservation resulted in a significant cell loss. Storage for up to 6 days in Optisol-GS, Likorol-DX, and Likorol did not result in a significant decrease in cell density. Conclusion. Short-term preserved corneas can be routinely distributed without a reevaluation, if the tissue is preserved for a shorter time as recommended by the manufacturers.

Farbsinnstörungen bei Patienten mit einer arteriellen Hypertonie

ZusammenfassungFragestellung. Inwieweit wird die Farbwahrnehmung bei Patienten mit einer arteriellen Hypertonie beeinflusst? Patienten und Methoden. Untersucht wurden 35 Patienten (w:m=14:21, Durchschnittsalter 52±11 Jahre) mit einer arteriellen Hypertonie ohne Endorganschäden im Vergleich zu eine Kontrollgruppe mit 62 Gesunden (w:m=34:28, Durchschnittsalter 49±9 Jahre). Als Ausschlusskriterien galten Augen- und Allgemeinerkrankungen. Neben dem ophthalmologischen Status (Sehschärfe, Refraktion, Augeninnendruck, Cup/ Disc-Ratio, Fundus) wurde der Farbtest Roth 28-hue (E) desaturiert angewendet. Dieser wurde monokular unter folgenden Standardbedingungen durchgeführt: Hintergrund war ein schwarzer Karton, die Beleuchtung bestand aus 2 Fluoreszenzlampen (Osram L36W/12 LDL Daylight). Die Lichtstärke betrug 2.000 lux. Ergebnisse. Die ophthalmologischen Untersuchungen waren bei den Patienten mit einer arteriellen Hypertonie wie auch bei den Kontrollen unauffällig. Im Farbtest Roth 28-hue (E) desaturiert zeigten sich bei den Patienten deutliche Farbsinnstörungen (Fehlersumme = Median ± mittlere absolute Abweichung: 150±56, Mann-Withney-U-Test: p<0,001) im Vergleich zu den Kontrollen (Fehlersumme = 72±53,4). Eine spezielle Farbachsenlage konnte nicht nachgewiesen werden. Diskussion. Trotz der unauffälligen ophthalmologischen Untersuchungen zeigten sich bei den Patienten mit einer arteriellen Hypertonie deutliche Farbsinnstörungen. Gerade im Hinblick auf Farbsinnuntersuchungen bei ophthalmologischen Erkrankungen (z.B. dem Glaukom) sind derartige Einflüsse bei der Interpretation zu berücksichtigen.AbstractPurpose. In view of the generally impaired vascular condition in patients with arterial hypertension, we were interested in their colour perception. Methods. Patients (n=35, f:m=14:21, mean age 52±11 years) with arterial hypertension without damage in end-organs and normal subjects (n=62, :m=28:34, mean age 49±9 years) as a control group were included in this study. Exclusion criteria were other systemic or ophthalmological diseases. In addition to the ophthalmological examinations (visual acuity, refraction, intraocular pressure, slit lamp and fundus examination) the colour vision was tested by the colour arrangement test Roth 28-hue (E) desaturated under standard conditions: The background used was black cardboard, illuminated by two Osram fluorescent lamps (L36 W/12LDL Daylight) providing 2000 lux at the test table. Results. The ophthalmological examinations in the patients and in the control group were normal. The patients with arterial hypertension had a significantly higher mean error score (median ± mean absolute deviation 150±56, Mann-Witney U-test: p<0,001) in the colour arrangement test than the control group (median ± mean absolute deviation 72±53.4). A particular colour axis (blue-yellow or red-green) was not found. Conclusion. Although the ophthalmological examinations were normal we found a disturbed colour vision in patients with arterial hypertension. This has to be taken into account in colour vision testing to avoid diagnostic interferences between specifially ocular diseases (e.g. glaucoma) and arterial hypertension.

Risikofaktorenanalyse und Therapievergleich zwischen Heparin und Hämodilution bei Zentralarterienverschluss des Auges

