Zlata Štefanac

Untersuchung der eiweißspindeln des kakteen-X-Virus mit fluoreszierenden Antikörpern

AbstraktObwohl auf Grund vieler Untersuchungen vermutet werden konnte, daß die sog. Kakteen-Eiweißspindeln, d. h. die ZelleinschlÜsse des Kakteen-X-Virus (CaXV), aus zahlreichen verlängerten Partikeln des OaXV zusammengesetzt sind, war das dennoch bis jetzt noch nicht bewiesen. Deshalb versuchten wir im Laufe dieser Untersuchungen mittels der fluoreszierenden Antikörper festzustellen, ob die Eiweißspindeln wirklich Aggregate von Viruspartikeln darstellen.Bei dieser Untersuchung wurde die sog. indirekte Methode angewandt. Dabei haben wir zuerst die spindelhaltigen Zellen mit dem durch Immunisierung der Kaninchen hergestellten homologen Serum gegen CaXV behandelt, und erst nachher dieselben Zellen in eine Lösung von fluoreszierenden Antikörpern gegen das Kaninohen-γ-Globulin eingelegt. Nach dieser Behandlung leuchteten die Eiweißspindeln im Fluoreszenzmikroskop kräftig gelbrÜn (Fluoresce-inisiothiocyanat). Diese Fluoreszenz bewies uns, daß die positive Reaktion eingetreten ist und daß die Eiweißspindeln aus Viruspartikeln aufgebaut sind. Mehrere Kontrollversuche haben die Genauigkeit unserer Grundversuche bestätigt.AbstractAćkoliv na zá kladĚ mnoha pokusů se př edpokládalo, že tzv. bÍlkovinná vřetena v buňkách tzn. bunĚćné inkluse X-viru kaktusů (Ca XV), jsou složena z četních prodloužených části Ca XV, přesto to dosud nebylo proká zá no. Proto jsme se pokusili pomocÍ fluoreskujÍcÍch protilátek doká žat, že bilkovinná vřetena jsou skutečnĚ agregáty virových částic.V tĚto práci jsme pouzili tzv. nepřÍmé metody. Nejprve jsme pů sobili na buňky obsahujÍci tato vřetena homologiokým antisé rem proti Ca XV, zÍskanym imunizacÍ králÍků a teprve potom jsme buňky vložili do roztoku fluoreskujicÍch protilátek proti králicimu γglobulinu. BÍlkovinná vřetena svitila potom ve fluorescenčnÍm mikroskopu silnĚ žlutozelenĚ (bylopoužito fluoresceinisothiocyaná tu). Tato fluorescence ná m uká zala, že nastala pozitivnÍ reakce a že bÍlkovianá vřetena jsou složena z virových částic. Četné kontrolnÍ pokusy potvrdily nአzákladnÍ pokus.AbstractНа основе многочисл енных наблюдений выс казывалось предполо лкение, что бе.бковые веретена в клетках кактусов являютсяви русными включениям и-агрегатами про-долженных частиц Х-ви руса кактусов. Целъю дапной работы было доказатъ ато предположение и цок азатъ, что белковые ве ретена кактусов сост оят пз очень большого количества Х-ввруса кактусов. Цри исслед овании был применен непрямои метод. Спер-ва действовали гомол огичной антисыворот кой, приготовленной на кро.иках, а потом флюоресцирующимиан тителами против гамм а-глобулина кроликов. После такои об-работки белковые ве ретена флюоресциров али желто-зеленым цве том. Таким образом установлено, Что белк овые веретена действ ителъно построены из вирусных ластиц. Многочисленные конт ролъные опыты подтве рдили сделанное закл ючние.