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O misterioso mundo da albumina sérica bovina: por que é um" assistente universal "no laboratório?
A albumina sérica bovina (BSA ou "Fração V") é uma albumina sérica de bovinos amplamente utilizada em laboratórios, principalmente como padrão para concentração de proteínas. A "Fração V" no nome da proteína vem da quinta fração extraída no consagrado método de purificação Edwin Cohn, que explora as diferentes propriedades de solubilidade das proteínas plasmáticas. Durante esse processo, os cientistas extraíram gradativamente diferentes “fracionamentos”, variando a concentração do solvente, o pH, a concentração de sal e a temperatura. Este método foi utilizado pela primeira vez para a comercialização de albumina humana e posteriormente adotado para a produção de albumina sérica bovina.
“A diversidade e a estabilidade da albumina sérica bovina fazem dela um parceiro ideal para muitos experimentos científicos.”
Propriedades da albumina sérica bovina
O polipeptídeo precursor completo da BSA consiste em 607 aminoácidos. Após a secreção, o peptídeo sinal de 18 resíduos no terminal N é clivado, de modo que o produto inicial consiste em 589 resíduos de aminoácidos. Em seguida, 6 aminoácidos são removidos para formar a proteína BSA madura, que contém 583 aminoácidos. BSA possui três domínios homólogos, mas estruturalmente diferentes, chamados I, II e III respectivamente, e cada domínio é subdividido em dois subdomínios, A e B.
As propriedades físicas do BSA são as seguintes:
- Número de resíduos de aminoácidos: 583
- Peso molecular: 66.463 Da (aproximadamente 66,5 kDa)
- Ponto isoelétrico a 25°C: 4,7
- Coeficiente de extinção em 279 nm: 43.824 M⁻¹cm⁻¹
Além disso, a BSA mede aproximadamente 140 × 40 × 40 Å e exibe uma forma oval com uma pá longa.
Função
Como outras albuminas séricas, a BSA desempenha um papel fundamental na manutenção da pressão do ácido fosfônico nos capilares, transportando ácidos graxos, bilirrubina, minerais e hormônios, e também serve como anticoagulante e antioxidante. Existem aproximadamente 6 locais de ligação de ácidos graxos de cadeia longa na BSA, com os três mais fortes localizados em cada domínio.
"A albumina sérica bovina é mais do que apenas uma proteína, é uma ponte entre a pesquisa laboratorial e os mecanismos biológicos."
Aplicativo
A BSA é frequentemente utilizada como modelo para outras albuminas séricas, especialmente albumina sérica humana, com uma homologia estrutural de até 76%. Em aplicações bioquímicas, incluindo ensaios imunoenzimáticos (ELISAs), imunotransferência e imuno-histoquímica, a BSA é frequentemente usada como estimulante ou inibidor. Na imuno-histoquímica, as secções de tecido são frequentemente incubadas com agentes bloqueadores de BSA para ligar locais de ligação não específicos, o que pode melhorar a especificidade do anticorpo para o antigénio e tornar os resultados experimentais mais precisos.
BSA também é usado como nutriente em culturas celulares e microbianas. Durante a digestão com enzimas de restrição, a BSA estabiliza algumas enzimas digeridas e evita que elas adiram aos tubos de reação, pontas de pipetas e outros recipientes. O mais interessante é que a BSA é frequentemente usada para determinar a quantidade de outras proteínas comparando a quantidade de proteína desconhecida com a quantidade conhecida de BSA (por exemplo, Bradford Protein Assay).
"BSA é popular por seu baixo impacto e custo-benefício em múltiplas reações bioquímicas."
Além disso, outro uso da BSA é isolar temporariamente substâncias que dificultam a atividade de certas enzimas, o que muitas vezes afeta o desempenho da reação em cadeia da polimerase (PCR). A BSA também tem sido amplamente utilizada na síntese de nanoestruturas e na avaliação dos efeitos tóxicos ou benéficos de íons metálicos e seus complexos, promovendo, sem dúvida, pesquisas em diversos campos.
Em suma, a albumina sérica bovina é, sem dúvida, um "assistente universal" indispensável na investigação científica. A sua diversidade e ampla gama de aplicações permitem-lhe desempenhar um papel fundamental na investigação laboratorial. Então, quais novas aplicações BSA não descobertas existirão no futuro?