ZusammenfassungFür retinale Arterienverschlüsse gibt es keine Standardtherapie. Ziel dieser Studie war es, Daten über die Visusentwicklung unter Heparin mit Ergebnissen unter Hämodilution zu vergleichen.Für den Zeitraum von 1991 bis 2000 wurden retrospektiv Daten bei 139 Patienten mit retinalen Arterienverschlüssen untersucht. Die festgestellten Risikofaktoren wurden aufgelistet. Bei 38 Patienten mit Zentralarterienverschluss wurde ein Therapievergleich durchgeführt. 23 Patienten erhielten Heparin und 15 eine Hämodilution. Patienten mit retinalen Arterienverschlüssen wiesen zahlreiche vaskuläre Risikofaktoren auf. Unter keiner Therapie kam es zu schwerwiegenden Komplikationen. Unter Heparin zeigte sich bei 5 von 23 Patienten (21,7%), unter Hämodilution bei 6 von 15 Patienten (40%) ein Visusanstieg um 3 oder mehr Visusstufen. Die Unterschiede waren jedoch nicht signikant. Der Spontanverlauf der Erkrankung ist aus ethischen Gründen unbekannt. Wegen zahlreicher vaskulärer Risikofaktoren ist deshalb für viele Patienten eine angepasste Therapie im Rahmen kontrollierter Studien zu empfehlen.AbstractNo standards are available for the treatment of central retinal artery occlusion (CRAO). The aim of this study was to compare data about visual acuity development under heparin treatment with those from hemodilution.Data on 139 patients suffering from CRAO between 1991 and 2000 were examined retrospectively. Risk factors were listed. Therapies were compared in 38 of these patients, 23 of whom received full heparinization and 15 of whom received hemodilution. Many risk factors were shown. Neither therapy showed serious complications. Visual acuity improved significantly, by three or more lines, in five of 23 patients (21.7%) under full heparinization and six of 15 patients (40%) receiving hemodilution. Differences were not significant. For ethical reasons, the normal cause of disease in these patients cannot be studied and is still unknown. Because of many vascular risk factors, we recommend adapted therapies. Treatments should be examined in controlled studies.

Subretinal Lavage: A Technique of Continuous Subretinal Irrigation for Removal of Traumatic Submacular Hemorrhage

A 12-year-old female patient suffered a horse kick to her face, resulting in various orbital fractures and blunt eye trauma. Upon ophthalmoscopy, an extensive subretinal hemorrhage was revealed under the macula, reaching to both vascular arcades. The visual acuity was 20/300. Five days after the accident, the patient was referred for vitreoretinal surgery. After standard vitrectomy, a small retinotomy was made at the temporal raphe. A second infusion was directed under the retina, thereby separating it carefully from the clot. The blot clot was exposed to tissue plasminogen activator (0.012 mg/0.1 ml) for 30 min. The liquefied blood was then washed out by continuous irrigation with buffered saline solution. The procedure was terminated by gas tamponade. Eleven days after surgery, the patients vision had returned to 20/60. At 10 months after surgery, her vision was 20/30. No new hemorrhage was observed, nor did any fibrovascular proliferation occur from choroidal rupture. Continuous infusion instead of use of syringes for irrigation reduces the frequency of instrument passages through the pars plana and vitreous base, which may help reduce the risk of iatrogenic ora lesions. Surgery should be performed within 7 days to avoid toxic or metabolic retinal damage.

Entwicklung der Endothelzelldichte bei Verwendung von frischem und organkultiviertem Gewebe 5 Jahre nach perforierender Keratoplastik

Viele klinische Studien befaßten sich mit der Reduktion der Endothelzelldichte nach perforierender Keratoplastik bei Verwendung unterschiedlicher Konservierungsmethoden des Spendergewebes. Problematisch war hier meist die Deutung der Ergebnisse, da trotz seit langem bekanntem dynamischem Zellverlust sehr variable Nachuntersuchungsintervalle zusammengefaßt wurden. Das Ziel dieser Untersuchung war es, unter Berücksichtigung 2er verschiedener Konservierungstechniken eine langfristige Endothelbefundung zu gleichen Terminen durchzuführen.54 Patienten wurden 5,2 (±0,5) bzw. 4,9 (±0,6) Jahre nach perforierender Keratoplastik nachuntersucht. 24 Patienten hatten eine frisch vom Bulbus präparierte, 30 Patienten eine organkultivierte Hornhaut erhalten. Alle Hornhäute waren im Nachbeobachtungszeitraum klar gelieben.Die Nachbeobachtungszeit unterschied sich nicht signifikant (p = 0,26). Unterschieden sich sowohl Post-mortem-Zeit (p<0,001) zugunsten frisch transplantierten Gewebes und Zelldichte vor der Operation (p<0,001) zugunsten organkultivierten Gewebes signifikant, konnten solche Differenzen für die Variablen Spenderalter (p = 0,64) und Patientenalter (p = 0,46) nicht gefunden werden. Die durchschnittliche Endothelzelldichte war nach 5 Jahren mit 1070 (±499) Zellen/mm2 bei Verwendung frisch transplantierten Gewebes und 1095 (±497) Zellen/mm2 bei Verwendung organkultivierter Hornhäute nicht signifikant verschieden (p = 0,82).Bei Verwendung der Variablen Endothelzelldichte ließen sich 5 Jahre nach perforierender Keratoplastik keine Unterschiede zwischen beiden Konservierungstechniken feststellen. Wir bevorzugen die Organkultur, da neben der deutlich geringeren Inzidenz primären Transplantatversagens auch Spendergewebe mit längeren Post-mortem-Zeiten in einem planbaren Eingriff eingesetzt werden kann.Many clinical studies have been performed investigating corneal endothelial cell loss after penetrating keratoplasty using different preservation methods. Most studies, however, included variable follow-up intervals, neglecting the dynamic cell loss over the course of time. The aim of this study was to perform endothelial cell evaluation 5 years after penetrating keratoplasty using two different storage methods.Fifty-four patients were examined 5.2 (±0.5) or 4.9 (±0.6) years after surgery. Twenty-four patients had received a cornea stored in a moist chamber, 30 patients a cornea preserved by organ culture. All corneas had remained clear in the follow-up period.The follow-up periods did not differ significantly (P = 0.26). The post-mortem time of moist-chamber-stored tissue was significantly lower (P<0.001), endothelial cell density significantly higher (P<0.001) in organ-culture-preserved corneas. Donor age (P = 0.64) and patient age (P = 0.046) did not differ significantly. Average corneal endothelial cell density was 1070 (±499) cells/mm2 using moist chamber stored and 1095 (±497) cells/mm2 using organ-culture-preserved tissue (P = 0.82).Five years after penetrating keratoplasty, we were not able to find significant differences in corneal endothelial cell density using either moist chamber or organ-culture-preserved corneas. We prefer to use organ culture since there is a lower incidence of primary graft failure, tissue with longer post-mortem times can be used, and surgery can be scheduled.

