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A magia da microdissecção a laser: como selecionar suas células no microscópio?
Na pesquisa biológica moderna, a tecnologia de microdissecção por captura a laser (LCM) se tornou uma ferramenta que não pode ser ignorada. Ele fornece aos cientistas uma maneira de selecionar com precisão células específicas em um microscópio, possibilitando uma variedade de análises moleculares de células individuais. Essa tecnologia não apenas aprofunda nossa compreensão das funções celulares, mas também abre potenciais aplicações na pesquisa de doenças.
Princípios do Microcorte a Laser
A tecnologia de microdissecção a laser permite que pesquisadores observem e selecionem diretamente células de tecido de interesse em um microscópio. A tecnologia usa a capacidade de corte de alta precisão dos lasers para remover células não-alvo circundantes e obter populações de células puras que revelam verdadeiros sinais biológicos. A chave para o LCM é que ele pode dar suporte a uma variedade de aplicações posteriores, incluindo genotipagem de DNA, criação de perfis de transcrições de RNA, geração de bibliotecas de cDNA, proteômica e análise de vias de sinalização.
O tempo de execução de todo o programa é normalmente entre 1 e 1,5 horas.
Processo de Extração
No LCM, um laser é integrado a um microscópio e focado no tecido em uma lâmina. O laser se move em uma trajetória predeterminada pelo usuário, cortando células indesejadas e extraindo células-alvo. Neste processo, a mais recente tecnologia introduziu métodos de microcorte sem contato para evitar a contaminação que pode ser causada pelo contato direto.
Há muitas maneiras de extrair células, como usar superfícies adesivas para aderir à amostra, filme plástico aquecido para segurar a amostra e a mais recente tecnologia de laser sem contato. Todos esses processos se concentram na extração de células sem danificar moléculas como DNA e RNA, aumentando ainda mais sua versatilidade.
Processo de operação
Cortes de tecido são visualizados em um microscópio por meio de uma interface de software, e células ou aglomerados de células são identificados manual ou automaticamente. Atualmente, existem seis técnicas principais para separar células em um microscópio. A maioria dos sistemas usa lasers pulsados ultravioleta para corte direto de tecido ou são usados em conjunto com lasers infravermelhos para aquecer e derreter polímeros adesivos para adesão e separação de células.
Mesmo as células vivas não são danificadas após o corte a laser e podem ser clonadas e recultivadas sob condições apropriadas.
Áreas de aplicação
Como o processo LCM não altera nem danifica a morfologia e as propriedades químicas das amostras coletadas, essa técnica é particularmente eficaz na análise de DNA, RNA e proteínas. Muitos pesquisadores isolaram com sucesso estruturas livres de células, como placas amiloides, usando técnicas de LCM. O LCM pode ser realizado em uma variedade de amostras de tecido, incluindo esfregaços de sangue, preparações citológicas, culturas de células e amostras sólidas.
Estamos em uma era de rápido desenvolvimento nas ciências biológicas, e o potencial e o escopo de aplicação da tecnologia de microdissecção a laser estão em constante expansão, o que fornece novas perspectivas para nossa pesquisa e compreensão de várias doenças. Para onde essa tecnologia levará a biomedicina no futuro?
