Com o avanço da ciência e da tecnologia, os cientistas ganharam oportunidades sem precedentes no campo da exploração do mundo microscópico. Como uma ferramenta revolucionária, a tecnologia de microdissecção por captura a laser (LCM) não apenas melhora a precisão da pesquisa celular, mas também expande enormemente os limites da biomedicina e da pesquisa científica básica.
A microdissecção por captura a laser é um método de isolar células específicas de áreas microscópicas de tecido, especialmente quando precisamos extrair células puras de amostras complexas.
O princípio básico desta tecnologia é usar lasers para cortar com precisão as células de interesse e isolá-las de maneira altamente confiável, preservando assim as propriedades estruturais e químicas de outras células vizinhas. O LCM pode ser usado para realizar uma variedade de aplicações downstream, incluindo genotipagem de DNA, perfil de transcrição de RNA e descoberta proteômica, que pode desempenhar um papel fundamental na ciência básica e na pesquisa clínica.
O tempo total para esse processo é geralmente entre uma hora e uma hora e meia, tempo suficiente para concluir cortes e análises de alta precisão.
Na operação real, primeiro você precisa observar as seções de tecido sob um microscópio e selecionar as células a serem extraídas. Através do corte a laser, as células designadas são separadas com precisão sem causar qualquer dano às células vizinhas. As tecnologias mais recentes expandiram ainda mais esse processo, como a microdissecção sem contato e a extração de células por meio de transferência direta induzida por laser (LIFT), que permite aos cientistas operar em um nível mais granular.
O processo de microdissecção por captura a laser pode ser resumido em algumas etapas simples. Primeiro, um laser é combinado com uma amostra de tecido através de um microscópio, seguido de um corte preciso com o laser. Esses cortes podem ser realizados por adsorção eletrostática ou utilizando tecnologias de substrato específicas para evitar danos às células-alvo. E muitas tecnologias dependem de uma combinação de lasers ultravioleta e infravermelho para obter resultados ideais.
A tecnologia existente garante que os cortes a laser tenham normalmente menos de 1 mícron de largura, o que significa que as células-alvo não são afetadas pelo feixe de laser.
O que há de tão avançado nesta tecnologia é que ela permite a análise em tempo real de células intactas usando uma variedade de métodos de imagem, incluindo microscopia de fluorescência e microscopia de campo claro, o que permite aos cientistas obter imagens nítidas de suas amostras. Além disso, a tecnologia de microdissecção por captura a laser também pode operar em células vivas sem causar danos à atividade celular, o que é crucial para pesquisas em medicina regenerativa e terapia celular.
Com o desenvolvimento da tecnologia de microcorte por captura a laser, seu escopo de aplicação continua a se expandir. Da pesquisa básica em citologia à análise de biomarcadores em estudos clínicos, o LCM demonstrou grande potencial. Os pesquisadores podem extrair com precisão células tumorais do tecido canceroso, mantendo a integridade das células normais circundantes, o que oferece a possibilidade de medicina personalizada.
Além da extração celular, a tecnologia LCM também pode ser usada para extrair amostras sem estruturas celulares, como placas amilóides, o que também é particularmente importante para o estudo de doenças neurodegenerativas.
O processo de microdissecção por captura a laser não altera a morfologia e as propriedades químicas das células selecionadas, o que é uma das principais razões pelas quais esta tecnologia é tão popular.
Atualmente, a tecnologia de microdissecção por captura a laser pode operar em uma variedade de amostras de tecido, incluindo esfregaços de sangue, culturas de células, seções fixas de tecido sólido e até mesmo tecido de arquivo congelado e embebido em parafina. Isto significa que o LCM pode exercer uma influência importante em diferentes campos de investigação e trazer novas oportunidades para futuras investigações científicas.
Embora a tecnologia de microdissecção por captura a laser tenha feito progressos significativos, vários desafios permanecem no futuro. Mais pesquisas e melhorias ainda são necessárias em termos de seleção precisa de células, prevenção de contaminação cruzada e manuseio de células após a extração. Além disso, à medida que a tecnologia continua a evoluir, também precisamos de considerar como estender esta tecnologia a uma gama mais ampla de cenários de aplicação.
Em um campo científico em rápida mudança, a tecnologia de microdissecção por captura a laser abriu, sem dúvida, novas portas para os pesquisadores e promoveu o progresso da pesquisa em ciências da vida. Como é que os futuros investigadores utilizarão esta tecnologia para fornecer conhecimentos mais profundos para futuras investigações científicas?