Temporäre Keratoprothese, Vitrektomie und Autokeratoplastik zur Endophthalmitisbehandlung

Bakterielle Endophthalmitiden stellen Notfallindikationen zur Vitrektomie dar, da sich die visuelle Prognose durch Einwirkung bakterieller und leukozytärer Noxen auf die Netzhaut stetig verschlechtert. Hornhauttrübungen behindern häufig den erforderlichen Funduseinblick. Geeignete Spenderhornhäute stehen in der Kürze der Zeit oft nicht zur Verfügung. Anhand eines klinischen Beispiels stellen wir eine chirurgische Technik vor, deren wesentliche Schritte im Einsetzen einer temporären Keratoprothese, einer Pars-plana-Vitrektomie und einer Autokeratoplastik bestehen. Die getrübte Hornhaut wurde trepaniert und vorübergehend in Kulturmedium aufbewahrt. Eine temporäre Keratoprothese wurde eingesetzt und eine Pars-plana-Vitrektomie durchgeführt. Abschließend wurde die eigene Hornhaut des Patienten wieder reimplantiert. Vor dem Verschluß der Sklerotomien wurden jeweils 0,4 mg Tobramycin, 0,2 mg Gentamicin und 0,4 mg Dexamethason in den Glaskörperraum injiziert. Nach Abklingen der Endophthalmitis klarte die Hornhaut genügend auf, um eine biomikroskopische Beurteilung des Auges zu ermöglichen. Wir meinen, daß bei schweren bakteriellen Endophthalmitiden mit erheblich getrübter Hornhaut die Transplantation einer Spenderhornhaut in 2. Sitzung erfolgen sollte, da die Transplantatprognose in einem nicht infizierten Auge günstiger ist und eine unnötige Sensibilisierung des Empfängers vermieden wird.

PIC-Syndrom – Visusverbesserung nach Anti-VEGF- und photodynamischer Therapie

ZusammenfassungBeim „punctate inner choriodopathy“ (PIC)-Syndrom handelt sich um eine seltene Erkrankung, deren Ursprung entzündlicher Genese zu sein scheint. Die Behandlung richtet sich nach den Symptomen und dem Vorhandensein einer choroidalen Neovaskularisation (CNV). Im Falle einer CNV geht der „Trend“ zur Anti-VEGF-Therapie. Eine orale Therapie mit Steroiden kann initial versucht werden.AbstractPunctate inner choroidopathy (PIC) is a rare disease which seems to have an inflammatory origin. Treatment is symptom-oriented and the development of choroidal neovascularization (CNV). If CNV is present the trend is towards the use of anti-VEGF (vascular endothelial growth factor) therapy. Oral therapy with steroids should be initially attempted.Punctate inner choroidopathy (PIC) is a rare disease which seems to have an inflammatory origin. Treatment is symptom-oriented and the development of choroidal neovascularization (CNV). If CNV is present the trend is towards the use of anti-VEGF (vascular endothelial growth factor) therapy. Oral therapy with steroids should be initially attempted.

