在组织学中,H&E染色(红蓝染色)是最为广泛使用的染色方式之一,并且它在医学诊断中被认为是金标准。当病理学家检查可疑癌症的活检时,H&E染色无疑是其常用的染色技术。这一染色法结合了两种主要的组织染色剂,血蓝学染剂和伊红,分别为细胞核和细胞质附上鲜明的颜色。
H&E染色能让病理学家轻松区分核和细胞质部分,并通过颜色的整体模式提供组织样本结构的概览。
血蓝学染剂将细胞核染成紫蓝色,而伊红则将细胞外基质和细胞质染成粉红色,各种细胞结构则呈现出不同的色调和混合色彩。这种颜色的对比使得病理学家可以快速识别细胞的核和质,并且能够识别出组织的整体分布和结构。
H&E染色之所以成为组织学的主要染色方法,部分原因是其操作快速、成本低廉,且能够揭示大量的显微解剖学细节。这使其能够广泛用于多种病理状况的诊断。尽管H&E染色的结果不会过于依赖于固定组织所使用的化学物质或实验室的操作不一致,但在某些情况下,则需要更专门的染色和方法来获得足够的对比以识别所有的组织和细胞结构。
目前有许多制备血蓝学溶液的方式,而随着不同的实验室协定,H&E染色的制作流程也各不相同。尽管没有标准化的操作流程,但根据惯例,细胞核应为蓝色,细胞质和细胞外基质则为粉红色。实验室通常会根据特定病理学家的需求来调整染色的数量或类型。
在一系列过程中,组织样本需经过固定、脱水和嵌入等步骤,最后会被切成薄片并附在显微镜载片上。 H&E染色法使用的染剂包括与金属盐(或称为固定剂)混合的血蓝学,并通过在弱酸溶液中冲洗去除多余的染色,然后再用微碱性水进行漂白处理。在染色完成后,组织样本会被固定于酒精中并进行玛赫手术。
使用血蓝学染剂所染的细胞核,主要呈现蓝色或深紫色,同时还包括一些组织结构,如角蛋白颗粒和钙化物。伊红会把细胞质及部分其他结构染成多达五种不同的粉红色,这些肉色的结构主要由细胞内或细胞外的蛋白质组成。
大多数细胞质会被伊红染成粉红色,红血球则会被染成鲜红色。
血蓝学实际上是经过氧化的化合物,当与固定剂(多数情况下为铝盐)结合时,便会出现颜色。血蓝学具有正电性,进而吸附DNA等细胞成分;而伊红则带有负电荷。
根据证据,血蓝学的变体(即血蓝盐合金)能够与DNA及细胞核中的蛋白质交联,因而赋予细胞核特有的蓝色。而由于某些结构如基底膜,需使用PAS染色或银染等特殊方法才能清晰可见。
在许多组织切片样本中,H&E染色的重要性不言而喻。举例来说,在乳腺组织的检测中,H&E染色可以有效帮助识别潜在的病变。而在肝脏病理检查中,H&E表现的细胞结构所含信息,可以指引医生对疾病进行分类和治疗规划。
对于肿瘤的检测,病理学家能通过H&E染色观察细胞形状、大小以及组织结构,以便进一步评估肿瘤的良恶性并制定相应的治疗方案。
H&E染色不仅简便易行,其可重复性以及显示出丰富结构的能力,使得它成为了医学诊断中不可或缺的重要工具,但这是否代表了H&E的未来仍将一帆风顺呢?