Entwicklung der Endothelzelldichte von Hornhäuten mit langen Post-Mortem-Zeiten bei Kurzzeitkonservierung mit Optisol

ZusammenfassungFür die Bereitstellung von Spendergewebe für die perforierende Keratoplastik ist die Kurzzeitkultur eine Methode, das Gewebe mit speziellen Kulturmedien und geringem apparativen Aufwand zu konservieren. Es wird jedoch empfohlen, nur Hornhäute mit einer post-mortem Zeit von weniger als 6 Stunden zu verwenden. In einer experimentellen Studie wurde diese Empfehlung überprüft. Bulbi frisch geschlachteter Schweine wurden bei 4°C oder 21°C 6, 12, 24, 36, 48, 72, 96 und 120 Stunden in der feuchten Kammer gelagert. Dann wurden Korneoskleralscheiben präpariert und diese 3 Tage bei 4°C in Optisol konserviert. Um einen etwaigen latenten Zellschaden auszuschließen, erfolgte anschließend eine zweitägige Organkultur bei 37°C in MEM-Medium mit 2% fötalen Kälberserum. Nach Färbung mit Trypanblau und Alizarinrot wurde der Befund fotodokumentiert und die endotheliale Zelldichte mit Hilfe computerunterstützter Morphometrie bestimmt. Die statistische Auswertung erfolgte durch eine Varianzanalyse. Verglichen mit der Endothelzelldichte eines Vergleichkollektivs frischer Schweinehornhäute (3733 ± 291 Zellen/mm2) fand sich in der bei 4°C vor Konservierung gelagerten Gruppe eine signifikante Abnahme erst nach 96stündiger Lagerung in der feuchten Kammer (p = 0,025). Hornhäute, die vor Konservierung bei 21°C in der feuchten Kammer aufbewahrt worden waren, wiesen nach 48 stündiger Lagerung den gleichen Befund auf (p < 0,001). Wir schließen aus diesen experimentellen Ergebnissen, daß die Empfehlung für die Kurzzeitkonservierung von Spenderhornhäuten nur Gewebe mit kurzen post-mortem Zeiten zu verwenden, große Mengen potentiell für den klinischen Einsatz verfügbaren Spendergewebes ausschließt.SummaryShort-term storage is a simple, effective technique for preservation of donor tissue for penetrating keratoplasty. It is recommended however, not to use tissue with post-mortem times exceeding six hours. The purpose or our study was to investigate whether this recommendation could be verified in an experimental study. Eye balls of freshly slaughtered pigs were stored for 6, 12, 24, 36, 48, 72, 96, and 120 hours at 4°C or 21°C in a moist chamber. After dissection of corneoscleral rims the tissue was stored for three days in Optisol at 4°C. Subsequently, corneas were stored in organ culture for two days at 37°C in order to exclude latent cell damage. Evaluation was performed by trypan blue-alizarin red staining. Corneal endothelial cell density was determined by computer assisted morphometry. Statistical calculation was performed by oneway analysis of variance. Corneas, that had been stored in a moist chamber at 4°C before short-term storage displayed a significant decrease in endothelial cell density (p = 0.025) after 96 hours compared to fresh tissue. Corneas stored at 21°C before short-term storage showed significantly reduced cell counts after 48 hours (p = 0.001). We conclude from these experiments the recommendation to use only tissue with short post-mortem times may exclude large amounts of potentially feasable corneas for penetrating keratoplasty.

PIC-Syndrom – Visusverbesserung nach Anti-VEGF- und photodynamischer Therapie@@@Punctate inner choroidopathy – Improvement in vision after anti-VEGF and photodynamic therapy: Eine 18-monatige Verlaufskontrolle@@@An 18-month follow-up control

ZusammenfassungBeim „punctate inner choriodopathy“ (PIC)-Syndrom handelt sich um eine seltene Erkrankung, deren Ursprung entzündlicher Genese zu sein scheint. Die Behandlung richtet sich nach den Symptomen und dem Vorhandensein einer choroidalen Neovaskularisation (CNV). Im Falle einer CNV geht der „Trend“ zur Anti-VEGF-Therapie. Eine orale Therapie mit Steroiden kann initial versucht werden.AbstractPunctate inner choroidopathy (PIC) is a rare disease which seems to have an inflammatory origin. Treatment is symptom-oriented and the development of choroidal neovascularization (CNV). If CNV is present the trend is towards the use of anti-VEGF (vascular endothelial growth factor) therapy. Oral therapy with steroids should be initially attempted.Punctate inner choroidopathy (PIC) is a rare disease which seems to have an inflammatory origin. Treatment is symptom-oriented and the development of choroidal neovascularization (CNV). If CNV is present the trend is towards the use of anti-VEGF (vascular endothelial growth factor) therapy. Oral therapy with steroids should be initially attempted.